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罗金: 作品数：94 被引量：113H指数：7; 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金甘肃省科技重大专项计划国家肉牛牦牛产业技术体系项目更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学环境科学与工程更多>>

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伊氏锥虫PFR2蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备: 2022年; 为了探究伊氏锥虫副鞭毛杆蛋白2(paraflagellar rod protein 2,PFR2)的分子特征和免疫特征,利用PCR扩增伊氏锥虫PFR2基因,将扩增产物插入p QE-80L载体,经原核表达后,将纯化后的重组蛋白免疫小鼠,制备多克隆抗体,利用Western-blot鉴定反应原性。结果表明,PFR2基因大小为1803 bp,编码含601个氨基酸残基的蛋白质,SDS-PAGE电泳显示该蛋白大小约为66 ku,主要以包涵体的形式表达。用间接ELISA方法检测小鼠抗PFR2多克隆抗体的效价为1∶25600;Western-blot检测显示重组PFR2蛋白具有较好的反应原性。本研究为进一步研究伊氏锥虫PFR2蛋白的功能奠定了基础。; 罗文蔚罗金任巧云刘文阁王奇林张高峰刁沛文曹润来陈则宇马永华刘光远; 关键词：伊氏锥虫原核表达多克隆抗体

Bantam在长角血蜱不同变态发育时期表达谱及代谢通路分析: 为进一步研究Bantam与长角血蜱生长发育间的关系奠定基础.本研究参考miRBase数据库中Bantam(登录号：MI0012259)序列,设计特异性引物,RT：PCR方法获得Bantam序列并进行生物信息学分析.利用q...; 罗金刘光远谢俊仁田占成袁晓松王芳芳郭锦霞王素艳; 关键词：变态发育 MICRORNA 表达谱

4D8及Rs86基因协同作用对残缘璃眼蜱发育及环形泰勒虫传播能力的影响: 目的:蜱保护性蛋白在蜱疫苗的发展以及蜱相关病原的感染方面得到了广泛使用。因此,研究残缘璃眼蜱4D8及Rs86基因协同作用下的蜱发育及对环形泰勒虫传播能力的影响尤为重要。方法:本研究采用q PCR方法对残缘璃眼蜱4D8及R...; 罗金郝佳伟吴锋陈泽任巧云殷宏罗建勋刘光远; 关键词：环形泰勒虫

长角血蜱MESK基因的克隆及其生物学特性分析: 2013年; 为进一步了解MESK基因在长角血蜱免疫应答中的作用,克隆了长角血蜱MESK基因全长序列,采用有关生物信息学软件对该基因序列的一级结构进行了分析;构建了真核表达载体pEGFP-C1-MESK,采用脂质体转染法在HEK293细胞及HeLa细胞中对其进行了表达。48h后对细胞进行裂解,用兔抗长角血蜱阳性血清与表达出的重组蛋白进行反应,以检测重组蛋白的免疫活性。结果显示,MESK基因全长为1 426bp,包括1个1 185bp的开放阅读框。该基因含有5个N-糖基化位点、5个豆蔻酰化位点、9个酪氨酸蛋白Ⅱ激酶磷酸化位点、1个酪氨酸蛋白激酶位点、2个cAMP和cGMP依赖性蛋白激酶磷酸化位点、1个蛋白磷酸激酶C磷酸化位点。SDS-PAGE分析及Western-blot分析表明,表达出的重组蛋白的分子质量约为71ku,且以与兔抗长角血蜱阳性血清反应,免疫原性良好。结果表明,MESK基因可以作为一种重要的分子标记参与蜱分类的研究,在作为候选抗蜱疫苗的研究中具有重要的开发价值。; 赵波刘光远罗金张萍田占成谢俊仁田美媛王芳芳袁小松; 关键词：长角血蜱生物信息学克隆真核表达

微小扇头蜱不同发育阶段miRNA的动态分析: 尽管一些microRNA表达谱的研究已经在长角血蜱(Haemaphysalis longicornis)唾液腺以及微小扇头蜱(Rhipisephalus(Boophilus) microplus)美国株中得到了一定的研究...; 罗金刘光远谢俊仁田占成袁晓松王芳芳郭锦霞王素艳; 关键词：MICRORNA 高通量测序发育阶段

一种检测马泰勒虫的引物对及检测试剂盒: 本发明公开快速鉴定马属动物是否感染马泰勒虫的引物对及检测试剂盒。本发明的用于检测马泰勒虫的引物对的核苷酸序列分别为：SEQ ID No.1和SEQ ID No.2；本发明的检测马泰勒虫的试剂盒内包括有前述引物对。本发明利...; 刘光远罗金谢俊仁田占成殷宏罗建勋陈泽任巧月; 文献传递

长角血蜱MLP基因的克隆、表达及反应原性分析: 目的对长角血蜱饥饿雌性成蜱cDNA表达文库进行免疫学筛选得到部分MLP基因序列,同源性比对发现该基因与肩突硬蜱MLP基因的核苷酸序列相似性达87.9%,相关研究文献表明MLP能够参与细胞骨架形成、细胞分化、基因表达调控及...; 沈辉柴慧萍刘光远田占成谢俊仁罗金; 文献传递

用环介导恒温扩增技术检测马梨形虫病方法的构建: 目的:本研究利用环介导恒温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),以相对保守的马梨形虫18S rRNA基因为靶基因,分别建立鉴别马泰勒虫和驽巴贝斯虫的LAMP检...; 谢俊仁田占成罗金沈辉刘光远; 文献传递

几种蜱MLP基因的表达及其表达产物反应原性的分析: 2012年; 通过对饥饿的长角血蜱雌性成蜱cDNA表达文库中筛选到的未知基因进行5′RACE扩增,以期获得长角血蜱MLP基因全长cDNA序列。设计通用引物,采用PCR方法分别从青海血蜱、麻点璃眼蜱、森林革蜱、微小牛蜱及小亚璃眼蜱中对MLP基因完整的开放阅读框进行了扩增,并将其克隆到表达载体pGEX-4T-1中,构建重组质粒,转入BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,分别用SDS-PAGE和Western-blot分析目的蛋白的表达情况和反应原性。结果表明,成功扩增了长角血蜱的MLP基因全长序列及多个蜱种的MLP基因开放阅读框序列,体外高效诱导表达了约39.2ku的不同蜱的MLP重组蛋白。Western-blot结果表明,长角血蜱的MLP重组蛋白具有很强的反应原性,且不同蜱的重组蛋白间具有很强的交叉反应性。; 沈辉刘光远柴慧萍田占成谢俊仁罗金张萍田美媛殷宏; 关键词：MLP 原核表达