董巨莹 作品数:14 被引量:42 H指数:4 供职机构: 厦门大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中国博士后科学基金 福建省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
酪氨酸激酶EphB2受体N端球状结构域的表达及纯化 2000年 根据酪氨酸激酶EphB2受体的碱基序列 ,用PCR方法扩增其结合配体的关键结构域N端球状区 ,定向克隆到融合表达质粒载体rRSETA中 ,转化大肠杆菌JM10 9(DE3)。阳性克隆经IPTG诱导 ,由T7启动子调控表达了氨基端带 6个连续组氨酸残基的融合蛋白。电泳分析表明 ,表达的融合蛋白主要以包含体的形式存在 ,约占细菌总蛋白的 14%。Western印迹确证 ,利用Ni NTA金属螯合亲和色谱法在变性条件下对表达的蛋白进行纯化 ,得到纯度 95 张晓光 韩炯 董巨莹 刘新平 药立波 苏成芝关键词:原核表达 蓖麻毒素诱导U937细胞分泌IL-6和IL-8的作用 被引量:1 2000年 目的 :进一步研究蓖麻毒素是否具有诱生U937细胞分泌细胞因子的作用。方法 :采用MTT法检测了蓖麻毒素对U937细胞的毒性 ,并采用ELISA法测定细胞培养上清中的IL 6和IL 8。结果 :蓖麻毒素对U937细胞的毒性具有时间效应和剂量效应。随着作用时间的延长 ,诱生 2种细胞因子的量逐渐增加 ;随蓖麻毒素剂量的增加 ,诱生 2种细胞因子的量均减少。结论 :蓖麻毒素诱导 2种细胞因子的产生为其抗癌应用或其它作用提供理论依据。 董巨莹 张小光 赵英 药立波 苏成芝关键词:蓖麻毒素 U937细胞 IL-6 IL-8 低分子量GTP-结合蛋白Ras超家族研究进展 被引量:2 2000年 Ras蛋白超家族结构上均由190个左右的氨基酸残基构成,仪有一个GTP酶结构域。Ras及相关蛋白在众多的细胞调节过程中起着关键作用,包括细胞增殖与分化,胞内胞液间运输,胞内氧化酶的产生,细胞骨架的调控以及胞外信息的跨膜传递等分子开关作用。 董巨莹 药立波 苏成芝关键词:RAS EphB2受体N端Ig类似区基因的克隆和序列测定 被引量:3 2000年 张晓光 董巨莹 茹晓荣 药立波 刘新平 苏成芝关键词:EPHB2 基因克隆 酪氨酸蛋白激酶 PCR 蓖麻毒素诱导肝癌细胞生成一氧化氮合酶——免疫组织化学研究 2001年 应用免疫组织化学方法观察不同浓度蓖麻毒素作用于肝癌细胞不同时间后 ,对 i NOS的诱导作用。结果显示 ,未受蓖麻毒素作用的肝癌细胞胞浆 i NOS呈阴性反应 ;当受到蓖麻毒素诱导后 ,才能在胞浆内合成。不同浓度的蓖麻毒素对肝癌细胞诱导 i NOS的产生没有明显差别。而蓖麻毒素诱导 i NOS的表达有明显的时间依赖性 ,2 h没有表达 ,4h才出现 ,随着时间的延长 ,到 8h时仍然有明显的表达。由于 i NOS的合成涉及基因转录、蛋白质合成等过程 ,故需诱导数小时后显示酶活性 ,但一经诱导生成 ,酶活性持续时间长。蓖麻毒素诱导 i 董巨莹 彭宣宪关键词:蓖麻毒素 肝癌细胞 一氧化氮合酶 免疫组织化学 蓖麻毒素糖链及其信号传导途径的研究 为了蓖麻毒素及A、B糖链与诱导激酶活化的相关性,同时也为了验证单独B链是否有作用,以凝集素作对照,同时设空白对照进行了研究.该文研究表明,蓖麻毒素A链单独不能进入细胞,所以不能激活蛋白激酶.而B链和凝集素虽然可以作用于细... 董巨莹关键词:蓖麻毒素 糖链 信号传导 文献传递 蓖麻毒素及其修饰物对U937细胞IL-1β和TNF-α的诱导作用 被引量:5 1999年 蓖麻毒素(ricin) 的抗癌作用是,借助于其抑制细胞的蛋白质合成而导致细胞死亡的毒性作用,但其缺点是其分子中的B 链含有半乳糖结合位点, 可非特异性的与真核细胞结合。本研究通过采用双功能剂SPDP 修饰ricin 后,可达到部分或完全破坏ricin 分子结构中的半乳糖结合位点。另外,用MTT 法比较了修饰后的ricin 与未修饰ricin的细胞毒性,同时检测并比较了两者对细胞因子TNFα和IL1β的诱生作用。结果表明,修饰后的ricin 与未修饰的ricin 相比较,两者对U937 细胞的毒性在时间效应和剂量效应上没有显著性差异。修饰后的ricin 诱生TNFα的量比未修饰的ricin 多,且时间早;而对于诱生IL1β来说,在24h 前两者差别不大,在48h 时,修饰的ricin 则明显高于未修饰的ricin 。提示ricin 经SPDP 修饰后,毒性改变不大,但其诱生细胞因子TNFα和IL1β的量则高于未修饰的ricin 。 董巨莹 李琦 王文学 药立波 苏成芝关键词:蓖麻毒素 修饰物 IL-1Β 抗癌作用 非受体蛋白酪氨酸激酶Tec家族的研究进展 被引量:1 1999年 Tec家族是近几年国外研究较活跃的胞浆内酪氨酸蛋白激酶分子,它们主要在淋巴细胞和髓样细胞中表达。该家族成员有Btk、Itk/Tsk/Emt、Tec、Txk和Bmx,其结构具有高度同源性,均由PH结构域、SH3、SH2及激酶结构域组成,其N端缺乏疏水性... 董巨莹 药立波 苏成芝关键词:酪氨酸蛋白激酶 结构特点 蓖麻毒素对肝癌细胞核转录因子NF-κB的激活作用 被引量:3 2000年 目的:探讨蓖麻毒素细胞毒性作用的分子机理。方法:采用免疫细胞化学和 Western blot等方法观察蓖麻毒素作用于人肝癌细胞后,引起核转录因子 NFκ B的变化。结果: 100 pmol/L的蓖麻毒素处理细胞后,随着时间的延长( 30 min、 1 h和 2 h), NFκ B由胞浆逐渐向核内转移, 2 h后胞浆和胞核的着色均变浅,表明 NFκ B的活性略有减弱;随着蓖麻毒素浓度的增大,核内棕色颗粒也有加深的趋势。结论:本结果表明蓖麻毒素通过其糖配基与肝癌细胞相互作用后,能启动核转录因子 NFκ B的表达。 NFκ B激活在其抗癌作用中起着重要作用。 董巨莹 彭宣宪 药立波关键词:蓖麻毒素 肝癌细胞 NF-ΚB 蓖麻毒素及其修饰物在肝癌细胞膜上的分布 被引量:1 1999年 目的: 探讨3-(α-吡啶二硫基)丙酸N-羟基琥珀酰亚胺基酯(SPDP)修饰的蓖麻毒素抗肝癌活性及其机制. 方法:用流式细胞仪分析蓖麻毒素及其修饰物在肝癌细胞膜上的分布变化. 结果: 修饰的蓖麻毒素在肝癌细胞上的分布比未修饰的蓖麻毒素明显增多. 结论: SPDP修饰后的蓖麻毒素对肝癌细胞的亲和力增加, 提示蓖麻毒素用SPDP修饰可能是改进其抗癌作用的一个有价值的途径. 董巨莹 曹云新 张晓光 王文学 药立波 苏成芝关键词:肝癌 蓖麻毒素 修饰物 药代动力学 全文增补中