李弘剑
- 作品数：112 被引量：219H指数：8
- 供职机构：暨南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- 基因重组生产具缓释功能胰高血糖素样多肽-1衍生物的优化极其临床前研究
- 黎婉圆李弘剑杨鹊李任强黄晓曼冉延红杜少平马义杨础华黄秀梅
- 2009年5月13日，广州市科技局组织并主持召开了由广州市微生物研究所承担、暨南大学生命科学技术学院和广州市医药工业研究所参加的广州市科技计划项目“基因重组生产具缓释功能胰高血糖素样多肽-1衍生物的优化及其临床前研究”(...
- 关键词：
- 关键词：基因工程
- 基于Red重组系统构建含Flag标签标记UL23基因的重组人巨细胞病毒
- 2012年
- 利用来源于λ噬菌体的Red系统,将Flag标签及两侧带有FRT位点的卡那霉素抗性基因片段插入原HCMV TowneBAC中UL23基因3'末端区域,通过卡那抗性筛选带有抗性标记的重组菌株,并通过表达重组酶FLP的质粒pCP20去除卡那霉素抗性基因,得到带有Flag标签标记UL23基因和单一FRT位点的突变BAC。重组后的BAC分子同质粒pcDNA3.1(+)-pUL82共转染HFF细胞后重建重组HCMV。Western blotting检测证实所构建重组病毒能够表达含Flag标签标记的pUL23蛋白。此含有Flag标签标记UL23基因的重组HCMV的成功构建为了进一步研究人巨细胞病毒UL23基因及其产物的功能提供依据。
- 胡嘉淼肖静刘明亮曾宝娟李婧惠李继东周天鸿冉艳红李弘剑
- 关键词：RED同源重组
- 多糖裂解酶编码基因04147在制备重组桃胶多糖水解酶中的应用
- 本发明公开了多糖裂解酶编码基因04147在制备重组桃胶多糖水解酶中的应用，本发明通过将SEQ ID NO:3所示优化后的多糖裂解酶编码基因连接至带6×His标签的表达载体pET28a中，转化至大肠杆菌，得重组表达菌；再将...
- 冉艳红邓进丰杨晓苹王超张欣李弘剑
- Identification the Interaction of HCMV Tugment Protein pUL23 and Human CLIC1
- The Human cytomegalovirus(HCMV) Towne strain UL23 ORF deletion mutant exhibited enhanced growth in HFF cells,s...
- 李实骞姚伙旺周天鸿李弘剑
- 大规模纯化含有HisTaq和甲酸水解位点的融合蛋白的方法
- 本发明公开了一种大规模纯化含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白的方法与应用。该方法包括如下步骤：对表达含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白的工程菌发酵液进行预处理，得到含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋...
- 李弘剑郑飞冉艳红苏正定周天鸿
- 文献传递
- 利用乳糖诱导pMFH载体生产重组蛋白的发酵方法
- 本发明公开了一种利用乳糖诱导pMFH载体生产重组蛋白的发酵方法。本发明主要通过优化发酵培养基的配方、诱导前补料液的配方、诱导后补料液的配方、乳糖诱导液的配方以及发酵参数，成功运用乳糖替代IPTG作为诱导剂来诱导目的蛋白的...
- 李弘剑蒋德旗苏正定周天鸿冉艳红
- 引导RNase P核酶的外部引导序列及其在制备抗HCMV药物中的应用
- 本发明公开一种可引导RNase P核酶的12nt的EGS，包括以RNA为基础的EGS其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，和以DNA为基础的EGS，其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明的EGS能够高效抑制...
- 周天鸿曾志锋李弘剑李月琴张欣
- 文献传递
- 人β地中海贫血β^41/42突变基因的克隆和真核表达体系的构建被引量：3
- 2008年
- 目的:克隆人地中海贫血基因β41/42及调控系列LCR,构建该致病基因的体外真核表达体系,为该病基因治疗的研究提供理想模型。方法:抽提β41/42纯合子患者的DNA,PCR扩增出人β珠蛋白基因座控制区(LCR)和β41/42基因,将其串连克隆至真核稳定表达质粒pcDNA3.1-中,脂质体转染至小鼠红白血病细胞(MEL),DMSO诱导MEL细胞表达,逆转录PCR检测人β41/42基因在MEL中的表达。结果:成功构建了人β41/42突变基因的真核表达系统。结论:β41/42基因在MEL细胞中的表达情况与设计的表达完全一致,为该病的基因治疗研究提供了一个理想模型。
- 唐晖李弘剑张欣李月琴周天鸿汤绍辉张文军程龙球
- 关键词：地中海贫血基因疗法急性白血病幼红细胞
- RNase P核酶对人巨细胞病毒UL54基因mRNA体外切割作用被引量：2
- 2004年
- 外部引导序列(EGSs)是mRNA靶序列互补并引导RNase P切割的小RNA片段。我们设计与人巨细胞病毒HCMV(Human Cytomegalovirus) UL54基因mRNA序列互补的EGSs,将其与大肠杆菌来源RNase P催化核心M1 RNA构建成M1GS核酶。通过对UL54基因亚克隆片转录产物体外切割研究,证实该核酶具备对UL54 mRNA片段的特异切割能力,可以发展成为一种抗病毒试剂。
- 周乐平李弘剑陈浩军李月琴何华坤王波周天鸿
- 关键词：MRNA
- DNA外部引导序列EGS抑制人巨细胞病毒基因表达及病毒繁殖的研究
- 人类巨细胞病毒(HCMV)是一类严重危害免疫力低下以及免疫缺陷人群的病原体。近 20年来,随着免疫力低下状态人群的逐渐增多,HCMV感染及其引发的严重疾病有日益增加的趋势。目前临床治疗的药物如更昔洛韦(GCV)等虽被证实...
- 张文军崔凯涛孙亮贾雪芳李月琴张欣李弘剑周天鸿
- 文献传递
