董辉
- 作品数：216 被引量：380H指数：11
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家科技基础条件平台建设计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原1相互作用蛋白的筛选及鉴定
- 韩红玉薛璞翟颀李聪朱雪龙董辉朱顺海赵其平黄兵
- 不同保种时间及复苏代次弓形虫对小鼠致病性研究被引量：2
- 2011年
- 为了评价液氮冻存不同时间后及在小鼠体内复苏不同代次的弓形虫速殖子感染小鼠致病性的研究,通过比较感染处理后的弓形虫小鼠健康及存活状况,筛选出更佳的液氮冻存时间和合适复苏代次,对于建立小鼠急性弓形虫感染模型及弓形虫致病机理等具有重要意义。通过腹腔注射不同保种时间（2、4、6月）和不同复苏代次（1、2、3代）弓形虫速殖子,观察感染后小鼠健康状况及死亡情况,比较各种条件下弓形虫的致病性。结果表明,液氮冻存半年后经小鼠接种4 000个/鼠~16 000个/鼠,传代2代~3代后能得到毒力稳定的虫体,且达到最佳复苏状态。不同冻存时间对弓形虫速殖子的致病性有差异,为弓形虫急性感染模型及后续的药物筛选和致病机理研究奠定了一定的基础。
- 曾艳波朱顺海韩红玉董辉姜连连赵其平马卫娇程军黄兵
- 关键词：弓形虫速殖子
- 柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原2特性与功能初步分析
- 2022年
- 为了研究柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原2(EtAMA2)的分子特性与功能,利用间接免疫荧光试验、入侵抑制试验、实时荧光定量PCR、Western blot以及分泌试验等方法分析其生物学特性。结果发现EtAMA2蛋白具一个跨膜区和信号肽,在子孢子和第二代裂殖子中的转录水平明显高于未孢子化卵囊和孢子化卵囊,但蛋白仅在第二代裂殖子中被检测到;EtAMA2在游离的子孢子和第二代裂殖子中主要分布在胞质,在胞内的子孢子中主要分布在顶端。EtAMA2是一种微线体分泌蛋白,其分泌受到温度的调控。抗EtAMA2特异性抗体对子孢子入侵细胞没有明显抑制作用;将EtAMA2转染至DF-1细胞后,子孢子入侵率明显提高。本研究结果为深入研究 EtAMA2 在球虫入侵过程中的功能与作用机制奠定基础。
- 王青杰朱顺海赵其平黄兵韩红玉于钰梁珊珊余水兰王海霞董辉
- 关键词：球虫柔嫩艾美耳球虫入侵
- 柔嫩艾美耳球虫子孢子高表达新基因的克隆、表达及分析被引量：3
- 2010年
- 为克隆和研究柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)新基因,本研究在所获得的ESTs序列的基础上,应用RACE技术克隆获得了1个在子孢子阶段高表达新基因的全长cDNA序列(GU553107),命名为ZB7-C11,该基因全长1439bp,ORF为525bp,编码174个氨基酸,预测表达蛋白的分子量约为18.7ku。Real-timePCR对E.tenella不同发育阶段(未孢子化卵囊、孢子化卵囊、子孢子和裂殖子)表达量进行分析显示,该基因在子孢子阶段的表达高于其它阶段。另外,将ZB7-C11克隆于pGEX-4T中构建重组质粒pGEX-4T-C11,转化大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达6h后其表达量最高,并且重组蛋白分子量约44.7ku大部分以可溶性存在。Westernblot分析显示该重组蛋白可被抗E.tenella的多克隆抗血清识别,表明该蛋白具有较好的反应原性。该结果为进一步研究该基因的生物学功能奠定了基础。
- 李洋韩红玉董辉赵其平姜连连朱顺海郭涛平宪卿马卫娇曾艳波程军黄兵
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫子孢子克隆
- 柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶基因及应用
- 本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫基因，所述基因编码钙依赖蛋白激酶，其核苷酸序列包含：编码SEQ ID NO.1氨基酸序列的DNA序列，或编码SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中缺失、添加、插入或取代一个或多个氨基酸所得到...
- 董辉韩红玉黄兵李洋姜连连赵其平朱顺海马卫娇程军曾艳波
- 毒害艾美耳球虫晚熟系选育及其生物学特性研究初报
- 通过单卵巢分离法从鸡球虫混合卵囊中分离出一株毒害艾美耳球虫(E.necatrix),将其命名为毒害艾美耳球虫北京株,记为BJ001107.以剂量为1200~20000个/只的毒害艾美耳球虫北京株(即中熟系)卵囊感染3日龄...
- 董辉
- 关键词：毒害艾美耳球虫选育生物学特性
- 文献传递
- 利用BiFC技术研究柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原1结构域Ⅰ与棒状体颈部蛋白2互作关系被引量：3
- 2019年
- 为了验证柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)顶膜抗原1结构域Ⅰ(apical membrance antigen 1 domain I,E tAMA1-DⅠ)与棒状体颈部蛋白2(rhoptry neck protein 2,EtRON2)的互作关系,以柔嫩艾美耳球虫子孢子cDNA为模板,PCR扩增出492 bp的E tAMA1-DⅠ片段和1395 bp的E tRON2片段,并与pGEM-T-easy载体连接构建相应重组质粒。获得的阳性重组质粒及双分子荧光互补技术的真核表达载体pBiFC-VN155和pBiFC-VC155用E c oRⅠ和B g I II进行双酶切,将E tAMA1-DⅠ、E tRON2分别与pBiFC-VN155、pBiFC-VC155连接,构建真核重组质粒pBiFC-VN155-E tAMA1-DⅠ和pBiFC-VC155-E tRON2。将2个真核重组质粒分别转染BHK细胞进行表达,经间接免疫荧光鉴定,可在BHK细胞中成功表达。将2个真核重组质粒共转染至BHK细胞中,同时将pBiFC-bJunVN155和pBiFC-bFos(deltaZIP)VC155、pBiFC-bJunVN155和pBiFC-bFos(delta)VC155共转染至细胞中分别作为阳性和阴性对照组。BiFC结果发现真核重组质粒共转染组和阳性对照组的BHK细胞均产生绿色荧光,而阴性对照组无荧光,表明E tAMA1-DⅠ与E tRON2蛋白之间存在互作关系。本研究结果为深入研究E tAMA1及E tRON2在球虫入侵过程中的功能与作用机制奠定基础。
- 严茗黄兵赵其平韩红玉朱顺海赵宗平陈婷吕凌董辉
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫
- 柔嫩艾美耳球虫NADP特异性谷氨酸脱氢酶特性分析被引量：4
- 2019年
- 为了研究柔嫩艾美耳球虫NADP特异性谷氨酸脱氢酶(EtNADP-GDH)的分子特性,对该基因进行了克隆和生物信息学分析,利用间接免疫荧光定位、体外入侵抑制、实时荧光定量PCR、Western-blot和体外酶活性检测等方法分析其生物学特性。结果显示,成功获得了EtNADP-GDH基因,该基因编码的蛋白富含包括NAD结合位点在内的多种功能位点。该蛋白主要分布在虫体的表面和细胞质中,抗rENADP-GDH多克隆抗体能抑制子孢子入侵DF-1细胞,抑制率约为45%,表明其参与了虫体入侵宿主细胞。荧光定量PCR结果显示,该基因在未孢子化卵囊阶段的转录水平最高;转录、翻译水平分析发现,与敏感株相比,2个耐药株(地克珠利耐药株和马杜拉霉素耐药株)中EtNADP-GDH的转录水平显著提高,而翻译水平无明显差异;酶活性分析结果显示,耐药株和敏感株差异不明显。结果表明,该蛋白可能对虫体在宿主细胞内的生长发育起作用并参与了子孢子入侵宿主细胞的过程。
- 刘桂玲朱顺海赵其平董辉黄兵赵焕之李志行王璐韩红玉
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫耐药性
- 堆形艾美耳球虫早熟株选育及相关生物学特性研究
- 目的为了选育堆形艾美耳球虫早熟株和观测其生物学特性。方法运用Jeffers创立的艾美耳属球虫早熟株选育方法,对实验室保存的堆形艾美耳球虫(Eimeria acervulina)进行连续传代早熟选育,并对获得的早熟株与母株...
- 李玉剑董辉韩静芳岳城韩红玉赵其平姜连连樊玉娟姚倩颜彦黄兵
- 关键词：球虫堆形艾美耳球虫早熟株生物学特性
- 文献传递
- 磺胺氯吡嗪处理弓形虫速殖子抑制消减文库的构建和初步分析
- 为了研究和探索磺胺氯吡嗪抗弓形虫的作用机理,构建磺胺氯吡嗪处理弓形虫的抑制性消减文库。将刚地弓形虫(Toxoplasma gondii) RH株速殖子腹腔注射(10 000个/只鼠)感染昆明系小鼠,大量收集并纯化速殖子,...
- 曾艳波孔春林韩红玉黄兵董辉姜连连赵其平朱顺海马卫娇程军李婷
