蔡韵
- 作品数：5 被引量：24H指数：3
- 供职机构：复旦大学公共卫生学院公共卫生安全教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会重点学科基金上海市科学技术委员会资助项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 流感监测中流感病毒优势株在犬肾细胞系(MDCK细胞模型中竞争性复制的意义被引量：1
- 2013年
- 目的通过流感病毒优势株在犬肾细胞系(Madin-Daby canine kidney cells,MDCK)细胞中竞争性复制,探讨季节性流感流行株感染、复制能力强弱对主导流行株的贡献。方法在对2011年至2012年上海市闵行区季节性流感监测中,监测到流感样病例775例,确诊流感病例119例。选取2012年1月至2月流感病例中分离的3株B型和3株A/H3N2亚型流感流行株,两两交叉配对成9组,共同感染MDCK,细胞培养上清液抽提核酸,mRT-PCR扩增特异性产物。结果有7组共感染组合中A/H3N2(210bp)电泳条带逐渐变强、B型条带(390bp)逐渐变弱至第3代完全消失,2组中A/H3N2与B的条带至第3代均明亮。结论流感病毒共感染竞争性复制结果与当时人群流感监测中优势株转换相符。该方法为探讨可能引起主导流行株在人群中变迁的原因提供了研究思路。
- 汪千力居丽雯蒋露芳申惠国熊海燕朱雯蔡韵姜庆五
- 关键词：流感监测B型流感病毒共感染
- 混合细胞瓶对临床标本中流行性感冒病毒和肠道病毒的分离检测
- 2012年
- 目的比较犬。肾细胞系（MDCK）、人喉表皮癌细胞（Hep-2）和非洲绿猴肾细胞（Vero）制备的MHV混合细胞与相应单一敏感细胞株对流行性感冒（流感）病毒、肠道病毒的分离结果。方法流感样患者咽拭子标本接种MHV混合细胞和MDCK细胞，手足口病患儿咽拭子或粪标本接种MHV混合细胞和Veto细胞，观察病毒致细胞病变效应（CPE），采用多重反转录一聚合酶链反应（mRT-PCR）检测甲、乙型流感病毒和肠道病毒。结果MDCK和Vero细胞的CPE较MHV混合细胞明显。138份流感病毒接种MHV混合细胞，分离出34株流感病毒，分离率为24．6％；MDCK细胞分离出流感病毒39株，分离率为28．3％。MHV混合细胞与MDCK细胞流感病毒分离率比较，差异无统计学意义（X2=1．92，P〉0．05）。32株肠道病毒接种MHV混合细胞，分离出肠道病毒9株，分离率为28．1％；Vero细胞分离出12株肠道病毒，分离率为37．5％。MHV混合细胞与Vero细胞肠道病毒分离率比较，差异无统计学意义（X2=3．00，P〉0．05）。结论MHV混合细胞CPE不如单一细胞易于观察；MHV混合细胞适用于生物性突发公共卫生事件中，可分离培养临床标本中甲型、乙型流感病毒和表现为呼吸道症状的肠道病毒。
- 汪千力熊海燕申惠国居丽雯蒋露芳蔡韵姜庆五
- 关键词：正黏病毒科肠道病毒细胞分离
- 介质表面的肠道病毒71型在不同气候条件下存活情况调查被引量：8
- 2012年
- 目的了解介质表面污染的肠道病毒71型（EV71）在不同温、湿度条件下的存活能力。方法将滴度为1×10^5半数组织培养感染剂量（TCID50）的EV71株均匀滴加在灭菌的塑料、橡胶、木块和布片介质表面，置人不同温、湿度气候条件的人工气候箱中，一定时间后回收介质表面病毒，回收液接种Vero细胞，观察致细胞病变效应（CPE）；每日监测不同气候条件下介质表面病毒存活情况。结果病毒在4种介质表面回收率为89％～93％；暴露在不同温、湿度条件下介质表面的EV71存活时间不同，在20℃、湿度80％的气候条件下病毒存活时间最长；塑料表面的病毒滴度在24h后下降lgTCID50值约为4，布片和木块表面的病毒滴度在72h后下降lgTCID50值约为4．5，72h后至少下降lgTCID50值为3．89。结论介质表面污染EV71存活时间受温、湿度气候条件影响，模拟的4种气候条件中，温度低、湿度高的条件病毒存活时间长；EV71在布片、木块表面的存活能力强于合成材质塑料表面。
- 蔡韵蒋露芳史妍李玉欣汪千力居丽雯姜庆五
- 关键词：手足口病肠道病毒A型
- 2011年上海地区轻、重症手足口病患者肠道病毒71型分离株VP1、VP4区的基因特征分析被引量：10
- 2013年
- 目的了解2011年上海地区手足口病重症和轻症患儿中肠道病毒71型（EV71）分离株VP1、VP4区的基因特征。方法对来自2011年重症与轻症手足口病患儿的各5株EV71分离株进行VP1、VP4全序列的RT—PCR扩增测序，并与美国国立生物技术信息中心公布的EV71A、B、C基因型代表株进行核苷酸、氨基酸比对分析和系统进化分析。结果轻、重症患儿的EV71分离株之间VP1基因的核苷酸同源性为96．0％～98．1％；VP4基因的核苷酸同源性为93．7％～99．5％。轻、重症患儿的EV71分离株与C基因型代表株比较接近，VP1区核苷酸同源性分别为86．9％～98．2％、87．4％～98．5％，VP4区核苷酸同源性分别为85．5％～100．0％、84．5％～99．5％，其中与2008年安徽省阜阳市的EV71流行株（C4亚型）VP1区核苷酸同源性分别可达97．0％～98．2％、97．9％～98．5％，VP4区核苷酸同源性分别可达96．1％～100．0％、97．1％～99．5％。3例重症患儿分离株在VP1和VP4的天冬酰胺（N）282丝氨酸（S）、苏氨酸（T）7丙氨酸（A）同时发生变异。结论2011年上海地区10例轻、重症手足口病患儿中分离的EV71流行株均属C基因型的C4亚型；3例重症患儿分离株在VP1和VP4的N282S、T7A同时发生变异。
- 蔡韵申惠国李治俊居丽雯蒋露芳熊海燕姜庆五
- 关键词：手足口病
- MDCK、HEp-2、Vero细胞混合冻存适用于分离培养常见病毒研究被引量：5
- 2012年
- 目的建立犬肾细胞(MDCK)、人喉表皮癌细胞(HEp-2)和非洲绿猴肾细胞(Vero)3种细胞(MHV)混合细胞瓶冻存复苏方法,经冻存复苏的混合细胞用于分离常见呼吸道和肠道病毒,建立病毒性病原检测的方法学平台。方法对数生长期的MDCK、HEp-2和Vero细胞等量保存在含8%二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DM-SO)冷冻保存液中,液氮经冻存4个月后复苏并进行细胞计数;在复苏后0 h、24 h和48 h倒置显微镜下观察细胞形态、细胞汇合;并用于分离培养常见呼吸道、肠道病毒,观察致细胞病变效应,采用直接与间接免疫荧光法鉴定。结果在液氮中保存4个月的MHV混合细胞,细胞复苏存活率超过99.20%,镜下细胞折光度好,细胞形态良好,均见到相应的致细胞病变效应和免疫荧光检测阳性结果。结论 MDCK、HEp-2和Vero细胞等量保存在含8%DM-SO冷冻保存液中液氮保存4个月复苏存活率高。混合细胞直接冻存复苏方法建立,为常见的病毒性病原分离培养提供了宽泛的合适细胞宿主,保证了病毒性传染病的快速诊断、实验室病毒性传染病监测的可操作性。
- 汪千力居丽雯蒋露芳蔡韵高颖阳姜庆五
- 关键词：上皮样细胞肠道病毒感染
