杨倬 作品数:12 被引量:19 H指数:3 供职机构: 中国科学院微生物研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 辽宁省教育厅资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
3,4-二羟基苯乙酸甲酯对肠道病毒71型在人横纹肌肉瘤细胞中复制的抑制 被引量:2 2012年 肠道病毒71型(enterovirus71,EV71)属于小RNA病毒科(Picrornaviridae)肠道病毒属(Enterovirus,EV),是手足口病的主要病原体。手足口病至今己在世界各地爆发流行,在亚洲国家流行更为严重。儿童感染EV71可引起发热、口腔黏膜溃疡性疱疹和四肢末端水疱样皮疹, 张迎秋 赵春晖 杨倬关键词:肠道病毒71型 抗病毒作用 抑制手足口病病毒基因的干扰RNA,包含其的载体及其应用 本发明提供了抑制引起手足口病病毒基因表达的方法,具体地涉及两种主要病原体肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16基因组的干扰RNA及其DNA序列,并包含所述干扰RNA的载体,由所述载体转录的干扰RNA用于制备预防和治疗手足口病的... 杨倬 田波文献传递 pSUPER介导的RNAi抗乙肝病毒S基因的研究 2008年 目的研究RNAi抗乙肝病毒的作用。方法设计并合成一段针对HBV S基因的干扰序列及一段无关的序列,克隆进pSUPER载体中,分别构建pSUPER-HBS、pSUPER-nonsense载体,然后将pSUPER、pSUPER-HBS、pSUPER-nonsense转染进HepG2.2.15细胞中,用ELISA方法对细胞上清中HBsAg、HBeAg进行检测。尾静脉注射HBV转基因小鼠,取血清检测。结果pSUPER-HBS所表达的siRNA成功的抑制了HepG 2.2.15上清及HBV转基因鼠血清中的HBsAg、HBeAg,抑制率分别达到70%、51%以及60%、42%。结论针对HBV S区的siRNA能明显抑制HBV的复制。 张敬武 栾慎顺 杨倬 刘长梅 张景海关键词:乙肝 乙肝病毒 S抗原 RNA干扰技术抗肠道病毒71型复制 2013年 目的肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV 71)是手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)主要的病原体之一。研究RNA干扰技术抑制肠道病毒71型复制。方法以RNA干扰技术(RNAi)为干预手段,抑制病毒EV 71在人横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RD)细胞中的复制。通过Western blot、Real-time PCR和病毒滴度3种方法验证,其抑制效果体现在感染细胞内部病毒RNA,病毒蛋白质的表达水平和培养基上清中子代病毒颗粒的数量上。结果靶向病毒基因组5'UTR和VP2的siRNAs具有明显的病毒抑制效应。结论此研究证实RNAi方法具有特异性抑制病毒复制的潜能和可行性。 李国栋 杨倬 张景海关键词:RNA干扰 肠道病毒71型 逆转录病毒载体介导的RNA干扰稳定抑制肌肉生长抑制素GDF-8的表达 被引量:5 2008年 为将肌肉生长抑制素的干扰序列表达盒hU6-siGDF-8有效导入肌成纤维细胞C2C12中,以pAV-hU6+27载体为基础构建逆转录病毒载体pXSN-hU6-siGDF-8,并使之与pVSV-G质粒共转染GP-293细胞,用包装出的病毒粒子感染宿主细胞C2C12,G418筛选稳定整合逆转录病毒的抗性细胞库。2周后,Western Blotting和Real-Time PCR分析结果显示,细胞内源性的GDF-8基因的表达得到了有效的抑制;MTT法和细胞流式仪分析表明,G418抗性细胞得到了更有效的增殖,并且G_0/G_1期细胞数量减少了13.7%,S期细胞数量增加了14.9%。因此,逆转录病毒载体的RNA干扰系统可以稳定抑制GDF-8基因表达,它将成为治疗肌肉萎缩疾病的一个强有力的工具。 刘超武 杨倬 赵斌 刘长梅关键词:逆转录病毒 SHRNA pH值对FOXO1、GDF-8基因反义RNA寡核苷酸吸收的影响 2009年 研究不同pH值下,口服靶向FOXO1与GDF-8基因反义RNA寡核苷酸药物对药效的影响。化学合成靶向FOXO1与GDF-8基因的有效反义RNA寡核苷酸片段,调节药物PH值,通过灌胃方式给药,给药20 d后处死小鼠,进行体重,腿部肌肉增长情况分析。提取腿部肌肉组织总RNA,用real time PCR检测FOXO1与GDF-8基因的表达。结果表明,服用RNA oligos的试验组小鼠腿部肌肉重量均比对照组肌肉重量增长快。其中pH为7.0的RNA oligos的效果比pH为5.0的效果好,pH9.0的RNAoligos的作用效果最弱。与小鼠体重变化结果一致,real time PCR检测实验组FOXO1与GDF-8基因转录水平较对照组均有明显下降,其中服用pH为7.0的RNA oligos的下降最多。因此,口服靶向FOXO1与GDF-8基因的反义RNA寡核苷酸药物的最适pH值应为中性偏酸。 丛浩龙 刘建玲 杨倬 孙仑泉 刘长梅关键词:肌肉萎缩 RNA干扰 PH值 FOXO1 小环载体介导的siRNA稳定抑制乙肝病毒的复制和表达 被引量:3 2012年 【目的】尝试构建表达小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)的小环载体,并初步鉴定其对乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)复制及其基因表达的抑制作用。【方法】设计并合成靶向HBV S区的siRNA,将其克隆到小环载体pMC.BESPX-MCS2上,测序正确后将重组体pMC-H1-siHBS-U6转化入感受态E.coliZYCY10P3S2T,然后在培养基中加入L-阿拉伯糖,诱导其降解细菌骨架,获取只含有目的基因表达盒的小环RNA干扰载体pmc-H1-siHBS-U6。将小环RNA干扰载体与HBV真核表达质粒pHBV1.3共转染Huh-7细胞,分别在转染后1-7天,ELISA法检测Huh-7细胞上清中的HBsAg、HBeAg,并且通过Real-time RT-PCR法分析干扰RNA对HBV DNA及mRNA的抑制效果。【结果】成功构建了靶向HBV S基因的siRNA小环表达载体pmc-H1-siHBS-U6。该载体能显著抑制Huh-7细胞HBsAg和HBeAg分泌,并且其抑制效果能够维持2-3周时间。Real-time PCR证实HBV的DNA与mRNA水平分别降低了71%和80%,而对照siRNA及空载体则无此作用。【结论】成功构建了靶向HBV的小环RNA干扰载体,并且其能稳定、高效、特异地抑制HBV基因的表达与复制,该研究不仅对探索HBV的基因治疗提供了重要线索,而且为RNA干扰的应用提供了新的运载体系。 刘晓曼 杨倬 冯涛关键词:VIRUS HUH-7细胞 小RNA对肌肉生长相关基因GDF-8和Foxo-1的调控及其在肌肉病治疗中的研究 很多疾病会导致肌肉萎缩病症的出现,包括肌营养不良、脊髓受损、神经退行性疾病、恶病质、衰老、卧床、艾滋病和糖尿病等。这种疾病发生的诱因很多,存在多种基因的异常表达。最近一系列参与调节肌肉发育的转录和生长因子的发现增进了作者... 杨倬关键词:肌肉生长抑制素 逆转录病毒 东亚钳蝎镇痛肽Ⅳ的分离纯化、基因克隆及表达 蝎毒是一种名贵中药,具有重要临床价值,其作用主要有以下几个方面:抗肿瘤、镇痛、抗惊厥、抗癫痫、降血压及抗血栓形成等作用。本论文主要关注蝎毒的镇痛活性。研究证明蝎毒对躯体痛和内脏痛均有较强的抑制作用,相比较传统的用于临床的... 杨倬关键词:蝎毒 分离纯化 克隆 文献传递 EV71感染抗病毒药物及疫苗研究进展 被引量:9 2012年 手足口病在世界多个地区,尤其是亚洲爆发并流行,且其感染率和死亡率逐年增高,危害十分严重。肠道病毒71(Enterovirus 71,EV71)是手足口病(Hand,foot,andmouth disease,HFMD)的主要病原体,以感染婴幼儿为主,其感染常伴随神经系统并发症,严重可导致儿童死亡。近年来,分子生物学和抗病毒研究方面取得的进展为EV71感染的预防及治疗提供了新的途径。本文对EV71病毒学特点及抗EV71药物的筛选、疫苗开发、RNA干扰等进行了综述,以期为相关研究提供参考。 张迎秋 杨怀义 杨倬 时迎娣 赵春晖关键词:肠道病毒71型 抗病毒药物 疫苗 RNA干扰