李景涛
- 作品数：10 被引量：23H指数：3
- 供职机构：广西医科大学附属肿瘤医院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科学研究与技术开发计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 赖氨酰氧化酶在乳腺癌侵袭转移中的作用机制被引量：6
- 2012年
- 目的探讨赖氨酰氧化酶（LOX）基因特异性RNA干扰对乳腺癌细胞侵袭转移的影响及机制。方法构建LOX基因特异性的慢病毒干扰载体（LOX-RNAi-LV），转染至乳腺癌细胞MDA—MB-231，实时定量荧光PCR检测MDA-MB-231细胞中LOX及转移相关因子基质金属蛋白酶（MMP）2、9的表达，Western印迹检测LOX蛋白的表达，细胞侵袭试验（Transwell小室）检测转染前后细胞侵袭迁移能力变化。免疫组织化学法检测111例乳腺癌组织、癌旁乳腺组织及20例乳腺良性病变组织中LOX的表达，并对其与临床病理资料及MMP-2、MMP-9的相关性进行分析。结果转染LOX—RNAi-LV后乳腺癌细胞MDA—MB-231中的LOXmRNA和蛋白被明显抑制，抑制率分别为89．2％±1．3％和8414％±0．4％；干扰组细胞MMP-2、MMP-9mRNA相对表达量分别为0．496±0．021和0．571±0．099，均明显低于阴性对照组（0．846±0．047，0．786-4-0．042）和空白对照组（1．000±0．000，1．000±0．000）（均P〈0．05）；Transwell侵袭和迁移实验中，干扰组穿过Transwell小室滤过膜细胞数分别为47±2和63±2，均明显少于阴性对照组（100±1，118±2）和空白对照组（100±1，118±2）（均P=0．000）：LOX蛋白在人乳腺癌、癌旁乳腺组织及乳腺良性肿瘤组织中的表达率分别为48．6％（54／111）、26．1％（29／111）、20．0％（4／20），乳腺癌组织中LOX蛋白的表达率明显高于癌旁乳腺组织及乳腺良性肿瘤组织（P=0．019）。LOX蛋白在不同肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移的表达率差异有统计学意义。相关分析显示，LOX蛋白表达与MMP-2（r=0．262，P=0．005）、MMP-9（r=0．424，P=0．000）蛋白之间呈显著正相关。结论LOX可以促进乳腺癌的侵袭转移；LOX和MMP-2、MMP-9转移因子可能具有协同促进作用，促进了乳腺癌的侵袭转移。
- 刘剑仑韦薇唐玮蒋奕杨华伟李景涛
- 关键词：乳腺肿瘤RNA干扰肿瘤侵袭肿瘤转移
- 干扰赖氨酰氧化酶基因对乳癌 MDA-MB-231细胞生物学的影响
- 2013年
- 目的观察抑制赖氨酰氧化酶（LOX）基因表达后对MDA-MB-231细胞的生物学特性的影响。方法将细胞分为实验组、空白对照组和阴性对照组，采用病毒转染法，应用噻唑蓝（MTT）法、细胞集落形成实验、流式细胞仪和细胞侵袭迁移实验检测结果。结果24、48、72、96h3 组细胞抑制率分别是（12. 73 ±3. 30）% .（33.93 ± 1. 99）% ,（52. 63 ± 1.04）% ,（63. 80 ±0. 70）%;0、0、0、0;（7. 60 ±6. 27）%、（ 10. 30 ± 1. 49）%、（9.10 ±2. 69）%、（6. 03 ± 1. 21）%，差异有统计学意义（P 〈0.05）。细胞周期时相差异无统计学意义（P〉0.05）。细胞侵袭实验结果分别为47±2、100±1、88±2,差异有统计学意义（P〈0.05）;细胞迁移实验结果分别为63 ±2,118 ±2,96 ±2，差异有统计学意义（P〈0. 05） 0结论干扰LOX基因的表达可抑制MDA-MB-231细胞的生物学特性。
- 李德全李景涛刘剑仑杨华伟
- 关键词：乳癌RNA干扰生物学特性
- 赖氨酰氧化酶表达干扰对乳腺癌裸鼠移植瘤生长影响及机制研究被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨抑制乳腺癌细胞MD-MB-231中赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)的表达对乳腺癌裸鼠移植瘤生长的影响及可能机制。方法:设计合成特异性LOX基因慢病毒干扰载体(LOX-RNAi-LV)转染乳腺癌细胞MDA-MB-231,采用荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测LOX mRNA和蛋白的表达;建立乳腺癌裸鼠原位移植模型,观察移植瘤的生长情况。采用免疫组化方法检测移植瘤组织中LOX蛋白及肿瘤增殖、转移相关蛋白Ki-67、MMP-2、MMP-9和HIF-1α的表达。结果:转染LOX-RNAi-LV的人乳腺癌细胞MDA-MB-231中LOX mRNA和蛋白的相对表达量分别为0.102±0.083和0.156±0.004,与空白对照组(0.945±0.158和0.916±0.007)相比,表达率均明显下调,抑制率分别为89.2%和83.0%。裸鼠原位接种癌细胞后6d均有肿瘤生成,40d后接种转染LOX-RNAi-LV的MDA-MB-231细胞的裸鼠移植瘤体积为(108.89±26.61)mm3,质量为(0.117±0.021)g;均明显低于空白对照组(400.15±79.81)mm3,(0.433±0.068)g,以及阴性对照组(380.15±65.81)mm3,(0.404±0.053)g,差异有统计学意义,P值均为0.000。移植瘤组织中LOX、Ki-67、MMP-2、MMP-9和HIF-1α蛋白相对表达水平分别为0.198±0.036、0.347±0.054、0.379±0.048、0.335±0.067和0.307±0.073,较空白对照组和阴性对照组明显降低,P值均<0.01。结论:干扰MDA-MB-231中LOX的表达,可抑制乳腺癌裸鼠移植瘤的生长侵袭,LOX可能通过调节Ki-67、MMP-2、MMP-9和HIF-1α蛋白的表达,在乳腺癌的侵袭转移中发挥作用。
- 韦薇刘剑仑李景涛刘启鹏蒋奕唐玮杨华伟
- 关键词：乳腺肿瘤赖氨酰氧化酶RNA干扰裸鼠
- 赖氨酰氧化酶与乳腺癌侵袭转移相关因子的研究被引量：3
- 2013年
- 目的探讨赖氨酰氧化酶(LOX)与乳腺癌侵袭转移相关因子基质金属蛋白酶(MMPs)及低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的相关性以及LOX在乳腺癌侵袭转移中的可能机制。方法构建LOX基因的特异性慢病毒干扰载体(LOX-RNAi-LV),稳定转染至乳腺癌细胞MDA-MB-231,实验设空白组、干扰组和阴性对照组,实时定量荧光PCR检测3组细胞中LOX、MMP-2、MMP-9和HIF-1α的表达,Western blot检测各组LOX蛋白的表达;构建乳腺癌细胞MDA-MB-231,MCF-7和LOX基因干扰的MDA-MB-231裸鼠移植瘤模型,6周后测定移植肿瘤的生长及转移情况,SP免疫组织化学技术检测移植瘤中LOX、MMP-2、MMP-9及HIF-1α蛋白的表达情况。结果转染LOX-RNAi-LV后乳腺癌细胞MDA-MB-231中的LOX mRNA和蛋白被明显抑制,抑制率为89.20%和82.97%,差异有统计学意义(P<0.05);干扰组的MMP-2、MMP-9及HIF-1α表达与阴性对照组及空白组比较差异有统计学意义(P<0.05);6周后裸鼠的MDA-MB-231组LOX、MMP-2、MMP-9及HIF-1α蛋白表达水平明显高于LOX基因干扰组及MCF-7组,相关分析显示,LOX蛋白与MMP-2(r=0.696,P=0.000)、MMP-9(r=0.735,P=0.000)、HIF-1α(r=0.737,P=0.000)蛋白呈显著正相关。结论 LOX-RNAi-LV可有效下调乳腺癌细胞MDA-MB-231中LOX mRNA和蛋白表达水平;LOX促进乳腺癌侵袭转移的机制可能与MMP-2、MMP-9及HIF-1α的异常表达相关。
- 杨华伟刘剑仑李景涛刘起鹏韦薇唐玮蒋奕
- 关键词：乳腺肿瘤赖氨酰氧化酶基质金属蛋白酶低氧诱导因子-1Α
- 干扰赖氨酰氧化酶基因对乳腺癌MDA-MB-231细胞生长、增殖的影响被引量：3
- 2012年
- 目的探讨抑制赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)基因表达对人乳腺癌MDA-MB-231细胞生长、增殖的影响及其机制。方法将乳腺癌MDA-MB-231细胞分为实验组(RNAi组)、阴性对照组(Mock组)和空白对照组(Con组);设计合成特异性慢病毒干扰载体(LOX-RNAi-LV)转染MDA-MB-231细胞。以荧光定量PCR检测LOX mRNA及增殖因子Ki-67、cyclinD1的表达;Western blot法检测LOX基因蛋白的表达水平;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、细胞集落形成实验观察各组细胞生长及增殖情况。结果转染LOX-RNAi-LV后,MDA-MB-231细胞中LOXmRNA和蛋白表达水平明显降低,细胞生长、增殖能力明显减弱,细胞集落形成率明显降低,相关增殖因子Ki-67和cyclin D1 mRNA的表达均明显下降(P<0.05)。结论转染LOX-RNAi-LV可有效干扰乳腺癌MDA-MB-231细胞中LOX mRNA和蛋白的表达,抑制肿瘤细胞的生长、增殖,其作用机制可能与下调Ki-67、cyclinD1的表达有关。
- 李景涛刘剑仑韦薇杨华伟蒋奕唐玮
- 关键词：乳腺肿瘤赖氨酰氧化酶RNA干扰增殖因子
- 慢病毒载体介导RNA干扰对乳腺癌MDA-MB-231细胞LOX基因表达的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:观察慢病毒干扰载体(LOX-RNAi-LV)转染对乳腺癌高侵袭转移潜能MDA-MB-231细胞LOX基因表达的影响。方法:设计合成特异性的LOX RNA干扰慢病毒载体,稳定转染至MDA-MB-231细胞中,实时定量PCR、Western blot检测LOX mRNA和蛋白的表达情况。结果:稳定转染慢病毒RNAi后,60h后有GFP荧光表达,72h后表达明显增强,转染率达90%;LOX mRNA和蛋白的表达被显著抑制,抑制率分别为89.2%和83%。结论:稳定转染慢病毒干扰载体(LOX-RNAi-LV)可有效抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231中LOX mRNA和蛋白表达。
- 李景涛刘剑仑韦薇杨华伟
- 关键词：乳腺癌赖氨酰氧化酶RNA干扰
- 干扰赖氨酰氧化酶对乳腺癌细胞增殖侵袭能力影响的研究
- 背景： 目前,乳腺癌的发病率已跃居为女性恶性肿瘤的首位,而乳腺癌的复发与转移则是导致乳腺癌患者死亡的最主要的原因。乳腺癌患者发生远处转移后其5年生存率仅仅为23%。因此,进一步的探索乳腺癌发生侵袭转移的相关机制,进而寻找...
- 李景涛
- 关键词：乳腺癌赖氨酰氧化酶慢病毒RNA干扰生长增殖
- 文献传递
- 赖氨酰氧化酶体内外对乳腺癌增殖和侵袭作用的研究被引量：3
- 2013年
- 目的探讨赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)对人乳腺癌细胞的生长增殖、侵袭及转移能力的影响及可能作用的机制。方法构建LOX基因的特异性慢病毒干扰载体(LOX-RNAi-LV),稳定转染至乳腺癌细胞MDA-MB-231,实验设3个组,即空白组(Con)、干扰组(RNAi)、阴性对照组(Mock),四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、细胞集落形成实验及流式细胞仪观察细胞生长及增殖情况,细胞侵袭迁移实验(Transwell)检测细胞侵袭及迁徙能力改变;免疫组织化学法检测111例人乳腺癌组织、癌旁乳腺组织及20例乳腺良性病变组织中LOX、基质金属蛋白酶(MMP-2,MMP-9)的表达,并对LOX与临床病理资料及MMP-2、MMP-9的相关性进行分析。结果转染72h后,MTT法显示干扰组细胞生长明显受抑制;细胞集落形成实验显示干扰组的细胞集落形成率明显低于空白组和对照组;Transwell侵袭和迁移实验结果显示RNAi组穿过Transwell小室滤过膜细胞数分别为47±2和63±2,差异有统计学意义(P=0.000);流式细胞仪测定细胞周期,3组之间差异无统计学意义。LOX蛋白在人乳腺癌、癌旁乳腺组织及乳腺良性肿瘤组织中的表达率分别为48.64%(54/111)、26.13%(29/111)、20.00%(4/20),乳腺癌组织中LOX蛋白的表达率明显高于癌旁乳腺组织及乳腺良性肿瘤组织(P=0.019)。LOX蛋白在不同肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移的表达率存在显著差异。相关分析显示,LOX蛋白表达与MMP-2(r=0.262,P=0.005)、MMP-9(r=0.424,P=0.000)蛋白之间呈显著正相关。结论 LOX可以促进乳腺癌的侵袭转移;LOX和MMP-2、MMP-9转移因子可能具有协同促进作用,促进了乳腺癌的侵袭转移。
- 杨华伟刘剑仑李景涛韦薇唐玮蒋奕
- 关键词：乳腺肿瘤赖氨酰氧化酶
- 干扰LOX表达对MDA-MB-231细胞侵袭迁移影响及其机制的探讨被引量：8
- 2012年
- 目的:研究干扰赖氨酰氧化酶(LOX)基因表达对乳腺癌细胞MDA-MB-231体外侵袭迁移能力的影响,并探讨相关机制及意义。方法:设计合成特异性慢病毒干扰载体(LOX-RNAi-LV)转染MDA-MB-231细胞,实时定量PCR检测LOX mRNA和侵袭转移相关因子MMP-2、MMP-9和HIF-1α的mRNA表达,蛋白质印迹法检测LOX蛋白表达,细胞侵袭迁移实验(Transwell)检测细胞侵袭迁移能力。结果:转染LOX-RNAi-LV后,乳腺癌MDA-MB-231细胞LOXmRNA和蛋白表达水平明显降低,与空白组相比,抑制率分别为89.2%和82.97%。MMP-2(F=225.271,P=0.0000)、MMP-9(F=35.373,P=0.000 01)和低氧诱导因子HIF-1α(F=341.081,P=0.0000)的mRNA表达均明显降低。细胞侵袭迁移实验显示,干扰组穿过Transwell小室滤过膜的细胞数明显少于对照组(侵袭实验F=269.557,P=0.000 5;迁移实验F=164.321,P=0.000 3)。结论:转染LOX-RNAi-LV能有效地干扰LOX在乳腺癌细胞MDA-MB-231中表达,抑制肿瘤细胞的侵袭和迁移能力,其作用机制可能与下调MMP-2、MMP-9和HIF-1α表达有关。
- 李景涛刘剑仑韦薇杨华伟
- 关键词：乳腺肿瘤赖氨酰氧化酶RNA干扰
- 赖氨酰氧化酶在乳腺癌侵袭转移中的作用机制研究
- 刘剑仑韦薇唐玮蒋奕杨华伟李景涛
- 关键词：乳腺癌赖氨酰氧化酶RNA干扰基质金属蛋白酶
