王佃鹏
- 作品数：33 被引量：68H指数：5
- 供职机构：深圳国际旅行卫生保健中心更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目深圳出入境检验检疫局科研项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 一种检测结核杆菌的试剂盒及其专用探针与引物
- 本发明公开了一种检测结核杆菌的试剂盒及其专用探针与引物，本发明所提供的专用探针的碱基序列如SEQ IN NO：3所示，所述专用引物由正向引物和反向引物组成，所述正向引物的碱基序列如SEQ IN NO：1所示，所述反向引物...
- 朱玉兰吴兵王佃鹏高朝贤黄宗炎刘胜牙叶健忠
- 文献传递
- 登革病毒Taqman双重荧光PCR分型研究被引量：3
- 2011年
- 目的建立鉴定登革病毒型别的双重实时Taqman PCR反应体系,以准确快速鉴定登革病毒型别。方法根据GenBank上已发表的登革病毒四个型别的全基因序列,进行对比分析,分别设计登革病毒的四个型别引物和探针,登革I、III型探针用FAM-TAMARA标记,登革II、IV型探针用JOE-TAMARA标记。经过条件优化后,建立检测登革病毒I/II型和III/IV型的两套双重实时荧光RT-PCR方法,扩增四型登革病毒RNA、登革病毒阴性样本和登革病毒RNA稀释样本,检测方法的特异性、重复性和检测限性。结果通过设计筛选序列和优化反应条件,建立登革病毒I、II型和登革病毒III、IV型的双重荧光PCR反应体系,通过试验证明,所建立的方法具有良好的特异性、重复性和检测限性,能准确快速地对登革病毒进行分型。结论建立了一种快速双重荧光PCR方法能同时对登革病毒进行分型和鉴定。
- 董瑞玲甄胜西孙杰李微王佃鹏徐媛朱玉兰
- 关键词：登革病毒基因分型TAQMAN探针
- 结核分枝杆菌荧光定量PCR检测方法的建立与应用被引量：14
- 2008年
- 目的建立结核分枝杆菌的荧光定量PCR检测方法,探讨荧光PCR检测痰标本中结核分枝杆菌的应用价值。方法根据结核分枝杆菌基因保守序列设计引物和探针,并构建标准品。对102例培养涂阳的结核痰液标本和45例非结核感染者的痰标本,应用荧光定量PCR法、痰涂片抗酸染色法检测结核分枝杆菌。结果荧光定量PCR、抗酸染色法检测结核分枝杆菌的特异性分别为100%、30%。结论荧光定量PCR是一种快速、敏感性高、特异性强的结核分枝杆菌辅助诊断方法,具有重要的应用价值。
- 朱玉兰王佃鹏高朝贤黄宗炎刘胜牙
- 关键词：结核分枝杆菌抗酸染色荧光定量PCR
- 用于检测结核分枝杆菌mRNA的引物和探针及其应用
- 本发明公开了一种用于检测结核分枝杆菌的引物和探针及其应用。本发明提供了用于检测结核分枝杆菌的组合物，所述组合物由一个引物对和一个探针组成；所述引物对由序列表中序列1和序列2所示的两条单链DNA分子组成；所述探针的序列为序...
- 董瑞玲朱玉兰王佃鹏刘胜牙李微叶健忠张树平
- 文献传递
- 2008年深圳口岸外籍人员血清登革病毒抗体水平监测结果分析
- 2009年
- 〔目的〕了解深圳口岸外籍人员中登革病毒(Dengue Virus,DV)感染状况,为我国口岸登革热防控措施提供依据。〔方法〕用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2008年8—9月入境体检的外籍人员进行血清DV IgM、IgG抗体检测,ELISA可疑结果采用登革热IgG/IgM联合快速检测卡进行复检以最终判定结果。〔结果〕共对440名外籍人员进行了血清DVIgM、IgG抗体检测,IgM抗体阳性率为2.27%(10/440),IgG抗体阳性率为1.14%(5/440)。未检出IgM、IgG抗体均阳性者。东南亚地区人员的DV IgM、IgG抗体阳性率分别为7.59%(6/79)和3.80%(3/79);拉丁美洲人员的DV IgM和IgG抗体阳性率均为6.67%(1/15);北美地区人员的DV IgM抗体阳性率为0.99%(1/101)且未检出DV IgG抗体阳性者;欧洲地区人员的DVIgG抗体阳性率为1.59%(1/63)且未检出DVIgM抗体阳性者;非洲和大洋洲人员均未检测出DV抗体阳性者。〔结论〕与其他地区相比,东南亚和拉丁美洲入境人员携带DV的可能性较大。随着全球人口流动的日益频繁,应进一步加大对口岸传染病的防控力度。
- 董瑞玲朱玉兰张登峰俞杨刘胜牙王佃鹏黄宗炎
- 关键词：登革病毒IGM抗体IGG抗体外籍人员
- 三种实时荧光RT-PCR试剂在检测甲型H1N1流感病毒中的应用被引量：2
- 2010年
- 〔目的〕结合WHO公布的甲型H1N1流感病毒的检测引物和探针,探索合适的实时荧光RT-PCR试剂应用于国境口岸甲型H1N1流感病毒疑似标本的检测。〔方法〕通过对连续梯度稀释阳性对照品进行检测,从而分析AB AgPath-ID、Qiagen QuantiTect和Takara One Step PrimeScript 3种常用实时荧光RT-PCR试剂的灵敏度、信号强度、反应效率等因素。〔结果〕3种试剂的检测下限均为1:1000倍稀释阳性对照品;AB AgPath-ID、Qiagen QuantiTect和Takara One Step PrimeScript检测的线性斜率分别为-5.517、5.214和-4.600;信号强度上Qiagen QuantiTect相对于其他2种明显偏弱。〔结论〕为国境口岸输入性甲型H1N1流感病例的检测和监控提供了有力的技术保障。
- 黄宗炎朱玉兰刘胜牙王佃鹏高朝贤董瑞玲黄彤文李政良胡孔新
- 关键词：实时荧光RT-PCR甲型H1N1流感病毒灵敏度
- 甲型H1N1流感双重荧光PCR快速筛查方法的研究
- 2010年
- 目的优化一种甲型H1N1流感的双重荧光PCR快速筛查方法。方法根据WHO推荐的甲型H1N1流感检测方案合成、标记引物和探针。通过改进反应条件与参数,优化了甲型H1N1流感的双重荧光PCR检测方法。结果该方法敏感度高,特异性强,重复性好。应用该方法检测患者实际样品,结果与WHO推荐方法的检测结果一致;应用该法可在4h内完成对样品中甲型H1N1流感的检验。结论本研究优化的甲型H1N1流感的双重荧光PCR快速筛查方法可用于甲型H1N1流感的诊断。
- 王佃鹏朱玉兰李政良刘胜牙董瑞玲黄宗炎高朝贤胡孔新
- 关键词：甲型H1N1流感
- 梅毒螺旋体Tp0453和TpN47抗原的制备及应用被引量：1
- 2011年
- 目的表达纯化梅毒螺旋体Tp0453和TpN47蛋白,评价2种蛋白的检测效果,并建立一种新的梅毒抗体检测方法。方法以梅毒螺旋体Nichols菌株基因组DNA为模板,通过PCR扩增Tp0453和TpN47蛋白基因,构建原核表达载体;转化表达菌株后经IPTG诱导表达,并优化表达条件,大规模培养后采用Ni2+亲和柱纯化目的蛋白;纯化蛋白用过碘酸钠法进行HRP标记,采用双抗原夹心ELISA法分别评价两种蛋白的检测效果,在此基础上,按比例混合两种抗原,并建立双抗原夹心ELISA检测法。结果构建了Tp0453和TpN47蛋白的原核表达载体,在低温(27℃)和低剂量IPTG(0.1mmol/L)诱导条件下,有效的实现了Tp0453和TpN47蛋白的可溶性表达。采用Ni2+亲和纯化方法成功纯化出了高纯度的Tp0453和TpN47融合蛋白,ELISA检测结果显示Tp0453比TpN47具有更强的反应性,两种蛋白混合,建立的双抗原夹心ELISA检测法通过血清学试验表明具有很好的敏感度和特异性。结论实现了梅毒螺旋体Tp0453和TpN47蛋白快速高效的表达,并结合2种抗原优势,建立了一种高效的梅毒双抗原夹心ELISA检测方法。
- 朱玉兰黄宗炎刘胜牙王佃鹏叶健忠张登峰
- 关键词：梅毒螺旋体双抗原夹心纯化
- LPL基因C1573T多态性与耐力训练对心脏影响的研究
- 2007年
- 目的探讨脂蛋白脂酶C1573T单核苷酸多态性与有氧耐力训练对心脏结构和功能的影响。方法选择102名从未参加专业训练来自中国北方地区男性士兵作为受试者。对所有受试者运用PCR-RFLP法测定LPL基因内含子6C1573T基因多态性。并对所有受试者进行为期18周的耐力训练,采取递增负荷运动实验测定受试对象训练前后左心室结构和功能。结果3种基因型的分布频率分别为CC:40(0.39),CT:43(0.42),TT:19(0.19)。以单因素方差分析对比不同基因型群心脏结构和功能。训练前3个基因型群间心脏结构和功能的多个指标差异存在显著性(P<0.05)。CT基因型群心脏结构和功能训练敏感性明显大于其他两个基因型群(P<0.05)。结论3个基因型群间心脏结构和功能存在初始遗传水平的差异并显示CT基因型群心脏的结构和功能对运动训练更敏感。
- 王佃鹏文立张勇曹红席翼胡扬
- 关键词：脂蛋白脂肪酶基因多态性心脏结构和功能
- 梅毒螺旋体Tp0453和TpN47蛋白的表达纯化和在梅毒检测中的应用被引量：1
- 2009年
- 近年来，梅毒检测方法的研究已成为性传染病防治中的一个研究热点。在众多梅毒螺旋体（Treponema pallidum，Tp）基因编码的蛋白中，研究热点包括TpN47（Tp0574）、TpN17（Tp0435）、TpN15（Tp0171）、TpN44．5（TmpA）等抗原。本研究以表达纯化的TpN47和Tp0453蛋白为对象，探讨其在梅毒血清学检测中的应用效果。
- 朱玉兰黄宗炎吴兵王佃鹏叶健忠刘胜牙张登峰
- 关键词：梅毒螺旋体梅毒检测TP0453纯化梅毒血清学检测基因编码
