- Act5·diff血液分析仪的临床应用评价被引量：2
- 2008年
- 目的:对Act5.diff(Beckman Coulter)血液分析仪进行应用评价。方法:以Coulter gen.s system2评价Act5.diff血液分析仪结果[白细胞(WBC),红细胞(RBC),血红蛋白(HGB),红细胞比积(HCT),平均红细胞容积(MCV),血小板(PLT)],再将Act5.diff WBC分类结果与镜检WBC分类进行比较。结果:各项参数测定的变异系数(CV)均达到了设计规定的要求。与Coulter gen.s system 2血液分析仪血细胞计数(CBC:complete blood cell count)的相关性比较,相关系数r=0.908~0.997。白细胞五分类与显微镜目测法比较,r=0.466~0.985。结论:该仪器的主要指标评价结果符合设计要求,能满足临床血液常规分析。
- 傅锦芳王双杨金玲王雷
- 关键词：血液分析仪
- 老年冠心病患者外周血血友病因子和内皮细胞的检测及其相关性分析被引量：4
- 2008年
- 目的:探讨老年冠心病(CAD)患者血管内皮细胞受损与血友病因子(vWF)的关系。方法:选择27例老年CAD患者和24例正常老年人(NC组),测定其循环内皮细胞(CEC)数、血浆血管性血友病因子(vWF)的水平。结果:老年CAD患者CEC(9.30±4.11)和血浆vWF含量(196.16±32.34)明显高于NC组(2.52±0.91,117.77±18.99,P<0.01);且CEC数量与vWF水平呈正相关(r=0.823,P=0.0001)。结论:老年CAD患者血管内皮的损伤与vWF相关。
- 王双王雷夏朝华唐发清
- 关键词：冠心病循环内皮细胞血管性血友病因子
- 髓系触发受体-1在脆弱类杆菌诱导小鼠脓毒血症中的作用被引量：3
- 2009年
- 目的探讨小鼠TREM-1基因重组慢病毒干扰载体(Lentivector,LV)TREM-1 vshRNA对脆弱杆菌脓毒血症小鼠脾脏中促炎症因子TNF-α,IL-1β,IL-6表达及NF-κB通路的影响。方法将清洁级BALB/c雄性小鼠分成4组,即正常对照组(C组),脆弱类杆菌脓毒症模型生理盐水组(S组),TREM-1 vshRNA干扰实验组(T组)和GFPvshRNA干扰实验组(G组)。观察各组中小鼠脾内TREM-1,TNF-α,IL-1β,lL-6的蛋白表达以及IkBa,pDAP12,NF-κB p65的表达情况的变化。结果与C组比,T组TREM-1 mRNA及蛋白表达均有显著增加(P<0.01);T,G,S组脾细胞中TNF-α,IL-1β,IL-6的含量均较C组显著增加(P<0.01);T组脾细胞中TNF-α,IL-1β,IL-6的含量均较S,G组明显降低(P<0.01)。S组脾细胞中的pDAP12和核内NF-κB p65蛋白表达水平明显增强,IκBa蛋白表达水平降低;而T组与S组比较,pDAP12和NF-κB p65蛋白的表达水平显著下调。结论小鼠TREM-1基因重组慢病毒干扰载体可选择性抑制TREM-1表达,下调脆弱类杆菌诱导的促炎症因子的分泌,而转染可能是通过下调DAP12的表达,稳定IkBa/NF-κB复合物,抑制TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-8基因的转录,而对脆弱类杆菌脂多糖炎症反应产生抑制作用。
- 宋达疆黄晓元杨兴华肖目张王双
- 关键词：脓毒症髓系细胞触发受体-1慢病毒载体
- ProBDNF/p75^(NTR)在脓毒症患者外周血淋巴细胞中的表达变化及对淋巴细胞分化的影响
- 2023年
- 目的:脓毒症是宿主对感染的反应失调引起的危及生命的器官功能障碍。由于缺乏有效的治疗手段,脓毒症一直是临床治疗的难点和挑战。研究表明脑源性神经营养因子前体(pro-brain-derived neurotrophic factor,proBDNF)可通过结合其高亲和力受体p75神经营养因子受体(p75 neurotrophin receptor,p75^(NTR))激活下游信号通路,扰乱免疫炎症微环境,在脓毒症病程的进展中发挥重要作用。本研究主要探讨淋巴细胞来源的proBDNF/p75^(NTR)在脓毒症患者中的表达变化及其对淋巴细胞分化的影响。方法:收集健康志愿者(对照组,n=40)和初次入院的脓毒症患者(脓毒症组,n=40)外周血样本,进行血常规临床指标检测,采用流式细胞术检测淋巴细胞亚群及其proBDNF/p75^(NTR)的表达变化;体外分选对照组外周血淋巴细胞并采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激培养,流式细胞分析技术检测LPS刺激对淋巴细胞亚群proBDNF/p75^(NTR)的表达影响;随后采用p75^(NTR)的拮抗剂(p75^(ECD)-Fc)抑制p75^(NTR)观察对淋巴细胞分化的影响。结果:与对照组相比,脓毒症组患者入院时白细胞计数、中性粒细胞计数和中性粒细胞百分比均显著升高,淋巴细胞计数与淋巴细胞百分比均显著降低(均P<0.001),中性粒细胞与淋巴细胞比值、单核细胞与淋巴细胞比值均显著升高(均P<0.05)。与对照组相比,proBDNF在脓毒症组外周血中CD19^(+)B细胞的表达上调(P<0.05),而p75^(NTR)在CD19^(+)B细胞、CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞中的表达均上调(均P<0.05)。体外采用LPS刺激可诱导对照组外周血淋巴细胞的proBDNF/p75^(NTR)表达上调(均P<0.05),趋势与在脓毒症组外周淋巴细胞的表达变化基本一致。抑制p75^(NTR)可增加CD4^(+)T细胞和CD19^(+)B细胞的百分比,促进细胞因子IL-4和IL-10的表达,并降低IL-1β和IL-6的产生(均P<0.05)。结论:脓毒症患者入院时即处于以淋巴细胞数量减少为特征的免疫抑制
- 王双王双曾秋明高山戴茹萍戴茹萍
- 关键词：淋巴细胞P75神经营养因子受体脓毒症
- 髓系细胞触发受体1慢病毒载体对脆弱拟杆菌脓毒症小鼠促炎因子表达的影响
- 目的了解髓系细胞触发受体1(TREM-1)基因重组慢病毒短发夹RNA(vshRNA)载体对脆弱拟杆菌脓毒症小鼠促炎因子表达及生存率的影响。方法(1)构建TREM-1 vshRNA载体,经实验
- 宋达疆黄晓元任利成杨兴华肖目张王双
- 显微转流术治疗精索静脉曲张合并弱精症3例被引量：1
- 2017年
- 为总结显微转流术治疗精索静脉曲张合并弱精症的临床经验,作者回顾性分析3例行显微镜下精索静脉高位结扎+腹壁浅静脉转流术患者的临床资料及治疗方法。患者术后均无明显并发症,原有症状及体征消失,3个月复查阴囊B超及精液常规检查,各项指标逐渐好转。显微镜下精索静脉高位结扎联合血管转流术既可阻断静脉血逆流,又能使睾丸建立新的回流通道,同时保护了睾丸动脉和淋巴管,是值得推广的治疗精索静脉曲张合并弱精症的方法。
- 王双祖雄兵刘龙飞唐举玉胡希恒
- 关键词：精索静脉曲张弱精症腹壁浅静脉睾丸动脉淋巴管
- 髓系细胞触发受体1慢病毒载体对脆弱拟杆菌脓毒症小鼠促炎因子表达的影响被引量：3
- 2009年
- 目的了解髓系细胞触发受体1（TREM-1）基因重组慢病毒短发夹RNA（vshRNA）载体对脆弱拟杆菌脓毒症小鼠促炎因子表达及小鼠存活率的影响。方法（1）构建TREM-1 vshRNA载体。经实验确定脓毒症小鼠模型制作条件：腹腔注射2．5×10^9CFU／mL灭活脆弱拟杆菌0．5mL，刺激12h。（2）115只小鼠按随机数字表法分为健康对照组（3只）和脓毒症模型组、绿色荧光蛋白（GFP）干扰组、TREM-1干扰组、TREM-1半量干扰组。后4组每组28只，先分别经尾静脉注射等渗盐水、GFPvshRNA、TREM-1 vshRNA 2×10^8TU、TREM-1 vshRNA 1×10^8TU；1h后，将该4组小鼠制成脓毒症模型，健康对照组注射等体积等渗盐水。12h后处死5组小鼠（每组3只），取血检测血浆TNF-α、IL-1β和IL-6含量；取肝组织标本检测TREM-1 mRNA及其蛋白的表达水平。后4组小鼠每组所余25只用于观察腹腔注射后72h的存活率。（3）另建立脓毒症小鼠模型125只，其中100只分别于腹腔注射后1、2、4、6h尾静脉注射TREM-1 vshRNA 2×10^8Tu（每时相点25只），余下25只尾静脉注射等渗盐水为对照组。计算尾静脉注射后72h小鼠存活率。结果（1）与脓毒症模型组比较，TREM-1干扰组、TREM-1半量干扰组小鼠血浆TNF-α、IL-1β、IL-6含量均下降（P〈0．05），以TREM-1干扰组下降最明显。GFP干扰组中各促炎因子含量与脓毒症模型组接近（P〉0．05）。（2）与GFP干扰组比较，TREM-1干扰组及其半量干扰组小鼠肝组织TREM-1 mRNA表达均明显下调（P〈0．01），以TREM-1干扰组尤为明显（P〈0．05）。各组小鼠TREM-1蛋白表达情况与此一致。（3）脓毒症模型组、GFP干扰组小鼠腹腔注射后72h存活率均为16％。TREM-1干扰组及其半量干扰组分别为76％和44％（P〈0．05或P〈0．01）。（4）另建立的125只脓毒症小鼠模型中，对照组及腹腔注射后1、2、4、6h组其尾静脉注射后72h存活率分别为1
- 宋达疆黄晓元任利成杨兴华肖目张王双
- 关键词：脓毒症慢病毒载体
- 盐诱导激酶抑制剂HG-9-91-01对小鼠脓毒症相关认知功能障碍的保护作用及其机制
- 2023年
- 目的:脓毒症相关认知功能障碍是脓毒症患者常见的并发症,目前病理机制不明,缺乏有效的防治手段。盐诱导激酶(salt-induced kinase,SIK)是调节代谢、免疫、炎症反应等的重要分子,与多种神经系统疾病的发生和发展相关。本研究旨在探讨SIK在脓毒症小鼠海马中的表达,以及SIK抑制剂HG-9-91-01在脓毒症相关认知功能障碍中的作用及其机制。方法:首先,将C57BL/6小鼠随机分为对照组(Con组)和脓毒症模型组[脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组]。LPS组小鼠以8 mg/kg的剂量腹腔注射LPS,Con组小鼠予注射等体积生理盐水。在注射后1、3、6 d取小鼠海马组织,分别采用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative PCR,qPCR)和蛋白质印迹法检测SIK1、SIK2、SIK3的mRNA和蛋白质的表达水平。然后,将小鼠随机分为Con组、LPS组、SIK抑制剂组(HG组)。LPS组和HG组注射LPS构建脓毒症模型,HG组在注射LPS后的第3~6天以10 mg/kg的剂量腹腔注射HG-9-91-01,LPS组注射等体积溶媒。在注射LPS后的第7~11天进行Morris水迷宫实验(Morris water maze,MWM)以评估3组小鼠的认知功能。行为学检测后取3组小鼠的海马组织,采用qPCR检测炎症因子和小胶质细胞标志分子的mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、CD68、离子钙结合衔接分子1(ionized calcium binding adaptor molecule 1,Iba-1)、N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体(NMDA receptor,NR)亚型、cAMP反应元件结合蛋白(cAMPresponse element-binding protein,CREB)调控的转录共激活因子1(CREB-regulated transcription coactivator 1,CRTC1)、胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)的蛋白质表达水平,免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)检测海马CA1区、CA3区、齿状回(dentate gyrus,DG)Iba-1阳性细胞的表达,并进行Sholl分析。结果:与Con组比较,LPS组小鼠海马组织SIK1、SIK2、SIK3的mRNA和蛋白质�
- 王雪琴王双王双
- 关键词：脓毒症胰岛素样生长因子1突触可塑性
- 六西格玛度量评价Beckman Coulter LH750血细胞分析仪性能被引量：9
- 2014年
- 目的：评价Beckman Coulter L H750检测系统的性能。方法根据CLSI EP9确定分析仪的真实度，根据CLSI EP5确定分析仪的精密度，通过六西格玛度量方法计算血细胞分析仪各项目的性能并进行评估。结果 L H750白细胞计数（WBC ）的六西格玛水平在5．5～11．1，红细胞计数（RBC）在5．5～9．4，血红蛋白含量（Hb）在6．0～14．6，血小板计数（PLT ）在4．1～10．0，红细胞压积（HCT）的六西格玛值低于了3．0。结论 Beckman Coulter LH750检测系统基本满足六西格玛的质量管理要求， HCT这个项目还需要进行质量改进。六西格玛质量理论可以反映检测过程的性能。
- 王双邱世飏
- 关键词：六西格玛偏倚
- 髓系触发受体-1基因RNAi慢病毒载体的构建及功能初步检测被引量：3
- 2009年
- 目的:构建髓系触发受体-1(TREM-1)基因RNAi慢病毒载体,探讨TREM-1在脆弱类杆菌所致炎症反应中的作用。方法:根据小鼠TREM-1 mRNA序列选择4个靶序列并设计合成4对双链DNAoligo,其两端含酶切位点黏端,同时合成1对阴性对照双链DNA oligo;将以上5对双链DNA oligo退火后连入pGCSIL-GFP载体,经PCR及测序鉴定后,将以上质粒分别与包装质粒混合物共转染293T细胞,包装产生病毒颗粒。各组病毒载体转染Raw264.7细胞后,运用real-time PCR和ELISA检测TREM-1 mR-NA和蛋白表达水平。实时定量PCR和ELISA观察干扰TREM-1后脆弱杆菌内毒素引发的Raw264.7细胞内毒素血症模型中TREM-1的表达变化。结果:PCR和测序证实目的双链DNA oligo片段已被准确克隆到pGCSIL-GFP载体;各质粒与包装质粒共转染293T细胞后产生了高滴度的慢病毒颗粒;各组慢病毒感染Raw264.7细胞后均可以显著抑制TREM-1的表达,以pGCSIL-GFP/Lenti-1组效果最明显。在脆弱杆菌内毒素引发的体外细胞内毒素血症模型中TREM-1表达明显增高,实时定量PCR表明慢病毒干扰载体能显著抑制模型中TREM-1的表达。结论:成功构建了小鼠TREM-1基因RNAi慢病毒载体,所构建的慢病毒载体能够抑制脆弱类杆菌内毒素所诱导的TREM-1的表达。
- 宋达疆黄晓元杨兴华肖目张王双
- 关键词：RNAI慢病毒载体脆弱类杆菌
