薛嬿
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：东北师范大学生命科学学院遗传与细胞研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金吉林省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 以MyD88TIR二聚化为靶点的抗炎抑制剂筛选模型的建立被引量：1
- 2012年
- MyD88是IL-1R/TLR受体超家族向细胞内转导胞外信号时募集到受体胞浆尾部的重要接头蛋白.由TIR结构域介导的MyD88分子同源二聚化是它招募到受体胞浆尾部的前提,然后二聚化的MyD88再募集下游信号分子,传递信号,引发促炎基因的表达.本研究旨在建立一种模型,以实现活细胞原位的、基于荧光信号变化的MyD88二聚化抑制物的高通量筛选.我们分别构建了MyD88 TIR与GFP和RFP的融合蛋白表达质粒,瞬时转染HeLa细胞,在488 nm激发光下,转染GFP-MyD88 TIR和RFP-MyD88 TIR细胞,检测到绿色荧光与红色荧光间的共振能量转移(FRET).而当细胞转染GFP-MyD88 TIR和RFP或RFP-MyD88 TIR和GFP,因TIR二聚化不能实现,FRET效率受到严重影响.实验结果提示,依赖双阳性表达GFP-MyD88 TIR和RFP-MyD88 TIR的细胞株,检测不同化合物对于荧光FRET效率的影响,可以建立MyD88 TIR二聚化抑制药物的筛选模型.此外,我们构建了原核表达质粒,利用纯化的His-MyD88 TIR分别与GST或GST-MyD88 TIR蛋白进行体外结合实验,发现GST-MyD88 TIR(而非GST)可以与His-MyD88 TIR相互结合.结果的差异性提示,利用His-MyD88 TIR和GST-MyD88 TIR体外结合实验分析,可以进一步确定抑制物是否直接阻断了TIR的相互作用.结合真核细胞的荧光FRET阻断结果和原核表达的重组蛋白相互作用分析,可确定MyD88 TIR二聚化的抑制物.利用这一模型可以对商品化的小分子库、自行制备的天然产物组分进行广泛的筛选,从中获得有效抑制MyD88二聚化的化合物,参与对MyD88信号通路依赖的慢性炎症、自身免疫性疾病的药物治疗.
- 赵岩薛嬿姜雪曾宪录巴雪青
- 关键词：二聚化
- IL-18信号上调CSF-1基因转录的机制研究
- IL-18是IL-1家族的一个成员,是一种必不可少的强有力促炎因子,能够促进天然免疫和Th1、Th2-驱动的免疫应答。IL-18刺激免疫细胞产生效应因子能够抗细菌真菌感染,抑制肿瘤生长。同时也参与许多慢性炎症和自身免疫性...
- 薛嬿
- 关键词：炎症IL-18MYD88CSF-1
- 文献传递
- IL-18通过MyD88依赖信号途径调控CSF-1表达(英文)被引量：4
- 2011年
- IL-18是IL-1家族的一个成员,最初发现被命名为IFN-γ诱导因子.现在研究表明,IL-18是炎症反应的重要标志,参与许多慢性炎症和自身免疫性疾病炎性反应.证明了IL-18在JurkatT淋巴细胞的炎症反应中能够调节CSF-1的表达,其信号机制是IL-18通过MyD88-NF-κB-CSF-1信号途径上调CSF-1的基因转录.
- 薛嬿刘琳琳贺芬姜雪曾宪录巴雪青
- 关键词：MYD88核因子KB
