杨立新
- 作品数：6 被引量：67H指数：5
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 小鼠单个植入前胚胎cDNA文库的构建及应用被引量：2
- 2003年
- 哺乳动物合子基因组激活和植入前胚胎阶段特异性表达基因的研究一直是发育生物学研究的重点。发现和克隆植入前胚胎阶段特异性表达的基因需要有效的方法 ,阶段特异性cDNA文库的构建和筛选是一种较好的方法。用小鼠单个成熟卵细胞、受精卵、2 细胞、4 细胞和 8 细胞胚胎分别构建了cDNA文库。滴度分别为 :6 2× 1 0 5、8 3× 1 0 5、1 0 4× 1 0 6、1 5 1× 1 0 6和 1 62×1 0 6。随机挑选了 2 9个克隆并进行了序列分析 ,结果表明 ,和已知表达序列标签 (ESTs)同源的序列为 65 5 2 % ( 1 9 2 9) ,未知序列为 1 3 79% ( 4 2 9) ,并发现了 2个重复序列。用特异性引物 ,分别对小鼠持家基因 ( β actin)和发育特异基因 (OCT 4)进行PCR扩增 ,结果表明 ,所建立的cDNA文库可以反映小鼠胚胎在不同发育阶段整个基因群体的转录活性 。
- 杨立新郁卫东李文雍张冲刘桂生陈清轩
- 关键词：小鼠植入前胚胎CDNA文库
- Nodal信号的研究进展被引量：6
- 2003年
- 早期胚胎发育过程中 ,组织者能够诱导胚胎组织形成完整的体轴。研究表明细胞之间的信息交流是脊椎动物胚胎诱导作用的基础。Nodal作为早期胚胎诱导信号的关键成分 ,参与了中胚层和内胚层的形成、前 -后体轴的位置确定和左 -右体轴特化等一系列关键事件 ,表明Nodal信号在脊椎动物早期发育过程中具有重要作用。
- 杨立新郁卫东刘桂生陈清轩
- 关键词：信号转导胚胎发生
- 兔单个植入前克隆胚胎cDNA文库的构建被引量：10
- 2004年
- 人与小鼠和牛在正常胚胎植入前发育过程中基因活化的研究已经取得了长足的进展 ,但是还没有对同期克隆胚胎相关研究的报道 .利用单个家兔植入前移核重构胚胎成功地构建了MⅡ卵母细胞及发育至 4 、8 细胞期的胚胎和囊胚的特异性cDNA文库 .并用 β肌动蛋白和LAPTM4α证实这类文库是可靠的 .以 8 细胞期移核重构胚cDNA文库为例 ,随机挑取克隆进行测序分析 :其中 2 3的基因EST片段可以在GenBank或EST库中找到同源序列 ,约 1 3的EST片段属于未知的新片段 ,表明这是一类重要的新兴基因资源库 (期特异性EST库 ) .这种利用单胚胎构建cDNA文库的方法 ,解决了胚胎研究材料受限的问题 ,在时间上更加精确 ,更符合胚胎发育的规律 ,也能够更加准确地反映出一些克隆胚胎的异常表型 ,是研究早期胚胎发育基因表达以及克隆胚胎再程序化基因表达的一种有效手段 .
- 郁卫东杨立新李文雍刘桂生陈清轩
- 关键词：克隆胚胎CDNA文库
- 中药滋补肝肾方对鼠B16黑素瘤细胞酪氨酸酶mRNA表达的调节被引量：27
- 2003年
- 目的 探讨中药滋补肝肾方治疗白癜风的分子学作用机制。方法 采用定量逆转录 聚合酶链式反应(RT PCR)方法 ,观察中药滋补肝肾方对鼠B16黑素瘤细胞株酪氨酸酶mRNA表达的影响。结果 中药滋补肝肾方能使黑素瘤细胞酪氨酸酶mRNA表达水平增加。结论 中药滋补肝肾方能上调黑素细胞酪氨酸酶mRNA表达水平 ,这是其治疗白癜风的药理作用机制之一。
- 王辉王莒生王萍陶毅蔡念宁郁卫东杨立新郭念筠陈清轩
- 关键词：中医药疗法滋补肝肾方酪氨酸酶MRNA表达白癜风
- 单个植入前胚胎mRNA差异显示方法的建立被引量：24
- 2003年
- 在已有的研究基础上 ,优化和建立了单个植入前胚胎的mRNA差异显示 (singlepreimplantationembryodifferentialdisplaypolymerasechainraction ,SPEDDRT PCR) .以小鼠单个成熟的卵母细胞和单个的 2细胞期胚胎作为起始材料 ,比较二者之间基因的表达差异 .选择在卵母细胞中不表达而在 2细胞期表达的差异片段 .进行GenBank检索和表达序列标签 (EST)库电子克隆 .与多胚研究方法一样 ,由线粒体编码的和 2细胞特异表达的NADH脱氢酶亚单位 2和ATPase 6证实了SPEDDRT PCR方法是可行而且可靠的 ,是一种需要材料极少。
- 郁卫东杨立新李文雍刘桂生陈清轩
- 关键词：植入前胚胎MRNA早期胚胎发育
- 小鼠2-细胞胚胎ATP合成酶6基因特异表达分析及鉴定被引量：6
- 2003年
- 合子基因组活化是小鼠胚胎早期发育由细胞质调控向核调控转变的关键 .小鼠合子基因组活化发生在 2 细胞胚胎阶段 ,通过对 2 细胞胚胎阶段特异性表达基因的分析 ,可以从分子水平上揭示早期小鼠胚胎的发育机理 .用DD RTPCR技术 ,从单个小鼠 2 细胞胚胎与成熟卵母细胞 (MII细胞 )中分离了 2个差异片段 ,片段 2同小鼠睾丸中表达的一个未知片段具有高度同源性 .经过cDNA文库构建、筛选 ,分离到其全长cDNA .序列分析结果表明 ,该基因为小鼠ATP合成酶亚单位 6基因 .ATP合成酶亚单位 6基因由线粒体DNA编码 ,与细胞内ATP的合成相关 .小鼠 2 细胞胚胎特异表达的ATP合成酶亚单位
- 杨立新郁卫东陈清轩
- 关键词：小鼠胚胎发育早期发育特异表达
