许鹏宇
- 作品数:14 被引量:64H指数:6
- 供职机构:白求恩国际和平医院更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- miR200c对卵巢上皮性癌细胞转移潜能影响及其机制探讨被引量:6
- 2014年
- 目的:探讨miR200c对卵巢癌细胞SKOV3和HO-8910转移潜能的影响及其调控机制。方法:人工合成miR200cmimic(实验组)和对照无关序列(阴性对照组),用脂质体将其转入SKOV3和HO-8910细胞,以SKOV3和HO-8910为空白对照,培养48h后,应用RT-PCR技术检测miR200c的相对表达;采用Transwell小室装置检测其对细胞侵袭和迁移能力的影响;蛋白质印迹法检测细胞中上皮向间质转化相关蛋白ZEB1、E-cadherin和Vimentin的表达;同时应用酶联免疫吸附实验检测间皮素和CA125的表达变化。结果:miR200c表达与空白对照组比较,SKOV3-mimic组为297.40±5.26倍,F=77.571,P<0.001;HO-8910-mimic组为348.57±6.50倍,F=63.563,P<0.001。侵袭到滤膜下的细胞数SKOV3-mimic组为74.20±7.44,低于空白对照组和阴性对照组,F=48.413,P<0.001;HO-8910-mimic组为98.67±7.62,低于空白对照组和阴性对照组,F=55.133,P<0.001。迁移到滤膜下的细胞数SKOV3-mimic组为56.27±6.36,低于空白对照组和阴性对照组,F=55.354,P<0.001;HO-8910-mimic组为91.33±5.75,亦低于空白对照组和阴性对照组,F=60.374,P<0.001。SKOV3-mimic组E-cadherin蛋白相对表达量为155.36±18.52,较对照组高,F=62.451,P=0.002,ZEB1和Vimentin蛋白表达降低,P值分别为0.003和0.005;HO-8910-mimic组E-cadherin蛋白相对表达量为149.90±38.53,较对照组高,F=54.536,P=0.002,ZEB1和Vimentin蛋白表达降低,P值分别为0.006和0.005。转染miR200cmimic后,SKOV3中CA125表达降低了33.2%,F=35.646,P=0.005,间皮素表达降低了39.6%,F=25.625,P=0.006;HO-8910中CA125表达降低了37.2%,F=27.426,P=0.007,间皮素表达降低了41.2%,F=33.735,P=0.005。结论:miR200c可通过miR200c/ZEB1/E-cadherin和间皮素/CA125通路抑制卵巢癌细胞侵袭和迁移能力。
- 吴小华许鹏宇杨波王娜陈亚楠周楠
- 关键词:卵巢肿瘤间皮素
- 341例少弱精子症及无精子症患者细胞遗传学分析被引量:2
- 2017年
- 目的研究少弱精子症及无精子症患者细胞染色体异常及染色体多态性的发生情况。方法对341例男性不孕不育患者(弱精子症165例,少精子症34例,重度少精子症44例,少弱精子症79例,无精子症19例)的外周血淋巴细胞进行培养、制片及G显带染色体核型分析。结果染色体异常27例,异常率7.9%。常染色体异常为16例,异常率为4.7%;性染色体异常11例,异常率为3.2%。染色体异常率弱精子症占3.0%,少精子症占5.8%,重度少精子症占18.1%,少弱精子症占6.3%,无精子症占36.8%。染色体多态性变异61例,占17.8%。结论男性不孕不育患者染色体异常和多态性发生率明显较高,对该类患者有必要常规做染色体检查,尤其在实施辅助生殖技术之前,以避免将遗传缺陷传递给下一代。
- 徐清华吴小华王琳琳张敏李冬秀许鹏宇马振勇
- 关键词:无精子症少精子症染色体多态性
- 两种玻璃化冷冻方法在大鼠卵巢组织冷冻中的应用效果观察
- 2015年
- 目的比较直接覆盖玻璃化冷冻(direct cover vitrification,DCV)及常规玻璃化冷冻(conventional vitrification,CV)在大鼠卵巢组织冷冻中的应用效果。方法将雌性Wistar大鼠30只随机分为A、B、C组,每组10只,切除大鼠双侧卵巢组织。A组为对照组,B组和C组分别应用CV和DCV冻存2周。复苏后观察3组卵泡的形态,并用末端脱氧核酰转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸标记实验(TUNEL)检测各组卵泡的凋亡率。结果 A组各级卵泡形态正常;B组卵泡形状不规则,卵母细胞核固缩;C组较大的窦状卵泡损伤。除C组原始卵泡外,B组和C组形态正常的各级卵泡比例均低于A组(P<0.05);C组形态正常的各级卵泡比例高于B组(P<0.05)。B、C组卵泡凋亡率高于A组,且C组低于B组(P<0.01)。结论 DCV较CV卵巢组织效果更好,可以有效保存卵巢组织中的原始卵泡。
- 李冬秀耿杨柳吴小华于晓惠张敏徐清华许鹏宇
- 关键词:卵巢
- 促卵泡激素和血管内皮生长因子在大鼠卵巢组织冷冻自体异位移植中的保护作用被引量:1
- 2015年
- 目的探讨促卵泡激素(FSH)和血管内皮生长因子(VEGF)在大鼠卵巢组织冷冻自体异位移植后对卵泡内分泌功能的影响。方法 Wistar大鼠30只随机分为A、B、C组,每组10只,A组为新鲜卵巢组织移植,B组和C组卵巢组织均直接覆盖玻璃化冷冻保存2周复苏后移植,但C组在移植前2 d肌内注射FSH和VEGF,连续用药5 d。移植6周后计算卵泡密度;检测大鼠血清中雌二醇(E2)水平;卵巢组织增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况,并测定子宫重量。结果 A、B、C组移植后卵巢组织存活率比较差异无统计学意义(P>0.05)。A、C组卵泡密度、血清E2水平、PCNA阳性率和子宫重量均高于B组(P<0.05),A组和C组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论大鼠卵巢组织冷冻复苏自体异位移植前注射FSH和VEGF可以有效提高卵泡存活率,有利于恢复卵巢内分泌功能。
- 李冬秀耿杨柳吴小华张敏徐清华于晓惠许鹏宇
- 关键词:卵泡刺激素血管内皮生长因子类卵巢
- 女性生育力保存冷冻技术研究进展被引量:2
- 2015年
- 由于生存环境和生活方式的改变、晚育、卵巢功能低下、卵巢早衰的发病年龄提前等因素的影响,导致人类生殖能力不断下降,因此生育力保存越来越受到人们的关注。冷冻保存技术是通过超低温冷冻细胞或组织使其生物学活性停止并保存。保存生育力的方法主要有:胚胎冷冻、未成熟和成熟卵母细胞冷冻、卵巢组织冷冻以及卵母细胞体外培养技术,其中冷冻技术对于生育力保存具有重要意义。现将该技术适用人群及方法综述如下。
- 徐清华李冬秀张敏许鹏宇吴小华
- 关键词:生育力
- 冻融卵母细胞显微受精后冻融胚胎移植成功妊娠一例被引量:6
- 2015年
- 随着辅助生殖技术发展,卵子冷冻应被视为辅助生殖技术重要的组成部分。2013年美国生育年会颁布的指导原则表明,目前成熟卵子的冷冻已不再局限于实验研究。解放军白求恩国际和平医院生殖医学中心采用玻璃化冷冻胚胎取得了满意的种植率和妊娠率。2014年该中心采用玻璃化冷冻经历了冻卵、冻胚的双冻试管婴儿1例,获得临床妊娠,现报告如下。
- 徐清华张敏常秀峰李冬秀包莉莉许鹏宇于晓惠吴小华
- 关键词:卵母细胞胚胎移植妊娠
- 1469例不孕不育患者细胞遗传学分析被引量:12
- 2017年
- 目的探讨不孕不育患者染色体异常检出率、异常类型。方法对1469例不孕不育患者的外周血淋巴细胞进行培养、制片及G显带染色体核型分析。结果 1469例不孕不育患者染色体异常56例,检出率3.8%。常染色体结构异常45例,占总异常率的80.4%,包括倒位13例,平衡易位21例,罗伯逊易位5例,片段增加5例。常染色体异常临床表现男性以少弱精症为主,女性以原发不孕多见。性染色体异常11例,占总异常率的1.5%,包括性染色体数目异常10例,结构异常1例。染色体多态性改变160例,检出率10.9%,以Y染色体多态性为最常见。结论染色体异常是导致男女不孕不育的重要因素之一,因此对不孕不育患者应常规进行染色体检查,以便排除遗传因素影响。
- 徐清华马振勇王琳琳张敏李冬秀许鹏宇吴小华
- 关键词:染色体不孕不育染色体核型
- 少、弱精子症及无精子症患者染色体多态性分析被引量:5
- 2017年
- 目的研究少、弱精子症及无精子症患者染色体多态性的发生情况。方法对341例少弱精症及无精症患者(弱精症165例,少精症34例,重度少精症44例,少弱精症79例,无精子症19例)的外周血淋巴细胞进行培养、制片及G显带染色体核型分析。结果染色体多态性改变61例,检出率为17.8%。共分四组:1/9/16 qh+占4.1%,D/G组随体增加占0.29%,inv(9)占0.58%,Y染色体多态性占12.9%。从检出率看多态性以Y+为主,Y+检出率为12.3%,D/G组多态性检出率最低。多态性检出率在弱精中最高9.97%),其次为少弱精(3.51%),重度少精和无精全部为Y染色体多态性。结论少弱精症及无精症患者染色体多态性发生率较高,尤其是大Y染色体多态性明显升高。对该类患者有必要常规做染色体检查,尤其在实施辅助生殖技术之前,以避免将遗传缺陷传递给下一代。
- 徐清华吴小华王琳琳张敏李冬秀许鹏宇马振勇
- 关键词:男性不育症无精子症少精子症染色体多态性
- 卵母细胞分泌因子在人卵丘颗粒细胞中的表达及其与卵母细胞发育潜能的关系被引量:11
- 2016年
- 目的:探讨单卵母细胞所对应的卵丘颗粒细胞(cumulus cells,CCs)中生长分化因子-9(GDF-9)、骨形成蛋白-15(BMP-15)、转化生长因子β1(TGFβ1)、Smad3的表达与对应单卵母细胞质量及其发育潜能的关系以及在不同促排卵方案中的表达。方法:因男方因素或曾有过体外受精(IVF)不受精史接受卵胞质内单精子显微注射(ICSI)治疗的患者41例,单卵母细胞的CCs 332份(Gn RH-a组21例172份CCs,非垂体降调节组20例160份CCs)。拣卵后机械法剥离单卵子周围的CCs,将卵母细胞与收集的CCs一一对应进行分析。M_Ⅱ卵均采用ICSI授精,并观察其受精、卵裂及囊胚发育情况。采用Real-time PCR方法检测,比较各组CCs中GDF-9、BMP-15、TGFβ1和Smad3的相对含量。结果:1 CCs收集及PCR扩增产物可满足实验要求。2 Gn RH-a组及非垂体降调节组中,上述4种卵母细胞分泌因子,在正常受精组的相对含量均显著高于异常受精组;优质卵裂胚形成组的相对含量均显著高于非优质卵裂胚形成组;优质囊胚形成组中的相对含量显著高于非优质囊胚形成组。3 Gn RH-a组的CCs中BMP-15的表达量相对更高;而GDF-9、TGFβ1和Smad3在非降调节组的CCs中相对表达量较高。结论:1采用单卵母细胞的CCs的RNA进行研究,实际操作是可行的,RNA的质量和数量可达到实验要求。2 GDF-9、BMP-15、TGFβ1、Smad3可作为评价卵母细胞质量、预测卵母细胞发育潜能的客观指标。3降调节与否可能影响CCs中的卵母细胞分泌因子的表达水平,且与M_Ⅱ期卵母细胞发育潜能有关。
- 吴小华程立立张敏焦保权朱爱萍常秀峰徐清华李冬秀包莉莉许鹏宇
- 关键词:胚胎发育潜能
- miR200c对卵巢上皮性癌细胞侵袭、迁移及增殖能力影响的研究
- 卵巢上皮性癌(epithelialovariancancer,EOC,简称卵巢癌)是女性最常见的妇科恶性肿瘤之一,由于缺乏敏感有效的肿瘤标志物,使得卵巢癌的早期确诊率很低,尽管应用现代抗肿瘤药物配合肿瘤细胞减灭术治疗,晚...
- 许鹏宇
- 关键词:卵巢上皮性癌细胞侵袭细胞迁移