涂长春
- 作品数:308 被引量:1,184H指数:17
- 供职机构:吉林农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学建筑科学更多>>
- 猪瘟基因疫苗免疫小鼠外周血细胞免疫动态变化研究被引量:3
- 2000年
- 应用FACS、MTT法对猪瘟基因疫苗pcDST、pcDSW免疫鼠外围血中CD+4 和CD+8淋巴细胞数、淋巴细胞的转化功能等动态变化进行了观察。结果 :pcDST、pcDSW猪瘟基因疫苗免疫小鼠后 ,小鼠的外周血淋巴细胞对LPS有强烈的反应性 ,CD+4 细胞数量增加 ,外周血淋巴细胞CD8+ 细胞数量在一段时间内增加 ,。CD+4 和CD+8细胞数量在免疫后 32天达到高峰后开始下降。表明pcDST、pcDSW质粒免疫小鼠后诱发免疫反应。
- 陈创夫余兴龙乔军李作生涂长春殷震
- 关键词:猪瘟外周血细胞基因疫苗免疫
- 原核表达的猪瘟病毒E2蛋白抗原多肽的复性和纯化被引量:21
- 2003年
- 对原核中以包涵体形式高效表达的猪瘟病毒 (CSFV) E2蛋白抗原表位区段 (m E2 )进行了变性、复性与纯化研究。包涵体经超声破菌分离 ,然后进行变性溶解和复性 ,复性产物经硫酸铵沉淀浓缩后 ,利用免疫亲和层析进行纯化。纯化产物的 SDS- PAGE分析结果表明 ,其纯度达 97%。酶联免疫试验测定的结果显示 ,与复性前变性蛋白相比 ,纯化蛋白与 CSFV特异的单抗和多克隆阳性血清的反应活性提高了 2~ 16倍。
- 刘伯华余兴龙张茂林肖昌徐兴然吴健敏李作生涂长春
- 关键词:原核表达猪瘟病毒包涵体复性纯化
- 我国猪瘟的流行现状、原因与防制对策
- 猪瘟(CSF)是我国四大畜禽疫病之一,至今已流行70多年。我国于1954年成功研制了猪瘟兔化弱毒疫苗(Hog Cholera Lapinised Virus,HCLV),随即在全国范围内推广应用,并于1956年提出了消灭...
- 涂长春万遂如
- 文献传递
- 猪瘟病毒E2蛋白重组T4噬菌体的构建及免疫学特性被引量:6
- 2004年
- 利用重组 PCR技术将猪瘟病毒 (CSFV) E2基因与 T4噬菌体 SOC基因 C端融合 ,构建了大小为 12 33bp的SOC/ E2融合基因 ,将其插入携带 T4溶菌酶基因 (e)和 denv基因的 T4重组载体 (p RH) ,构建了重组载体 p RSE2 ,通过重组载体与缺失突变型 T4噬菌体基因发生同源重组 ,将 SOC/ E2融合基因整合入 T4噬菌体的基因组中。经EL ISA、Western blot等免疫学检测证实 ,T4噬菌体表达的 E2融合蛋白具有 CSFV免疫学活性 ,动物试验证实 T4 .SOC.
- 吴健敏任兆钧余兴龙张念祖涂长春
- 关键词:猪瘟病毒T4噬菌体免疫学特性
- 应用化学合成siRNA抑制猪瘟病毒增殖的研究
- 本研究针对猪瘟病毒三个基因,设计6个RNA干扰靶点,2个针对Npro基因、1个针对NS2基因和3个针对NS3基因。首先由公司合成以上干扰靶点的siRNA分子,将化学合成的siRNA分子转染PK-15细胞单层6h,转染完成...
- 李江南郭换成涂长春
- 关键词:猪瘟病毒RNAI
- 文献传递
- 猪瘟病毒E2蛋白4重复抗原表位的构建及抗原活性研究被引量:2
- 2003年
- 利用PCR方法获得 4次重复的猪瘟病毒E2蛋白中和性抗原表位基因 ,将其克隆到 pGEM 5ZF(+)载体 ,测序正确后亚克隆到pGEX 3X载体构建得到重组质粒pGEX 3X 4P。重组质粒在大肠杆菌中诱导表达了含 4重复抗原表位的融合蛋白。该蛋白经纯化后 ,利用间接ELISA检测其与血清的反应性 ,结果表明 ,纯化的融合蛋白与兔抗CSFVE2血清有很强的反应性 ,与兔抗BVDVE2血清不反应 。
- 张青婵刘思国徐兴然余兴龙涂长春
- 关键词:猪瘟病毒CSFV基因克隆技术疾病防治
- 云南蚊虫中阿卡斑病毒的分离和鉴定被引量:17
- 2015年
- 为掌握云南省德宏州芒市和瑞丽市蚊媒病毒分布状况,2010年8月用诱蚊灯采集蚊虫17种2 149只,用金黄地鼠肾细胞(Baby hamster kidney cell,BHK-21)培养法分离病毒,阳性分离物用阿卡斑病毒(Akabane virus,AKV)S和M片段特异性引物的RT-PCR法鉴定。从采集蚊虫中分离到能引起BHK-21细胞病变和致乳小白鼠发病死亡的2株病毒,其中DHL10M110株分离自瑞丽市迷糊按蚊(Anopheles vagas),DHL10M117株分离自芒市三带喙库蚊(Culex tritaeniorhynchus)。RT-PCR扩增获得S片段的702bp序列和M片段的456bp序列,系统进化树分析表明DHL10M110和DHL10M117株与肯尼亚和澳大利亚AKV分离株进化关系较远;与日本、韩国和中国台湾的AKV分离株亲缘关系较近,但云南株形成一个独立的小分支。2株新分离病毒的S片段与中国台湾CY-77株的核苷酸(96.6%和96.7%)和氨基酸(99.6%和100%)同源性最高;M片段与日本Iriki株的核苷酸同源性最高(93.2%和93.6%),与中国台湾CY-77株氨基酸同源性最高(99.6%和100%);与肯尼亚MP496株核苷酸(69.7%和70.0%)和氨基酸(91.0%)同源性最低。本研究证实云南省德宏州存在AKV的流行,与亚洲流行株具有较近的亲缘关系。三带喙库蚊和迷糊按蚊可传播该病毒。
- 冯云何彪付士红杨卫红章域震涂长春梁国栋张海林
- 关键词:蚊虫系统进化树同源性分析
- 中国不同来源狂犬病病毒野毒株G基因主要功能区的序列分析被引量:15
- 1998年
- 对我国不同来源的狂犬病病毒野毒株8202、BRV、MRV的G基因405~1146位核苷酸序列,进行了逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增、克隆和序列测定,并应用计算机对这3个毒株的测定序列和已发表的中国人源毒株(CGX89)的相应序列进行了分析比较。结果表明,这4个中国不同来源狂犬病病毒的G基因同源性较低,8202与BRV的核苷酸同源性只有79.5%,与MRV的氨基酸同源性亦只有82.2%;同一地区自不同动物分离的MRV株与BRV株其亲缘关系较远。4个野毒株的糖基化位点和主要的诱导中和抗体产生的抗原决定簇内某些氨基酸亦不同,从而证明我国存在亲缘关系较远的狂犬病野毒株。
- 钱爱东侯世宽何昭阳何昭阳李红卫殷震
- 关键词:狂犬病病毒糖蛋白基因RT-PCR克隆测序
- 猪瘟基因疫苗免疫对人工感染猪瘟病毒猪的保护及免疫病理学研究
- 本研究应用免疫组化法、PCR法对猪瘟基因疫苗pcDST免疫后人工感染猪瘟病毒猪的保护及免疫病理学进行了观察.结果:pcDSW免疫猪后可诱导产生CSFV特异性的抗体反应,抵抗1:100血毒的攻击,保护率100%.免疫器官无...
- 陈创夫余兴龙涂长春高峰李作生刘宝岩
- 关键词:基因疫苗免疫病理学猪瘟病毒
- 文献传递
- 野生动物与人兽共患传染病
- 过去几十年来人类社会与经济的快速发展促进了全球一体化进程,同时,加大了对自然资源的过度开发,造成了自然生态环境失衡。这一过程加快了自然疫源性病原向人类的传播速度,世界上人传染病来自野生动物的比例由过去的68[%]上升到现...
- 涂长春
- 关键词:野生动物人兽共患传染病禽流感防控技术