袁力勇
- 作品数:44 被引量:129H指数:6
- 供职机构:中国药品生物制品检定所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划云南省应用基础研究基金上海市现代生物与新药产业发展基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>
- 重组复制型溶瘤单纯疱疹病毒GM-CSF的质量研究
- 目的:研究建立肿瘤溶瘤基因治疗产品——重组复制型溶瘤单纯疱疹病毒GM-CSF的检测方法与质控标准。方法:采用限制性内切酶酶切与PCR法结合,对重组病毒载体携带的GM-CSF基因、以及ICP 34.5、ICP6、ICP47...
- 高凯付志浩陶磊毕华袁力勇李永红饶春明
- 关键词:基因治疗
- 流感疫苗血凝素含量测定替代方法在甲型H1N1流感疫苗研发中的应用
- 目的在2009年甲型H1N1流感爆发后,血凝素(HA)含量测定参考品成为疫苗研发的关键制约环节。本研究采用替代方法,以解决这一制约瓶颈,促进我国疫苗及早进入临床研究。方法在前期研究的基础上,各企业采用改良SDS-PAGE...
- 邵铭袁力勇刘书珍方捍华李凤祥李长贵王军志
- 关键词:甲型H1N1流感疫苗血凝素
- 文献传递
- 麻疹减毒活疫苗国家参考品的制备及标定被引量:1
- 2010年
- 为了制备麻疹减毒活疫苗国家参考品,选用国内麻疹疫苗生产株沪191制备麻疹疫苗参考品。生产过程中严格控制精密性、水分含量,对候选参考品进行鉴别试验、水分含量、病毒滴度及无菌检查等检验。检验合格后组织进行候选参考品病毒滴度协作标定,共有5个实验室参加了协作标定。协作标定完成后,对实验室内变异、实验室间变异及国际参考品在不同实验室间的变异进行了分析。此外还对疫苗进行了热稳定性和实时稳定性分析。结果显示经5个实验室协作标定后,麻疹减毒活疫苗国家参考品的滴度为4.96±0.26 lgCC ID50/m l,实验室内部变异在1.09%~4.64%之间,实验室间变异为2.62%。国际参考品在不同实验室间的变异为4.19%。稳定性考核数据表明制备的参考品具有较好的稳定性,符合作为麻疹减毒活疫苗国家参考品的要求,滴度为4.96±0.26 lgCC ID50/m l。
- 李薇李娟易敏袁力勇方捍华李长贵
- 关键词:麻疹减毒活疫苗国家参考品
- 小鼠NGF基因治疗型DNA质粒的构建及中试工艺的优化被引量:1
- 2008年
- 目的构建小鼠NGF基因治疗型DNA质粒,并进行中试工艺的优化。方法用SignalP3.0 Server软件选择并设计与NGF融合的信号肽;根据哺乳动物密码子偏爱性,对小鼠NGF的编码序列进行优化;通过流加补料等方式优化中试生产工艺;体外瞬时转染测定DNA质粒的表达和体外生物学活性。结果所构建的含有IgG/ngf的重组质粒,通过中试规模的发酵和纯化,获得了大量的高纯度重组质粒,该重组质粒可以在体外表达出具有生物学活性的NGF。结论构建了具有与小鼠NGF相似的生物学活性的重组质粒,并建立了中试生产工艺。
- 饶春明袁力勇丁有学刘兰李响郭莹裴德宁
- 关键词:DNA质粒生物学活性中试工艺
- 重组天花粉蛋白突变体质量标准的研究和建立被引量:3
- 2006年
- 目的:建立重组天花粉蛋白突变体(MTCS)的质量控制标准和检测方法。方法:用HL-60细胞株/MTT比色法定量测定MTCS体外生物学活性;用C4-HPLC和非还原型SDS—PAGE测定蛋白纯度;用毛细管电泳法测定等电点;用胰酶消化/RP—HPLC测定肽图;用还原型SDS—PAGE测定蛋白分子量等。结果:MTCS原液和成品对HL-60细胞的反应曲线与参考品的反应曲线一致,都呈现典型的S型曲线并且符合四参数方程式Y=((A—D)/(1+(X/C)^B))+D,相关系数大于0.99;蛋白质纯度大于95.0%;等电点为9.16;蛋白原液的肽图与参考品肽图图形一致;分子量为2.72×10^4。结论:建立的MTCS质量控制标准和检测方法可以有效控制该制品的质量,并用于该制品的常规检定。
- 韩春梅袁力勇饶春明李响丁有学郭莹王军志
- 关键词:HL-60细胞株HPLC等电点
- 人纤溶酶原K5基因在毕赤酵母中的表达及其抗肿瘤活性被引量:4
- 2008年
- 目的在毕赤酵母中表达人纤溶酶原K5基因,并检测hK5蛋白的抗肿瘤活性。方法根据酵母遗传密码的偏爱性优化设计hK5基因,构建重组表达质粒p819-8α-hK5,经G418加压筛选和甲醇诱导表达,并对摇瓶发酵条件进行优化。表达的hK5蛋白经纯化后,通过荷H22肿瘤昆明小鼠模型检测其抗肿瘤活性。结果筛选到2株高表达hK5蛋白的转化子,摇瓶表达量超过150mg/L,纯化后的蛋白纯度大于95.0%,并能够显著抑制昆明小鼠H22肿瘤的生长。结论hK5基因能够在毕赤酵母中高效分泌表达,且表达的hK5蛋白具有良好的抗肿瘤活性。
- 袁力勇刘勇饶春明马雁冰史新昌王军志戴长柏
- 关键词:人纤溶酶原毕赤酵母抗肿瘤活性
- 重组hPK-5质粒DNA基因治疗制剂的质量标准研究
- 人纤溶酶原Kringle 5(human plasminogenkringle 5,hPK-5)是人纤溶酶原的第5个环状结构域片段,重组hPK-5质粒DNA基因治疗制剂是将hPK-5基因插入真核表达载体组成的基因治疗产品...
- 李永红张勇朝袁力勇史新昌饶春明王军志
- 关键词:药品管理人纤溶酶原
- 文献传递
- 甲型H1N1流感疫苗生产用工作毒种的质量控制被引量:1
- 2009年
- 根据中国药典2005年版三部和WHO"人用大流行流感疫苗制备的指导原则"相关要求,以及各企业的申报规程,对全国10家甲型H1N1流感疫苗生产企业工作毒种A/Californ ia/07/2009 NYMC X-179A进行毒种检定,结果均符合中国药典2005年版三部和各企业申报规程的要求。
- 方捍华袁力勇邵铭刘书珍李长贵
- 关键词:甲型H1N1流感疫苗
- 人血纤维蛋白溶酶原K5环的基因合成、表达、纯化与活性鉴定被引量:6
- 2001年
- 根据大肠杆菌遗传密码的偏爱性 ,人工合成人血纤维蛋白溶酶原 K5全基因 ,并在原核系统中以硫氧还蛋白融合蛋白的形式实现了高效表达 .重组蛋白通过 Ni2 +金属螯合层析得到初步纯化 ,通过肠激酶切割去除了融合标签 .应用鸡胚尿囊膜实验检测切割后的 rh K5的生物学活性 ,发现与对照组相比 ,rh K5能明显地降低血管管径、血管总面积以及血管总面积与视野面积的比值 ,表明切割后的产物具有显著抑制新生血管生成的生物学活性 .为进一步研究和开发抗血管生成药物奠定了基础 .
- 袁力勇马雁冰刘勇庄俊英李春宏冮宏映孙茂盛戴长柏
- 关键词:基因合成基因表达肿瘤治疗
- 流感疫苗血凝素含量测定替代方法在甲型H1N1流感疫苗研发中的应用
- 目的:在2009年甲型H1N1流感爆发后,血凝素(HA)参考品成为疫苗研发的关键制约环节。本研究采用替代方法,以解决这一制约瓶颈,促进我国疫苗及早进入临床研究。方法:在前期研究的基础上,各企业采用改良SDS-PAGE方法...
- 邵铭袁力勇刘书珍方捍华李凤祥李长贵王军志
- 关键词:甲型H1N1流感疫苗血凝素
- 文献传递