王华
- 作品数：47 被引量：85H指数：6
- 供职机构：内蒙古民族大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金高等学校教学研究项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生农业科学文化科学更多>>
- 利用天然深共晶溶剂绿色高效提取红车轴草异黄酮的方法
- 本发明公开了一种利用天然深共晶溶剂绿色高效提取红车轴草异黄酮的方法，包括红车轴草全草预处理；天然深共晶溶液制备；红车轴草异黄酮成分提取；异黄酮成分分析；红车轴草异黄酮富集。与现有技术相比，本发明采用天然深共晶溶液作为新型...
- 于丽丽霍红雁狄建军田迅王华徐雅楠李鑫周文华
- 文献传递
- β-环糊精葡萄糖基转移酶突变基因的表达及突变酶酶学性质分析
- 2015年
- 通过对已构建的β-CGTase质粒载体采用一步PCR法进行大片段基因的定点突变,得到三个带有突变位点的质粒载体,并将其进行转化得到突变菌株。分析突变酶的酶学性质并与β-环糊精葡萄糖基转移酶比较,结果表明突变酶酶活力提高到原酶活力的1.6倍以上,且突变酶作用的最适温度60℃、最适p H6.0、在60℃下和p H5~8范围内均非常稳定,经方差分析突变酶与原酶的酶学性质差异不显著（p〉0.05）,但是酶活力差异显著（p〈0.05）。
- 王华李华
- 关键词：定点突变
- 牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿辅助蛋白AP1、BP、AP2三基因的串联表达及其免疫原性研究被引量：4
- 2018年
- 为探究无乳链球菌菌毛岛屿3个亚基AP1、AP2、BP融合蛋白的抗原性,本研究根据该3个亚基基因的主要抗原结构域序列设计并合成引物,通过重叠延伸PCR技术获得上述3个亚基的串联核苷酸片段,并插入pET-30a(+)载体,转化至BL21(DE3)感受态细胞后诱导表达,表达蛋白经亲和层析纯化后进行western blot鉴定和小鼠免疫实验。结果表明,AP1-AP2-BP融合抗原具有良好的反应原性和免疫原性。本研究为进一步研究无乳链球菌基于AP1-BP-AP2融合蛋白的致病机制、检测制剂及亚单位疫苗研制提供了实验依据。
- 布日额王金良王金良吴金花陈金龙锡林高娃王华朝洛蒙
- 关键词：无乳链球菌BP
- SYBR Green实时荧光PCR高通量检测转基因大豆油被引量：3
- 2011年
- 采用SYBR Green实时荧光PCR技术,建立了食用大豆油转基因成分的检测方法。根据转基因大豆中内源参照基因lectin和外源基因35S启动子、NoS终止子和cp4 epsps基因,设计特异性引物,在Roche荧光PCR仪上进行实时荧光PCR扩增。荧光曲线表明,SYBR Green实时荧光PCR可特异性地检测大豆油中的转基因成分,方法准确、快速,并运用熔解曲线进行产物分析,验证了试验结果的特异性和准确性,检测方法灵敏度高。
- 王华梁怀宇李华
- 关键词：SYBR转基因大豆油
- 牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛辅助蛋白AP1、BP主要抗原域串联表达及其免疫活性鉴定被引量：8
- 2017年
- 目的构建无乳链球菌菌毛岛屿辅助蛋白AP1、菌毛骨架蛋白BP主要抗原域串联表达重组载体,对表达产物进行抗原性分析及鉴定。方法利用DNAstar Protean功能筛选AP1和BP主要抗原结构域,引入15位柔性多肽,通过重叠延伸PCR技术串联融合AP1、BP主要抗原决定簇基因区,PCR扩增串联体基因片段,克隆至pET-30a(+)载体后转化BL21(DE3)细胞,表达的目的蛋白经亲和层析纯化后进行Western blot鉴定。结果 PCR扩增出321bp的AP1和660bp的BP主要抗原域,经重叠延伸PCR获得966bp的AP1、BP串联体基因片段,DNA测序表明无碱基缺失、突变和移码。构建的重组表达载体经IPTG诱导能可溶性表达分子质量约45ku的目的蛋白,纯化后重组蛋白的纯度≥95%,Western blot分析表明,重组融合蛋白能被兔源抗无乳链球菌阳性血清识别。结论重叠延伸PCR获得AP1、BP主要抗原域串联体,构建的pET-30a(+)/AP1+BP重组表达载体能以包涵体形式表达目的蛋白,表达产物具有良好的反应原性,为研究基于AP1、BP蛋白的致病机制及其免疫活性奠定了实验基础。
- 布日额王金良吴金花锡林高娃陈金龙孙立杰王华朝洛蒙
- 关键词：无乳链球菌
- 重叠延伸PCR技术构建β-环糊精葡糖基转移酶基因的定点突变原核表达载体被引量：2
- 2013年
- 采用重叠延伸PCR技术对环糊精葡萄糖基转移酶基因序列中保守区域的二个氨基酸位点Y127,R254进行体外基因定点突变。将突变基因分别亚克隆进pUC-18,经PCR鉴定及序列分析,所转化的Escherichia coli BL21(DE3)中含有插入的突变基因重组质粒,结果表明成功构建了Y127F、R254F二个突变基因的重组表达载体。
- 王华文一于寒松朴春红王玉华刘俊梅胡耀辉
- 关键词：重叠延伸PCR定点突变原核表达载体
- 超临界CO_2杀灭牛乳中细菌模型建立
- 2012年
- 选用超临界CO2对牛乳中细菌进行杀菌处理。采用中心旋转组合试验设计方法,考察了不同的压力、温度和杀菌时间对牛乳中细菌的作用效果,建立了相应的杀菌模型,并利用SPSS对数据进行了相关性分析,得到实测值与预测值的相关系数为0.9980。
- 李华冀照君王华穆莎茉莉袁晓霞
- 关键词：超临界CO2牛乳杀菌
- 定点突变β-环糊精葡萄糖基转移酶及其突变菌株发酵条件优化
- β-环糊精葡萄糖基转移酶(p-CGTase)属于α-淀粉酶家族,可以作用于淀粉的葡萄糖基,从而发生环化、耦合、歧化、水解等反应,其中环化作用生成的β-环糊精(β-CD)具有非极性空穴和外亲水的特点,有稳定、增溶、缓释以及...
- 王华
- 关键词：定点突变响应面
- 文献传递
- 食品专业实验室开放模式探究——以内蒙古民族大学为例被引量：2
- 2021年
- 以内蒙古民族大学为例,探讨了实验室开放运行的基本模式,提出了实验室开放过程中存在的问题及解决途径。通过多种方式充分利用现有实验室资源,建设创新创业开放共享实验室,可提高学生的实践能力和创新创业能力,培养适应当前发展的应用型人才。
- 倪娜李红娟王华李华
- 关键词：食品科学与工程创新创业能力
- 牛乳腺炎无乳链球菌菌毛岛屿PI-2a辅助蛋白AP2基因的克隆及序列分析被引量：3
- 2015年
- 目的克隆牛乳腺炎无乳链球菌菌毛岛屿PI-2a辅助蛋白AP2基因,并进行序列分析。方法根据GenBank公布的牛源无乳链球菌菌毛岛屿PI-2a的AP2基因序列,使用生物信息学软件Primer5.0设计1对特异性引物,以内蒙古东部地区乳源无乳链球菌临床菌株总DNA为模板,扩增AP2基因片段。结果扩增的AP2基因经克隆测序,长度为699bp,其序列与GenBank上公布的牛源无乳链球菌菌毛岛屿PI-2a的AP2基因(EU930008)相似性为99.57%,编码233个氨基酸残基,有2个核苷酸出现突变,但是氨基酸序列没有发生改变,属于无意义突变。结论成功克隆出内蒙古东部地区牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿AP2基因,为进一步研究AP2基因编码蛋白的抗原性奠定了基础。
- 杜长智吴金花锡林高娃王华白文丽于辰龙布日额
