李文浩
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
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- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- HPLC法同时测定茶新那敏薄膜包衣片中三组分的含量被引量：3
- 2012年
- 目的:建立HPLC法同时测定茶新那敏薄膜包衣片中茶碱、盐酸溴己新和马来酸氯苯那敏的含量。方法:采用ZORBAXExtend-C18(25 cm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以甲醇-乙腈-0.017 mol·L-1高氯酸液[取高氯酸(70%～72%)2.4 mL,加水1000 mL,用三乙胺调节pH至3.5±0.02](45∶5∶50)为流动相;流速1.0 mL·min-1;检测波长220 nm;进样量为10μL;柱温:30℃。结果:茶碱浓度在75.28～752.8μg·mL-1之间、盐酸溴己新浓度在16.12～161.2μg·mL-1之间、马来酸氯苯那敏浓度在1.488～14.88μg·mL-1之间均与峰面积呈良好线性关系,r=0.9993～1.000;茶碱、盐酸溴己新、马来酸氯苯那敏低、中、高3个浓度平均加样回收率分别为100.1%～101.5%,98.0～101.0%,99.6%～102.7%;平均回收率分别为100.7%(RSD=0.72%),99.4%(RSD=1.5%),101.0%(RSD=1.6%)。结论:本法操作简便,结果准确,可作为该制剂的质量控制方法。
- 尹清李文浩徐宏祥傅应华
- 关键词：茶碱盐酸溴己新马来酸氯苯那敏
- HER2基因RNA干扰质粒对SK-BR-3细胞增殖及凋亡的影响被引量：3
- 2011年
- 目的探讨HER2基因高效RNA干扰质粒转染到SK-BR-3乳腺癌细胞后,对细胞的增殖及其凋亡的影响。方法采用脂质体转染法将针对HER2基因的高效RNA干扰质粒转染至乳腺癌细胞SK-BR-3中,通过细胞计数、MTT比色法、流式细胞术和Western blot检测PCNA增殖细胞核抗原,分析检测其对SK-BR-3细胞增殖、凋亡的影响。结果 MTT比色测定显示,HER2-shRNA2干扰质粒转染到SK-BR-3细胞后在48 h后现抑制,与空白对照组比抑制率分别为48 h 16.53%7、2h 39.03%9、6h 65.47%。流式细胞分析HER2-shRNA组细胞在96 h凋亡率达17.36%,明显高于阴性对照组的1.41%和空白对照组的1.25%(P<0.05)。结论将RNA干扰质粒HER2-shRNA2转染至SK-BR-3细胞中,可特异性地抑制SK-BR-3细胞的增殖并诱导其凋亡,为乳腺癌的靶向治疗奠定了基础。
- 韩冬徐煌李文浩张成文
- 关键词：HER2基因RNA干扰乳腺癌
- shRNA基因沉默靶向治疗对乳腺癌细胞HER2表达的影响
- 2011年
- 目的构建针对HER2基因RNA干扰的真核表达载体并筛选出HER2基因的高效RNA干扰序列。方法采用化学合成方法合成三段针对HER2基因的shRNA,通过酶切连接方法与真核表达载体pSuper/GFP/neo相连接,构建针对HER2基因的RNA干扰载体,并通过酶切和测序方法鉴定是否含有设计的shRNA。应用脂质体转染试剂分别转染载体到人乳腺癌SK-BR-3细胞中,采用实时定量PCR和Western印迹检测其对HER2基因沉默的效果。结果 EcoRⅠ和HindⅢ进行双酶切鉴定,281 bp条带出现,证明质粒中插入外源基因,再经测序证实含有设计的shRNA序列。实时定量PCR和Western印迹结果显示3段shRNA均可降低HER2 mRNA的水平并且降低跨膜蛋白HER2的表达,其中shRNA2的HER2 mR-NA抑制效率最高,达到89%。结论构建了3个真核表达载体pSuper/GFP/neo-HER2,并筛选出shRNA2这段序列,可以有效沉默人乳腺癌细胞系SK-BR-3的HER2基因,为乳腺癌的HER2基因沉默靶向治疗奠定了基础。
- 韩冬徐煌张成文李文浩
- 关键词：HER2基因RNA干扰乳腺癌
- 茶新那敏包衣片含量测定方法研究被引量：2
- 2012年
- 研究了茶新那敏包衣片的含量测定方法.采用紫外分光光度法,以0.01mol·L-1氢氧化钠溶液为溶剂,在无水茶碱最大吸收波长275nm处测定含量;以0.1mol·L-1盐酸溶液为溶剂,在盐酸溴己新最大吸收波长311nm处测定含量的方法.结果显示氨茶碱与盐酸溴己新浓度与吸光度均呈良好线性关系(r=0.9999).平均回收率氨茶碱为100.8%,RSD=0.48%(n=6);盐酸溴己新为101.1%,RSD=0.82%(n=6).从而得出结论,紫外分光光度法可作为茶新那敏包衣片的含量测定,其不影响原质量标准中氨茶碱和盐酸溴己新含量测定结果.
- 邓逸云李文浩方季惟傅应华
- 关键词：氨茶碱盐酸溴己新紫外分光光度法
