罗云萍
- 作品数：45 被引量：165H指数：8
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划全球变化研究国家重大科学研究计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肿瘤pH微环境通过激活β-catenin/TCF4增强人乳腺癌肿瘤细胞的干性被引量：8
- 2014年
- 目的探讨酸性微环境对于乳腺癌肿瘤干细胞干性的影响及其作用机制。方法分别在pH 6.8和7.4的环境下,培养人乳腺癌细胞MDA-MB-231。用流式细胞术、PCR、Western blot、体外成球实验和细胞划痕实验分别检测肿瘤干细胞ALDHhigh细胞亚群的比率,干性基因SOX2、OCT4和Lin28b的表达,成球能力和肿瘤细胞迁移能力,同时检测相关信号通路的激活。结果酸性微环境通过激活β-catenin/TCF4信号通路提高MDA-MB-231的ALDHhigh细胞亚群的比例(P<0.05),上调干性相关基因的表达(P<0.01),增强体外成球能力(P<0.01)和迁移能力(P<0.05)。结论酸性微环境能够上调干细胞比例,维持肿瘤干细胞干性特征,增加乳腺癌肿瘤细胞迁移能力。
- 曹峰琦陈翀刘妍白丽鹏罗云萍
- 关键词：乳腺癌肿瘤干细胞
- B7修饰K562细胞来源的树突状细胞抗肿瘤作用的研究被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨共刺激信号分子B7转化人白血病细胞株K562后,K562-B7在细胞因子作用下分化为树突状细胞(Dendritic cell,DC),K562-B7-DC的生物学特性以及介导的抗肿瘤免疫作用。方法 构建重组真核表达质粒pcDNA3.1D7转化人白血病细胞株K562,获得单个细胞克隆。用K562-B7细胞株在GM-CSF、IL-4和IL-12的联合作用下分化为DC细胞,观察K562-B7-DC的生物学性质及其抗肿瘤的免疫功能。结果 K562-B7-DC在GM-CSF、IL-4和IL-12的联合作用下能分化为DC细胞并能诱导出较强的同种混合淋巴细胞反应及CTL活性,且能分泌内源性IL-12、INF-γ。结论 细胞因子联合诱生的K562-B7-DC能有效的执行其抗原提呈功能,同时协同T淋巴细胞发挥其抗肿瘤免疫作用。
- 曹唯希罗云萍蒋代凤李用国康格非
- 关键词：B7基因K562树突状细胞肿瘤免疫
- 白血病来源的树突状细胞抗肿瘤免疫功能的实验研究
- 目的:树突状细胞(DC)是免疫系统中一类重要的抗原提呈细胞,因其独特的免疫学特性.我们选用不同种类的白血病细胞系以及白血病患者的原代细胞,以不同细胞因子组合联合诱导,生成携带白血病抗原信息的DC细胞,对诱生的DC细胞进行...
- 罗云萍
- 关键词：树突状细胞抗肿瘤免疫白血病细胞共刺激分子
- 文献传递
- 重组逆转录病毒RV-40AS对K562细胞裸鼠移植瘤的实验研究
- 2008年
- 目的通过重组逆转录病毒RV-40AS表达bcr-abl反义RNA,激活蛋白激酶PKR引起靶细胞表型改变的策略,研究RV-40AS对K562致瘤裸鼠的抗肿瘤效应。方法建立K562细胞裸鼠移植瘤模型,瘤体注射重组逆转录病毒上清,观察裸鼠瘤体生长状况,于实验终点处死小鼠检测瘤体大小,用western blot检测瘤组织PKR、真核细胞蛋白合成启动因子eIF2α及其磷酸化(p-PKR、p-eIF2α)蛋白质水平。3H-亮氨酸掺入实验检测细胞总蛋白质合成水平。结果RV-40AS作用组裸鼠的瘤体明显小于对照组,瘤重抑制率为61.9%(P<0.05);p-PKR和p-eIF2α蛋白质表达水平有不同程度上调(88%和53%)。3H-亮氨酸掺入实验显示RV-40AS组细胞总蛋白质合成受抑。结论逆转录病毒RV-40AS能激活PKR从而抑制白血病K562细胞移植瘤裸鼠模型的瘤体生长,激活PKR可作为白血病治疗的又一策略。
- 曾建明冯文莉赵世巧白卫君王小中温健萍曹唯希罗云萍涂植光黄宗干
- 关键词：动物实验逆转录病毒载体K562细胞
- GATA结合蛋白3在淋巴细胞肿瘤中的研究进展
- 2018年
- 转录因子GATA结合蛋白3(GATA3)在淋巴细胞分化中发挥重要的调控作用,可促进原始T细胞向TH2方向分化,抑制B细胞或髓系方向的分化。GATA3的基因突变与表达异常可影响肿瘤微环境、信号传导通路的异常效应,继而推动淋巴细胞肿瘤的发生与发展。GATA3的表达水平可作为外周T细胞淋巴瘤的预后预测因子。GATA3相关靶向药物的研发具有广阔前景。
- 王孜石大雨周道斌罗云萍钟定荣张薇
- 关键词：TH2细胞T细胞淋巴瘤血液系统肿瘤
- gp73在小鼠肝纤维化肝组织中的表达及机制被引量：8
- 2020年
- 目的在小鼠肝组织中探讨高尔基体跨膜糖蛋白73(gp73)在肝纤维化进程中的变化及机制。方法腹腔注射CCl4构建C57BL/6J小鼠肝纤维化模型;用ELISA检测小鼠血清中gp73的水平;用免疫组织化学染色检测肝组织内gp73的表达;用密度梯度离心法分离肝星状细胞(HSC)并检测其中gp73的表达;用免疫组织化学染色法检测肝组织中胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)的表达;接下来分别转染IGF2BP3过表达与敲低的质粒,用RT-PCR检测GP73蛋白的编码基因GOLM1的表达变化;流式细胞计量术检测基因敲除鼠肝纤维化模型中HSC内gp73的表达。结果在肝纤维化模型的小鼠血清(P<0.01)、肝组织(P<0.05)及原代HSC(P<0.001)中gp73蛋白表达水平均升高,同时组织中的IGF2BP3蛋白表达也升高(P<0.05)。细胞系中转入IGF2BP3的过表达及敲低质粒后,成功过表达IGF2BP3(P<0.001)和敲低(P<0.01),GOLM1的表达也随之上调(P<0.001)和下调(P<0.01)。随后在IGF2BP3敲除鼠的肝纤维化模型的HSC中检测发现gp73表达降低(P<0.01)。结论在CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型中,由HSC表达的gp73蛋白水平升高,而RNA结合蛋白IGF2BP3是促进其表达的潜在调控因素。
- 马玲玉甄一宁罗云萍段昭君
- 关键词：肝纤维化GP73
- 器官特异性的乳腺癌转移模型及其建立方法和应用
- 本申请涉及器官特异性的乳腺癌转移模型及其建立方法和应用。具体而言，提供了一种肝特异性转移型乳腺癌细胞，所述细胞源自4T07细胞系。相较于4T07细胞系，本申请的转移型乳腺癌细胞具有更高的迁移和转移能力，可用于建立乳腺癌转...
- 罗云萍段昭君王子辕
- 肿瘤微环境中乳酸对巨噬细胞表型极化和功能的影响被引量：10
- 2014年
- 目的研究肿瘤微环境中乳酸对巨噬细胞表型极化和功能的影响。方法在Balb/c小鼠乳腺处接种乳腺癌细胞4T1,研磨肿瘤组织后测其乳酸浓度。以不同浓度乳酸处理RAW264.7巨噬细胞,用流式细胞术、RT-PCR和Western blot检测M1、M2型巨噬细胞的标志分子和NFκB P50/P65。蛋白芯片检测RAW细胞分泌的细胞因子。流式细胞术检测RAW细胞吞噬功能和抗原递呈功能。结果小鼠乳腺癌组织的乳酸浓度高于正常乳腺组织(P<0.05)。15 mmol/L浓度的乳酸可显著上调RAW细胞M2型标志分子的表达(P<0.05),下调M1标志分子的表达(P<0.05),使RAW细胞分泌的M1型细胞因子明显减少(P<0.05),同时使磷酸化NFκB P65降低(P<0.05)。乳酸对RAW细胞的吞噬功能没有明显的影响,但减弱其抗原递呈功能(P<0.05)。结论在乳酸的作用下,RAW巨噬细胞表型向M2型转变,抗原递呈功能减弱,NFκB参与调控乳酸对巨噬细胞的作用。提示肿瘤微环境中的乳酸对抗肿瘤免疫有较大影响。
- 刘妍陈翀曹峰琦白丽鹏罗云萍
- 关键词：肿瘤微环境乳腺癌乳酸巨噬细胞
- 自身淬灭荧光定量PCR检测慢性粒细胞白血病bcr/abl mRNA
- 2007年
- 目的利用自身淬灭探针技术建立一种能检测慢性粒细胞白血病（CML）bcr／abl融合基因mRNA的实时荧光定量PCR方法，为CML的诊断、疗效观察以及微量残留白血病（MRD）的监测提供有效手段。方法用逆转录PCR方法（RT—PCR）扩增K562细胞的bcr／abl融合基因，A-T克隆法构建定量标准模板；设计自身淬灭荧光引物（探针），建立自身淬灭荧光定量逆转录PCR方法（FQ—RT—PCR），并对该方法的线性检测范围、灵敏度、重复性、稳定性进行检测；然后检测临床白血病患者骨髓标本bcr／abl mRNA。结果建立的FQ—RT—PCR方法可检测10copies／μl的bcr／abl重组质粒，并能从10^5个正常细胞中检出1个白血病细胞，该方法的批内、批间变异系数（CV）分别为2．1％、6．1％，线性检测范围为10^2-10^9copies／μl。25例CML患者bcr／abl融合基因mRNA表达量中位数为4．50×10^4[（0．45—89．00）×10^4]copies／μg RNA，其中11例慢性期初诊患者bcr／abl mRNA表达量中位数为5．45×10^4[（2．95—19．30）×10^4]copies／μg RNA，6例急变期患者bcr／abl mRNA表达量中位数为13．00×10^4[（4．10～89．00）×10^4]copies／μg RNA，8例慢性期治疗后复查患者bcr／abl mRNA表达量中位数为2．35×10^4[（0．45—5．12）×10^4]copies／μg RNA，CML急变期患者bcr／abl融合基因表达水平与慢性期患者之间差异有统计学意义（q=3．41，P〈0．05）。PCR产物经电泳分析，其中21例CML患者为b3a2型，4例CML患者为b2a2型；3例急性淋巴细胞白血病（ALL）患者中，1例有bcr／abl mRNA表达，为b2a2型。结论所建立的基于自身淬灭探针技术的实时荧光定量PCR检测方法灵敏、特异、重复性好，结果用拷贝数表示，准确可靠，利于标准统一。可广泛用于CML的诊断、疗效观察以及MRD的监测。
- 彭辉冯文莉王小中曾建明肖青潘健曹唯希罗云萍黄宗干
- 关键词：聚合酶链反应BCR/ABL融合基因
- 健康人外周血树突状细胞的体外培养扩增及其CDla等表面分子的表达分析被引量：2
- 2003年
- 树突状细胞(DC)是一种功能最强的抗原提呈细胞,其最显著的特征是能够刺激初始型T细胞增殖,而B细胞和巨噬细胞只能刺激记忆型或被活化的T细胞,因此DC在免疫应答诱导中起重要作用.
- 李用国陈敏梁增伟许红梅罗云萍任红
- 关键词：健康人外周血树突状细胞体外培养
