柴玉荣
- 作品数：59 被引量：200H指数：8
- 供职机构：郑州大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学天文地球文化科学更多>>
- 人β-神经生长因子前体基因重组真核表达载体的构建被引量：2
- 2005年
- 目的构建人β-神经生长因子(β-NGF)前体基因重组真核表达载体,为其在真核细胞中表达并获得具有神经生长因子活性的蛋白及临床应用打下基础。方法利用基因重组技术,将质粒PUC18-β-NGF进行酶切获得β-NGF基因片段,将其插入真核表达载体pcDNA3.0;用PCR技术以及酶切和测序对插入片段进行分析和进一步鉴定。结果人β-神经生长因子前体基因成功的插入真核表达载体pcDNA3.0。结论人β-神经生长因子前体基因重组真核表达载体pcDNA3.0-β-NGF构建成功,为进一步开展NGF基因治疗神经系统疾病奠定了基础。
- 范波胜朱涵闻公灵章茜王天云柴玉荣赵青赞
- 关键词：酶切
- 姜黄素对D-半乳糖致小鼠胸腺退化的作用
- 与衰老相关的胸腺衰退会导致许多相关疾病的流行,如癌症、自身免疫性疾病等。D-半乳糖(D-galactose,D-gal)可以引起类似于加速衰老的损伤,被用来建立急性衰老动物模型。姜黄素具有多种药理作用,包括抗炎、抗凋亡和...
- 杨书平李杰瀚刘国红孙芸柴玉荣
- 姜黄素与p65siRNA促进食管鳞癌细胞凋亡的比较研究被引量：2
- 2011年
- 背景与目的:活化的核转录因子-kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路在多种肿瘤的发生、发展中起着重要的作用,参与调控多种与炎症、抗凋亡、肿瘤形成和转化有关基因的表达。目前其在食管鳞癌中的作用尚不清楚。本研究旨在探讨p65siRNA和姜黄素能否通过阻断NF-κB信号通路,促进食管鳞癌细胞的凋亡及增强对化疗药的敏感性,并将两种方法加以比较。方法:Western blot检测p65siRNA转染到食管鳞癌细胞EC9706和Eca109中p65蛋白的表达;EC9706和Eca109细胞中加入姜黄素(50μmol/L)后检测pIκBα蛋白的表达。转染p65siRNA的食管鳞癌细胞,单独或联合使用氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)治疗72 h;EC9706和Eca109细胞中加入姜黄素培养72 h,或联合使用姜黄素和5-FU培养72 h,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。显微镜下观察各组食管鳞癌细胞形态学特性的改变。结果:Western blot结果显示,转染p65siRNA的EC9706和Eca109细胞中,p65蛋白的表达水平下调,而非靶向蛋白MAPK的表达无影响;姜黄素组中,EC9706和Eca109细胞中pIκBα蛋白的表达水平随着姜黄素作用时间的延长逐渐下降。将siRNA转染组与姜黄素组所引起的食管鳞癌细胞的凋亡及联合应用化疗药所引起的细胞凋亡加以比较,结果发现,与siRNA转染组相比,单独使用姜黄素可引起细胞凋亡数增加(P<0.05);但姜黄素与5-FU联合应用时,可明显提高肿瘤细胞对化疗药的敏感性,凋亡和坏死的细胞均显著增加(P<0.05)。结论:p65siRNA和姜黄素都可以通过阻断NF-κB信号通路,促进食管鳞癌细胞的凋亡及增强对5-FU的敏感性;RNA干扰虽特异,但用于临床还需要一段时间。姜黄素不良反应小,有望成为治疗食管癌的辅助用药。
- 田芳柴玉荣江亚南张晓艳
- 关键词：食管鳞癌姜黄素核转录因子-ΚBIΚBΑSIRNA
- Sox2和Nanog在小鼠胸腺退化中的作用
- 2021年
- 成年小鼠胸腺中存在上皮祖细胞。Nanog(Homeobox transcription factor)和sex determining region Y-box2(Sox2)作为干细胞转录因子,在维持祖细胞的多能性中至关重要。本实验探究Sox2和Nanog在D-半乳糖急性致衰和自然衰老昆明小鼠胸腺中的表达以及五倍子酸干预对其的影响。免疫组织化学和qRT-PCR分析表明,Sox2和Nanog的表达在自然衰老和急性致衰小鼠胸腺中逐渐下降。
- 郭利邢文英王丽萍丁一柴玉荣
- 关键词：小鼠胸腺NANOGSOX2五倍子酸自然衰老多能性
- 盐藻的一种盐诱导碳酸酐酶基因转录起始点的确定及表达载体的构建
- 2005年
- 采用5′RACE和巢式PCR的方法确定盐藻(Dunaliella salina)一种盐诱导碳酸酐酶基因的转录起始位点,通过序列分析得出转录起始位点为A,从而确定核心启动子及上游调控区的位置。应用巢式PCR技术分别扩增盐藻这种碳酸酐酶基因上游调控区的2个片段,长度大约分别为0.8和1.2kb,序列经测定无误后分别与带β-葡糖苷酸酶(GUS)报告基因的载体相连接,经酶切鉴定这两种表达载体构建正确。用基因枪法将这两个载体导入盐藻细胞中,经染色检测,GUS基因在转化藻株中得到瞬时表达。
- 柴玉荣侯卫红王天云王宁袁保梅王建民薛乐勋
- 关键词：碳酸酐酶转录起始位点GUS报告基因
- 大鼠前脑啡肽原基因逆转录病毒表达载体及产毒细胞系的建立被引量：9
- 2006年
- 目的:构建大鼠前脑啡肽原基因(pENK)逆转录病毒载体,获得携带该基因的高滴度产毒细胞系。方法:应用RT-PCR方法获得大鼠pENK基因,HindⅢ、ClaⅠ双酶切后,同相应双酶切的pLNCX2载体大片段连接,构建成pENK基因逆转录病毒载体pLNCX2-pENK。然后用脂质体法将该载体转染PT67细胞,G418筛选,并进行滴度测定。结果与结论:成功地构建了pLNCX2-pENK载体,获得8×108CFU/L的产毒细胞系。成功建立了携带pENK的高滴度逆转录病毒产毒细胞系。
- 臧卫东赵青赞王天云柴玉荣薛乐勋
- 关键词：镇痛脑啡肽逆转录病毒载体
- TaqMan探针分析p62/IGF2BP2基因多态性
- 2012年
- 目的在临床实践中建立一种有效的检测p62/IGF2BP2基因多态性的方法。方法盐析法提取40例肝癌患者的外周血基因组DNA。采用实时荧光PCR TaqMan探针方法对p62/IGF2BP2的一个单核苷酸多态性位点:rs11705701进行基因分型分析,并进行基因序列测序验证。结果通过对肝癌DNA进行测试分析,表明该位点在肝癌样品中存在多态性。结论目前的数据初步表明TaqMan探针方法能够用于IGF2BP2基因多态性分型分析。
- 韩凯昊鲁照明柴玉荣李丹陈俊林
- 关键词：单核苷酸多态性TAQMAN探针
- 杜氏盐藻基因组文库的构建被引量：11
- 2005年
- 目的 构建杜氏盐藻基因组文库,旨在进一步分离和研究杜氏盐藻基因的结构和功能。方法 采用改进的SDS裂解法提取杜氏盐藻基因组DNA ,通过限制性内切酶Sau3AI进行部分酶切,用T4DNA连接酶将目的片段与噬菌体EMBL3载体臂进行连接后转染大肠杆菌LE3 92。结果 体外包装构建了杜氏盐藻基因组文库,得到重组子数为2 .2×10 4,经测定文库滴度为2 .2×10 5pfu/mL。结论 构建了杜氏盐藻基因组文库,为进一步筛选盐藻重要基因及其序列分析奠定基础。
- 王宁刘红涛侯桂琴王天云柴玉荣薛乐勋
- 关键词：杜氏盐藻基因组文库
- 杜氏盐藻的RbcS基因及其调控区的克隆和功能鉴定
- 杜氏盐藻/(Dunaliella salina, D. salina/)属于绿藻门绿藻纲团藻目,是一种生长在海水或盐湖的嗜盐性浮游单细胞真核绿藻。细胞形态呈梨形或椭圆形,无细胞壁,胞内有一个大的杯状叶绿体,具有双鞭毛,可...
- 柴玉荣
- 关键词：杜氏盐藻启动子
- 文献传递
- 重组小鼠canstatin N端片段对鸡胚新生血管生成的抑制作用(英文)被引量：2
- 2004年
- 为了研究重组小鼠canstatinN端片段的体内抗血管生成活性 ,通过PCR扩增小鼠canstatinN端片段cDNA ,定向克隆于原核表达载体 pET30a (+)中 ,构建小鼠canstatinN端片段重组表达载体 pET mCanN ,转化E .coliBL2 1(DE3) ,IPTG诱导表达 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和蛋白质印迹检测小鼠canstatinN端片段的表达 .结果表明 ,IPTG诱导原核表达载体 pET mCanN在大肠杆菌E .coliBL2 1(DE3)中高效表达 ,小鼠canstatinN端片段表达量约占菌体总蛋白量的 18% ,小鼠canstatinN端片段主要以包涵体形式存在 ,包涵体经过洗涤、裂解、Ni spincolumn亲合柱层析以及蛋白质复性等步骤纯化后 ,获得了纯度约为 92 %的重组小鼠canstatinN端片段 .鸡胚绒毛尿囊膜 (chickenembryochoriollantoicmembrane ,CAM)实验表明 ,原核表达的小鼠canstatinN端片段能有效地按剂量依赖的方式抑制鸡胚新生血管的形成 .
- 侯卫红贾岩龙王天云柴玉荣袁保梅田芳王建民薛乐勋
- 关键词：CANSTATIN肿瘤血管生成抑制剂原核表达
