殷春一
- 作品数:8 被引量:22H指数:3
- 供职机构:四川大学华西口腔医院更多>>
- 发文基金:科技部科技攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 组织工程被引量:7
- 2002年
- 殷春一
- 关键词:种子细胞细胞外基质组织缺损
- 人釉原蛋白基因的扩增及其真核表达克隆的构建被引量:6
- 2004年
- 目的 构建人釉原蛋白基因真核表达克隆。方法 从胚龄 2 0周的引产胎儿牙胚中提取总 RNA,RT- PCR法扩增人釉原蛋白编码区基因 ,重组到真核表达载体 Pc DNA3.1中 ,经酶切和 DNA序列分析验证。结果经 RT- PCR扩增后 ,得到大小约 5 70 bp的特异性产物 ,与预期的人釉原蛋白 m RNA编码区碱基长度一致 ,重组克隆 Pc DNA3.1- AMG的测序结果显示 ,与 Gen Bank中的人釉原蛋白基因 (AMEL X)序列仅在第 4 85位碱基发生错配 (G→ C) ,但不影响氨基酸组成。结论 本研究成功的构建了人釉原蛋白基因真核表达克隆 ,为进一步研究牙周组织再生的基因治疗奠定了基础。
- 章锦才殷春一张蕴惠赵川江
- 关键词:釉原蛋白真核表达载体
- 人釉原蛋白重组质粒Psec Taq2A-AMG在人牙龈成纤维细胞表达的研究被引量:3
- 2003年
- 目的 研究釉原蛋白重组质粒PsecTaq2A -AMG在人牙龈成纤维细胞 (GFB)中的表达 ,为牙周再生的基因治疗奠定基础。方法 采用酶解 -组织块法体外培养得到人牙龈成纤维细胞 ,用釉原蛋白重组质粒PsecTaq2A-AMG瞬时转染牙龈成纤维细胞 ,分别在第 4 8小时、第 5天、第 7天、第 14天收集细胞及细胞液 ,经ELISA连续测定釉原蛋白的表达。结果 转染后 4 8小时即检测到表达产物 ,表达量在第 5天和第 7天达到高峰 ,持续到第 14天仍可检测到釉原蛋白的表达。结论 实验结果为利用牙龈成纤维细胞为靶细胞 。
- 杨爱玲章锦才殷春一张蕴惠赵川江
- 关键词:人牙龈成纤维细胞成纤维细胞
- 0.5[﹪]聚维酮-碘龈下冲洗对龈下微生物的作用
- 殷春一
- 0.5%PVP-I龈下冲洗对龈下微生物的作用被引量:1
- 2000年
- 目的 观察0.5 % 聚维酮碘(PVP-I)龈下冲洗后龈下微生物组成的变化,并与0.5% 洗必太进行对比研究。方法 选取临床诊断为中、重度牙周炎的患者11 例,共计45 颗患牙,牙周袋深≥4m m 。将含有患牙的不同象限随机分组,分别采用:(1)0.5 % PVP-I;(2)0.5% 洗必太(CH) ;(3)0.9 % 生理盐水5ml 进行一次性龈下冲洗。冲洗前及冲冼后24 小时分别采集龈下菌斑行刚果红染色涂片,高倍视野下(×100) 观察龈下微生物组成的变化。结果 0 .5% PVP-I龈下冲洗24 小时后龈下菌细胞密度降低,球菌比率升高,杆菌比率降低( P< 0.01),螺旋体比率未见明显改变,与CH 组间比较无统计学上差异。效果均明显优于生理盐水组。结论 0.5% PVP-I龈下冲洗短期即可减少龈下微生物的量,并使微生物组成发生有益的转化,与0.5 % 洗必太可达到相同的效果。
- 殷春一杨美薷
- 关键词:聚维酮碘微生物牙周病
- 人釉原蛋白真核表达载体PcDNA3-AMG,PsecTaq2A-AMG的构建及其在哺乳动物细胞系的表达研究
- 基因治疗系现代医学治疗中一个崭新的领域,在牙周病的治疗及诱导牙周组织再生方面,有望提供新的治疗模式.釉原蛋白(AMG)在发育期釉基质中比例高达90﹪以上,作为一种具有诱导包括牙周膜,牙槽骨及牙骨质在内的牙周组织再生能力的...
- 殷春一
- 关键词:人釉原蛋白真核表达基因治疗基因导入牙周再生
- 文献传递
- 人釉原蛋白编码区基因真核表达载体PsecTaq2A-AMG的构建被引量:2
- 2003年
- 目的 构建人釉原蛋白 (AMG)编码区基因真核表达载体PsecTaq2A_AMG。方法 采用PCR技术体外扩增AMG完整分泌肽编码区。将扩增产物与PsecTaq2A分别用BamHI和XholI行双酶切 ,将获取的AMG目的基因片段连接到双酶切后的PsecTaq2A ,构建重组质粒PsecTaq2A_AMG ,并对重组质粒进行鉴定。结果 ①PCR扩增产物经 1 5 %琼脂糖凝胶电泳 ,可见大小约 5 19bp的特异性条带 ,与预期结果一致。②重组克隆PsecTaq2A_AMG酶谱分析与预期结果一致 ,序列测定结果与GenBank中的人釉原蛋白序列完全一致。结论 用此方法可成功构建AMG编码区基因真核表达载体PsecTaq2A_AMG。
- 杨爱玲徐琛蓉章锦才钟良军殷春一赵川江
- 关键词:人釉原蛋白重组质粒基因治疗
- 猪发育期牙胚釉原蛋白的分离纯化及其多克隆抗体的制备被引量:5
- 2003年
- 目的 制备猪釉质蛋白多克隆抗体 ,为釉原蛋白的检测提供条件。方法 选择 1月龄乳猪 ,分离埋于上下颌骨内的牙胚 ,刮取牙胚表面干酪样尚未完全矿化的釉质基质 ,通过盐酸胍抽提及SephadexG_2 0 0柱层析分离纯化猪发育期牙胚釉原蛋白 ,联合免疫家兔 ,抗血清经DE_5 2纤维素纯化 ,并经ELISA测定抗体效价。结果 SDS_PAGE电泳结果发现采用SephadexG_2 0 0葡聚糖凝胶过滤能达到较为理想的釉原蛋白分离纯化效果 ,用所提纯的猪釉原蛋白免疫家兔 ,成功地制得兔抗猪釉原蛋白抗血清 ,抗血清稀释达 1∶32 0 0 0时 ,采用ELISA法仍有明显的抗原抗体反应。结论 本实验成功制备得到抗釉原蛋白多克隆抗体 ,为釉原蛋白的检测提供了条件。
- 徐琛蓉杨爱玲章锦才广东省口腔医院口腔内科殷春一张蕴惠张静仪
- 关键词:发育期纯化多克隆抗体