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兔卵母细胞孤雌激活方法的研究: 2011年; 对兔卵母细胞的孤雌激活方法进行探讨,为兔的体细胞核移植奠定良好的技术平台。体外成熟培养20～22h的兔卵母细胞随机分组,分别进行以下试验:采用不同脉冲电压、脉冲次数和脉冲时间,电激活兔卵母细胞,摸索最佳电激活参数;比较不同的激活方法处理兔卵母细胞的效果,Ⅰ:Ion 5min+6-DMAP 3h,Ⅱ:Ion 5min+CHX 3h,Ⅲ:Ion 5min+6-DMAP联合CHX 3h,Ⅳ:电激1次联合6-DMAP+CHX 3h;优化6-DMAP与CHX作用时间。结果显示:当电激参数为:电压40V/mm,脉冲时间20μs和脉冲次数3次时,兔孤雌胚的分裂率和囊胚率最高,可达80.64%和14.51%;采用第Ⅳ种方法激活兔的卵母细胞,胚胎的分裂率和囊胚率(80.64%,13.71%)均显著高于Ⅰ组(66.67%,8.6%)和Ⅱ组(43.21%,1.24%,P<0.05),略高于第Ⅲ组(77.59%,12.07%);当兔孤雌胚分别在含6-DMAP和CHX的CM中培养1h和3h时,1h处理组在分裂率(80.68%vs 77.59%)和囊胚率(15.91%vs 12.07%)上都略高于3h处理组。结果表明:兔卵母细胞经Ion处理5min,或先电激1次(参数为电压40V/mm,脉冲时间20μs,脉冲3次),再用2mmol/L 6-DMAP+5mg/L CHX处理1～3h,均可获得较好的激活效果,有利于兔孤雌胚的发育。; 向舒杨金姬石金月张顺王建陆凤花石德顺; 关键词：电激活 6-DMAP 放线菌酮

水牛转基因克隆胚胎的制备: 主要是探讨利用体细胞核移植技术制备水牛转外源基因(EGFP)克隆胚胎的可行性。体外成熟培养22～24h的水牛卵母细胞,放入含有5μg/ml细胞松弛素的操作液中,在装有Spindle View系统的显微操作仪下进行去核。采...; 陆凤花罗婵李楠王建韦英明石德顺; 文献传递

不同血清类型对水牛胚胎体外培养效果的影响被引量：1: 2011年; 从屠宰场收集水牛卵巢上抽取的卵母细胞,经体外成熟培养后分别进行孤雌激活(PA)和体外受精(IVF),将获得的PA或IVF胚胎分别培养于添加浓度均为5%的牛血清白蛋白(BSA)、胎牛血清(FBS)、发情水牛血清(OBS)、发情牛血清(OCS)和混合血清(OCS与FBS按1:1混合)的培养液中培养7～9 d,并观察胚胎的体外发育情况。结果,PA胚胎培养在OCS和混合血清组的卵裂率(73.52%,68.07%)和囊胚率(30.59%,27.73%)均显著高于BSA(38.37%,6.40%)、OBS(44.97%,10.05%)和FBS(52.02%,17.04%)组(P<0.05);IVF胚胎的卵裂率和囊胚率以OCS组最高(62.50%,22.62%),显著高于BSA(30.50%,6.38%)、OBS(35.48%,7.10%)和FBS组(40.11%,11.76%,P<0.05),但与混合血清组(60.42%,21.35%;P>0.05)差异不显著。结果表明,在水牛胚胎体外培养体系中添加5%的OCS或混合血清均能有效地促进水牛胚胎的体外发育。; 蒋建荣凌泽继邹知明陆凤花向舒张顺李楠王建石德顺; 关键词：血清孤雌激活体外受精胚胎

哺乳动物体细胞核移植后核重编程的研究进展: 2010年; 介绍了核移植后核重编程的机制,并讨论了核移植重编程中DNA甲基化和组蛋白乙酰化对核移植胚胎的影响。; 王建向舒陆凤花杨素芳石德顺; 关键词：体细胞核移植核重编程组蛋白乙酰化

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王建