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李晓冬: 作品数：10 被引量：20H指数：2; 供职机构：天津医科大学更多>>; 发文基金：天津市应用基础与前沿技术研究计划重点项目国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>; 相关领域：生物学医药卫生更多>>

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血清甲状腺激素(T<,3>、T<,4>)的固相酶免疫测定--方法学探讨及临床应用: 李晓冬

不同剂量卡格列净联合二甲双胍治疗2型糖尿病临床疗效的Meta分析被引量：15: 2022年; 背景卡格列净(CANA)和二甲双胍(MET)均可用于治疗2型糖尿病(T2DM),但联合使用的临床疗效有待进一步明确。目的评价CANA联合MET治疗T2DM的疗效和安全性,为T2DM的治疗提供临床参考。方法计算机检索PubMed、Cochrane Library、EMBase、Clinical Trails.gov、中国知网、维普网、万方数据知识服务平台,检索有关100 mg和/或300 mg的CANA联合MET治疗T2DM的随机对照试验(RCTs)(CANA联合MET组给予CANA联合MET,安慰剂对照组给予单用MET或者安慰剂联合MET/活性对照组给予其他口服降糖药物联合MET),检索时间为建库至2021-04-18,同时手工检索纳入文献的参考文献。经文献筛选、提取数据和质量评价后,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果共纳入9篇RCTs,6224例患者。Meta分析结果显示,100 mg CANA联合MET组和300 mg CANA联合MET组糖化血红蛋白(HbA;)、空腹血糖(FPG)、体质量、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、三酰甘油(TG)水平均低于安慰剂对照组(P<0.05),胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平高于安慰剂对照组(P<0.05)。300 mg CANA联合MET组HbA;、SBP均低于活性对照组,HOMA-β水平高于活性对照组(P<0.05)。100 mg CANA联合MET组和300 mg CANA联合MET组FPG、体质量、DBP、TG均低于活性对照组,LDL-C、HDL-C水平均高于活性对照组(P<0.05)。100 mg CANA联合MET组生殖系统感染(女性)发生率高于安慰剂对照组(P<0.05);300 mg CANA联合MET组生殖系统感染(女性)、渗透利尿相关不良事件发生率均高于安慰剂对照组(P<0.05);100 mg CANA联合MET组和300 mg CANA联合MET组生殖系统感染(男性)、生殖系统感染(女性)、渗透利尿相关不良事件发生率均高于活性对照组(P<0.05)。结论100 mg和300 mg CANA联合MET能有效降低T2DM患者HbA;、FPG,减轻体质量,降低血压和TG水平,提高LDL-C、HDL-C水平。对于MET控制不佳的T2DM患者,可考虑与CANA联合使用,; 陈玉英李晓冬李晓冬李代清; 关键词：糖尿病二甲双胍 META分析

P100蛋白及其片段重组质粒构建与表达被引量：1: 2009年; 目的分别将人类p100基因，p100的SN基因片段和TD片段定向连入pERFP-CI质粒，使它们可与红色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达，从而为进一步研究P100蛋白及其片段的定位、功能及与其它蛋白的相互关系奠定实验基础。方法PCR分别扩增出P100蛋白全长，SN片段和TD片段基因的序列，定向克隆至真核表达载体pERFP-CI，构建相应的3种重组质粒。将构建成功的质粒转染入HeLa细胞，荧光显微镜下可观察红色荧光融合蛋白表达。结果①PCR法获得P100基因序列，长度为2659bp，SN基因片段1918bp，TD基因片段741bp；②将重组质粒直接进行双酶切鉴定可见P100片段，将经过蓝白斑筛选后的重组子经双酶切再与pERFP-CI载体连接并酶切得到SN片段和TD片段；③转染重组质粒后可观察到红色荧光蛋白的表达。结论3种外源片段成功载人pERFP-CI质粒；P100全长、SN片段、TD片段均可与红色荧光蛋白在HeLa细胞中融合表达。; 陆燕欣李晓冬何津著葛林杨洁; 关键词：重组质粒融合蛋白

重组Pegfp-C2-PSF质粒的构建及表达被引量：1: 2009年; 目的将人类PSF基因定向连人pEGFP-C2质粒，使PSF蛋白可与绿色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达，为进一步研究PSF蛋白的功能及定位奠定实验基础。方法采用EcoR I和Sal I双酶切方法，从pGEX-2TK-PSF质粒中获得PSF蛋白的cDNA全长；连入pEGFP-C2质粒的C端。将构建成功的pEGFP-C2-PSF质粒转染人HeLa细胞，荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达。结果①将该质粒进行双酶切鉴定可见PSF片段；②转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达。结论①PSFcDNA全长成功连入pEG-FP-C2质粒；②PSF蛋白可与绿色荧光蛋白在HeLa细胞中融合表达。; 东莉洁李晓冬何津岩姚智杨洁; 关键词：PEGFP-C2 重组质粒融合蛋白

重组pEGFP-C2-p100质粒构建及表达被引量：2: 2008年; 目的:将人类p100基因定向连入pEGFP-C2质粒,使p100蛋白可与绿色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达,为进一步研究p100蛋白的功能及定位奠定实验基础。方法:采用EcoRI和BamHI双酶切方法,从pSG5-p100质粒中获得p100蛋白的cDNA全长;将该cDNA连接入pEGFP-C2质粒。将构建成功的pEGFP-C2-p100质粒转染入HeLa细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达。结果:(1)将该质粒进行双酶切鉴定可见p100片段。(2)转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达。结论:(1)p100 cDNA全长成功载入pEGFP-C2质粒。(2)p100蛋白可与绿色荧光蛋白在HeLa细胞中融合表达。; 何津岩东莉洁葛林赵钢邵洁陆燕欣李晓冬姚智杨洁; 关键词：PEGFP-C2 重组质粒融合蛋白

重组pEGFP—hSnu 114质粒的构建及表达: 2009年; 目的将hSnu114基因定向连人pEGFP质粒GFP的下游，使hSnu114蛋白可与绿色荧光蛋白在真核细胞内融合表达。从而为进一步研究hSnu114蛋白的功能奠定实验基础。方法本实验已经构建tr1E57R／T—hSnu114和pcDNA3．1（-）-hSnu114重组质粒，想要构建pEGFP—hSnu114重组质粒，需通过引入SalⅠ酶切位点，调整N端起始密码子与绿色荧光蛋白（green fluorescence protein，GFP）基因之间的序列，使其不破坏读码框，融合蛋白正确表达。PCR扩增出hSnu114的第一部份（SalⅠ～MunⅠ基因序列），从hSnu114-peDNA3．1（-）重组质粒回收hSnu114的第二部分（MunI～BamHI片段），定向克隆至T／A载体，构建hSnu114全长（SalI～BamHI）pTZ57R／T重组质粒。采用SalI和BamHI双酶切方法，从重组质粒中获得hSnu114全长，将该基因片段连接入pEGFP质粒。将构建成功的pEGFP—hSnu114质粒，转染人HeLa细胞，荧光显微镜下可观察绿色荧光蛋白表达。进行Western印迹检测。结果①hSnu114Sal1～MunI目的片段获取。②将该pEGFP—hSnu114质粒进行双酶切鉴定可见hSnu114全长片段。③转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达。④Western印迹可检测到pEGFP—hSnu114融合蛋白：结论①hSnu114全长成功载入pEGFP质粒。②hSnu114蛋白可与绿色荧光蛋白在真核细胞中融合表达。; 李晓冬方建飞东莉洁葛林何津岩杨洁; 关键词：重组质粒融合蛋白

重组质粒pEGFP—C1-STAT6的构建及在HeLa细胞中表达: 2009年; 目的构建以增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescence protein，EGFP）为报告基因的重组质粒pEGFP—C1-STAT6．观察其在HeLa细胞中的表达。方法以重组质粒pCLNEO—STAT6为模板，PCR法扩增出目的基因，将扩增片段双酶切后连接到质粒pEGFP—C1上，构建重组质粒pEGFP—C1-STAT6，脂质体法转染HeLa细胞，western印迹检测融合蛋白的表达，并在荧光显微镜下观察融合蛋白的定位和分布。结果成功构建质粒pEGFP—C1—STAT6，并在HeLa细胞中实现表达；Western印迹检测到融合蛋白EGFP—STAT6；在荧光显微镜下观察到绿色的融合蛋白表达和定位。结论重组质粒pEGFP—C1-STAT6构建成功，可用于标记STAT6蛋白，为进一步研究STAT6在信号转导中的作用机制奠定基础。; 方建飞李晓冬何津岩葛林杨洁; 关键词：增强型绿色荧光蛋白 STAT6 重组质粒

U5 snRNP在前体mRNA剪接加工中的作用: 2008年; 前体mRNA的剪接是基因表达过程中的关键一步,发生在基因的转录之后与蛋白合成之前。在由前体mRNA剪接加工而形成成熟mRNA时,需要将转录本中的内含子切除,因为它会干扰基因的表达。前体mRNA的剪接发生在细胞核中,是在一个大的RNA与蛋白质的复合体即剪接体的催化下完成的。复合体中含有U1、U2、U5,二聚体形式的U4/U6小核RNA(snRNA)和一些小核核糖核蛋白(snRNP)。U5snRNP特异蛋白包括hPrp8,hSnu114(aGTPase),hBrr2(aDExH/Dboxhelicase)和Prp28等。Prp8构成剪接体的催化核心,hSnu114可避免剪接复合体过早的活化。因此,U5snRNP在剪接体聚集过程和前体mRNA的剪接反应中发挥重要作用。; 李晓冬杨洁; 关键词：前体MRNA 剪接

p100蛋白与U5-116蛋白的相互结合作用: 目的：真核基因的表达过程，包括DNA转录、pre-mRNA剪接、翻译等步骤。其中DNA转录和pre-mRNA剪接是两个重要环节，它们都要通过复杂的蛋白复合物来执行功能，涉及到蛋白-DNA、蛋白-RNA和蛋白-...; 李晓冬; 关键词：剪接体分子机制; 文献传递

pEGFP-CI-G3BP转染Hela细胞及其在细胞中的表达被引量：1: 2008年; 目的:了解G3BP蛋白在细胞中的表达及定位。方法:利用脂质体lipofectamine2000将提取的质粒pEGFP-CI-G3BP转染进入Hela细胞,培养24h后荧光倒置显微镜观察绿色荧光的表达情况及其在细胞中的定位。结果:pEGFP-CI-G3BP质粒被成功转入Hela细胞内,转染后绿色荧光可高效表达,分布在细胞胞浆中。结论:脂质体法是一种高效的转染pEGFP-CI-G3BP的方法,表达的G3BP蛋白定位于细胞的胞浆部分。; 葛林步天栩何津岩邵洁东莉洁方建飞李晓冬孙晓明杨洁; 关键词：HELA细胞脂质体载体蛋白质类转染

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