祝春来
- 作品数：9 被引量：14H指数：3
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：陕西省科技统筹创新工程计划项目陕西省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 肝癌细胞外泌体miRNA鉴定及hsa-miR-1246功能研究
- 目的：筛选肝癌细胞与正常肝细胞有显著差异表达的miRNA,预测其靶基因与干预信号通路,研究miRNA与肝癌发生发展等相关的功能,为肝癌的早期诊断以及治疗提供依据。方法：PEG富集肝癌细胞与正常肝细胞外泌体并予以鉴定,Il...
- 祝春来纪奇峰王伟汪钦颜真
- 关键词：肝癌外泌体MIRNA信号通路
- 液相色谱-串联质谱法同时测定大鼠血浆中阿霉素和塞来昔布被引量：3
- 2009年
- 目的:建立同时测定大鼠血浆中阿霉素和塞来昔布的液相色谱-串联质谱(LC/MS/MS)方法,研究这两种药物联合应用的药代动力学。方法:大鼠尾静脉注射阿霉素和塞来昔布,眼眶取血并抗凝,离心分离血浆,采用乙酸乙酯提取血浆中的阿霉素和塞来昔布,N2吹干乙酸乙酯,残留物用50μL甲醇溶解,取20μL用于LC/MS/MS分析。结果:用LC/MS/MS法检测大鼠血浆中阿霉素和塞来昔布的线性范围为1-800ng/mL,日内、日间精密度(RSD)均小于15%,检测血浆低、中、高三个浓度(8、50、500ng/mL)阿霉素的回收率分别为101.2%、95.1%和91.4%,检测血浆低、中、高三个浓度(8、50、500ng/mL)塞来昔布的回收率分别为105.6%、106.8%和93.7%。大鼠尾静脉注射5.8mg/kg阿霉素和3.8mg/kg塞来昔布的半衰期分别为2.3h和3.6h,曲线下面积分别为670ng·h·mL-1和1480ng·h·mL-1。结论:建立的方法灵敏、准确、快速,适用于阿霉素和塞来昔布的药代动力学研究。
- 祝春来张邦乐宦梦蕾黄秋菊苏丹周四元
- 关键词：阿霉素塞来昔布LC/MS/MS法
- PLCE1基因及rs2274223和rs3765524单体型的克隆与表达
- 目的：克隆人PLCE1基因，构建PLCE1 rs2274223和rs3765524 GT(PLCE1 Minor)和AC(PLCE1 Major)单体型真核表达重组载体，研究PLCE1基因多态性及单体型与基因表达的相关性...
- 李达代鹏王伟张文涛汪钦束毅祝春来纪奇峰颜真
- 关键词：单核苷酸多态性重叠延伸PCR基因克隆基因表达
- 文献传递
- PLCE1基因及rs2274223和rs3765524单体型的克隆与表达
- 2016年
- 目的：克隆人PLCE1基因,构建PLCE1 rs2274223和rs3765524 GT（PLCE1 Minor）和AC（PLCE1 Major）单体型真核表达重组载体,研究PLCE1基因多态性及单体型与基因表达的相关性。方法：利用重叠延伸PCR、In-Fusion技术构建PLCE1真核表达载体;基于同源重组的双点突变技术改造目的基因;利用基因转染、实时定量PCR和蛋白印迹等技术实现PLCE1表达载体在真核细胞中的过表达及表达水平的鉴定。结果：成功扩增并获得了全长6 927bp的人PLCE1 cDNA并经过DNA测序证实,与NCBI数据库PLCE1参考序列（NM_016341）比较,发现编码区3 554～3 572bp处存在18bp连续碱基插入,其余序列基本匹配。成功构建了PLCE1 Minor和PLCE1 Major两种单体型重组真核表达载体,转染细胞揭示PLCE1 Minor型的mRNA转录和蛋白质表达水平均高于Major型。结论：发现了一种新的PLCE1 mRNA转录本,成功构建了2种单体型真核表达载体;发现PLCE1 rs2274223G-rs3765524T单体型能够促进自身mRNA和蛋白质表达,为进一步揭示PLCE1 SNPs与癌症易感性的关系奠定了基础。
- 李达代鹏王伟张文涛汪钦束毅祝春来纪奇峰梁平颜真
- 关键词：单核苷酸多态性重叠延伸PCR基因克隆基因表达
- 一种新手性配体的合成及其锇配合物的催化作用被引量：1
- 2006年
- 以1，4-二氯-2，3-二氮杂萘为原料，经两步反应合成了一种新的金鸡纳生物碱衍生物手性配体2，其结构经^1H NMR，^13C NMR和MS表征。OsO4-2用于催化烯烃的不对称双羟化反应，化学产率91％～94％，e．e．值93％～99％；用于催化烯烃的不对称氨羟化反应，收率45％～63％，e．e．值83％～95％。
- 王巧峰丁愉祝春来薛小燕孙晓莉
- 关键词：手性配体
- 白藜芦醇与白藜芦醇苷抗氧化活性比较被引量：5
- 2010年
- 目的:比较白藜芦醇与白藜芦醇苷清除自由基的能力以及对H_2O_2造成人脐静脉血管内皮细胞ECV304损伤的保护作用。方法:以邻二氮菲-Fe^(2+)体系产生羟基自由基(·OH)的方法研究白藜芦醇与白藜芦醇苷清除自由基的能力;采用H_2O_2诱导人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)氧化损伤模型,四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法检测两种药物对H_2O_2致氧化损伤细胞的保护作用。结果:白藜芦醇与白藜芦醇苷清除·OH的能力呈剂量依赖性,其中白藜芦醇苷的作用比白藜芦醇强,但均弱于维生素C;白藜芦醇对H_2O_2致氧化损伤的ECV304细胞的保护作用强于白藜芦醇苷。结论:白藜芦醇对H_2O_2损伤的ECV304细胞具有明显的保护作用。
- 苏丹张邦乐宦梦蕾黄秋菊祝春来周四元
- 关键词：白藜芦醇白藜芦醇苷抗氧化活性
- 肝细胞癌患者血清外泌体microRNA表达鉴定被引量：4
- 2018年
- 目的:探讨肝癌细胞外泌体中差异表达的microRNAs(miRNAs)在肝细胞癌(HCC)诊断中的应用价值。方法:通过高通量测序筛选肝癌细胞外泌体中差异表达的miRNAs。实时定量PCR验证差异表达分子;检测差异表达的miRNAs在健康人(Health)、慢性乙型肝炎患者(CHB)、肝硬化患者(LC)及乙型肝炎病毒阳性的肝细胞癌患者(HCC)血清外泌体中的表达。结果:高通量测序筛选到肝癌细胞外泌体中差异表达的miRNA共88种,其中58种表达上调,30种表达下调。选择其中8种差异表达的miRNAs进行q RT-PCR验证,结果显示,此8种miRNAs在细胞上清外泌体、细胞内、癌与癌旁组织中的表达趋势与测序结果一致。miR-221-3p和miR-224-5p在HCC组外泌体中的表达水平显著高于Health组、CHB组和LC组(P<0.01),miR-124-3p和let-7a-5p在HCC组外泌体中的表达水平显著低于其他各组(P<0.05)。四个组中,miR-21-5p、miR-191-5p、miR-34a-5p和miR-122-5p的表达水平不存在显著性差异(P>0.05)。结论:血清外泌体中的miR-221-3p、miR-224-5p、miR-124-3p和let-7a-5p可能成为肝细胞癌的候选标志物。
- 纪奇峰祝春来祝春来毛壮汪钦王伟颜真
- 关键词：肝细胞癌外泌体MIRNAS肿瘤标志物
- PLCE1基因及rs2274223和rs3765524单体型的克隆与表达
- 目的:克隆人PLCE1基因,构建PLCE1 rs2274223和rs3765524 GT(PLCE1Minor)和AC(PLCE1 Major)单体型真核表达重组载体,研究PLCE1基因多态性及单体型与基因表达的相关性。...
- 李达代鹏王伟张文涛汪钦束毅祝春来纪奇峰颜真
- 关键词：单核苷酸多态性重叠延伸PCR基因克隆基因表达
- 地塞米松当归多糖前体药在大鼠胃肠道内容物中的释药特性被引量：1
- 2007年
- 目的:探讨以当归多糖为载体的地塞米松前体药在大鼠胃肠道内容物中的释药特性,考察其结肠靶向性。方法:将前体药与大鼠胃肠道不同部位内容物稀释液于37℃共同孵育,不同时间点取样,高效液相色谱法检测释放的地塞米松(dexamethasone, DEX)及地塞米松琥珀酸单酯(dexamethasone hemisuccinate,DSH)。结果:前体药在大鼠胃肠道各部位内容物稀释孵育液中均有DEX及DSH释放;DEX在小肠近端的释放量最大,在结肠和盲肠中的释放量次之,在胃和小肠远端的释放量较小;DSH在结肠和盲肠中的释放量大,在胃、小肠近端和小肠远端释放量小;在160min孵育时间时,DEX和DSH在结肠和盲肠中的释放总量是在胃、小肠近端和小肠远端释放总量的1．95倍。结论:以当归多糖为载体的地塞米松前体药具有一定的结肠靶向释药特性,有可能用作局部治疗结肠炎的结肠靶向药物。
- 刘新友周四元祝春来刘仁旺张琰程建峰梅其炳
- 关键词：当归多糖高效液相色谱
