杜星
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：南开大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 铜绿假单胞菌PA0057基因的克隆、表达及其重组蛋白活性的初步研究
- 2014年
- 铜绿假单胞菌PA0057基因为Ⅳ类未知基因,通过NCBI比对,发现PA0057基因编码的蛋白与金属β-内酰胺酶同源性为96%,因此推测PA0057蛋白可能具有金属β内酰胺酶活性.提取铜绿假单胞菌PAOI基因组DNA,利用设计的引物通过PCR方法扩增得到PA0057基因,将其克隆至克隆载体pGEM-T,并转化人大肠杆菌DH5α;而后将其克隆至表达载体pET28a中,转化人大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,并通过Ni-NTA亲和柱进行纯化,纯化后蛋白超滤浓缩得高浓度蛋白;通过药敏纸片检测PA0057蛋白活性.
- 李明轩关新宇杜星徐海津白艳玲张秀明乔明强
- 关键词：铜绿假单胞菌金属Β-内酰胺酶
- pfm基因对铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统的影响
- 铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa，PA)为一种常见的能够生存于多种自然生境和动植物组织中革兰氏阴性细菌。它是临床最普遍的引发院内严重获得性感染的条件致病菌，常引发急性或慢性感染，如烧伤伤口感染、...
- 杜星
- 关键词：铜绿假单胞菌
- 文献传递
- 铜绿假单胞菌pfm基因对三型分泌系统效应蛋白的影响被引量：2
- 2013年
- 【目的】检测铜绿假单胞菌基因pfm对三型分泌系统效应蛋白的影响。【方法】构建pfm基因互补菌株pfmC。提取野生株PAO1、敲除株Δpfm和互补株pfmC的RNA,利用Real-time PCR从转录水平检测效应蛋白ExoS、ExoT和ExoY转录水平的变化。以ExoS为代表,检测细胞内和分泌到细胞外效应蛋白的含量。收集铜绿假单胞菌PAO1、Δpfm和pfmC菌体内和分泌到细胞外的总蛋白,利用ExoS多克隆抗体进行Western杂交,特异检测ExoS的蛋白水平。【结果】与野生型相比,Δpfm中exoS、exoT和exoY转录水平明显降低,而pfmC中这3个蛋白的转录水平得到回补。Δpfm菌体内和分泌到细胞外的ExoS量均明显低于野生株PAO1,pfmC细胞内和细胞外分泌的ExoS蛋白量均得到恢复。【结论】铜绿假单胞菌基因pfm会影响三型分泌系统效应蛋白的水平。
- 牟锐杜星王雪涵徐海津张秀明白艳玲乔明强
- 关键词：铜绿假单胞菌蛋白表达水平
