胡玉琴
- 作品数：3 被引量：21H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 含苏云金芽孢杆菌aiiA基因的重组荧光假单胞菌的构建及对软腐病的抗病活性被引量：11
- 2006年
- aiiA基因编码的AiiA蛋白能降解细菌群体感应系统中的信号分子N_酰基高丝氨酸内酯AHLs,从而减弱致病菌对植物的危害。本文将aiiA基因转入到植物根际促生细菌荧光假单胞菌P303中,构建成防治植物细菌和真菌病害的工程菌P303-ss10。通过PCR和RT-PCR鉴定,均获得0.8 kb的目的片断,表明aiiA基因已经导入P303中。室内平板抑菌试验表明,该工程菌保留了出发菌株对多种植物病原真菌的抑制作用;室内离体试验表明该工程菌对马铃薯软腐病和大白菜软腐病都有一定的抑制作用。
- 张霞胡玉琴贾振华张杰马宏宋水山
- 关键词：AIIA基因
- 对鳞翅目害虫高毒力的Bt cry1 Aa基因的分离克隆及表达被引量：7
- 2003年
- Bt菌Ly30株是我国自行分离的对多种害虫具有高毒力的苏云金芽孢杆菌 ,经CAPS (cleavedamplifiedpolymorphicse quences)系统鉴定 ,它含有cry1Aa基因。以全长基因PCR产物的粘端定向克隆的方法 ,设计一对特异引物 ,分别引入NcoⅠ和BamHⅠ NcoⅠ酶切位点。以Ly30质粒DNA为模板扩增cry1Aa全长基因 ,与表达载体pKK2 33 2相应酶切产物连接 ,转化大肠杆菌 ,获得含有cry1Aa基因重组质粒pKKLy1Aa。完成了该基因的亚克隆和序列测定 ,结果表明 ,该基因的编码区为 3 5 31bp ,编码蛋白分子量为 133 2kD ,含 1176个氨基酸 ,等电点pI为 4 99。该基因序列已在GenBank中登记注册 ,登录号为AF3842 11,并被国际Bt杀虫晶体蛋白基因命名委员会正式命名为cry1Aa12。对重组菌KKLy1Aa进行诱导表达研究。在 0 6mmol LIPTG、 37℃、 8h培养条件下 ,该基因获得高效表达 ,SDS PAGE电泳检测到明显的 133 2kD蛋白带。室内生测结果表明 ,Cry1Aa蛋白对不同的小菜蛾品系均有较高的杀虫活性 ,其LC50 值分别为 0 2 0 3μg mL和 0 5 5 4μg mL。
- 姚江张杰陈中义宋福平李长友胡玉琴黄大昉
- 关键词：苏云金芽孢杆菌克隆杀虫活性
