谢军芳
- 作品数:8 被引量:17H指数:2
- 供职机构:湖南农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生理学农业科学更多>>
- 小鼠多瘤病毒PCR检测方法的建立
- 目的建立小鼠多瘤病毒PCR检测方法。方法根据病毒特异性保守序列设计引物,用PCR方法检测并以实验动物微生物学等级国家标准中涉及的几种DNA病毒进行特异性实验;将提取的POLY基因组DNA定量后连续10倍稀释,进行PCR扩...
- 佟巍谢军芳乔红伟张丽芳魏强刘云波
- 关键词:PCR
- 文献传递
- 血凝抑制试验检测犬血清中乙脑抗体被引量:1
- 2011年
- 为调查犬血清中流行性乙型脑炎抗体存在情况,以高岭土和鸽红细胞消除犬血清中非特异性凝集因素干扰,采用血凝抑制试验检测了血清中乙脑抗体。检测的34份犬血清样本中流行性乙型脑炎血凝抑制抗体阳性21份,阳性率61.8%,以1∶20~1∶80的抗体为主(95.2%)。结果表明,在犬血清中检出了流行性乙型脑炎抗体,且阳性率较高,提示犬体内存在乙脑病毒感染的可能。
- 贾杏林黎摄儿谢军芳牛俊超李晓云
- 关键词:血凝抑制试验流行性乙型脑炎抗体
- TMEV、Ect、LCMV、POLY和PVM病毒免疫血清制备及ELISA等检测方法的研究
- 实验动物病毒检测是保证实验动物质量和动物实验结果的重要手段,国家标准中规定的实验动物病毒血清学检测方法主要为IFA,IEA和ELISA。目前,这些方法分散在我国为数不多的实验室中,阳性对照血清主要来自自然感染的动物血清,...
- 谢军芳
- 关键词:血清制备脑脊髓炎病毒痘病毒
- 文献传递
- 小鼠多瘤病毒PCR检测方法的建立
- 目的:建立小鼠多瘤病毒PCR检测方法。
方法:根据病毒特异性保守序列设计引物,用PCR方法检测。并以实验动物微生物学等级国家标准中涉及的几种DNA病毒进行特异性实验;将提取的POLY基因组DNA定量后连续10倍...
- 佟巍谢军芳乔红伟张丽芳魏强刘云波
- 关键词:多瘤病毒PCR检测方法
- 文献传递
- 痘苗病毒毒力测定及其免疫血清的制备被引量:2
- 2008年
- 目的测试痘苗病毒毒力,制备痘苗病毒免疫血清,为药物评价和病毒检测奠定基础。方法鸡胚绒毛尿囊膜培养痘苗病毒,测定病毒的TCID50和小鼠毒力。将痘苗病毒悬液稀释成100TCID50,0.2%福尔马林灭活,分别在07、1、4 d以腹腔注射的方式免疫BALB/c小鼠,用IFAI、EA、ELISA方法评价血清的敏感性和特异性。结果痘苗病毒TCID50/0.0 5 mL=1.8×104,小鼠LD50/0.2 mL=106.8;制备的免疫血清经IFA法测定效价为1∶320,IEA法测血清效价为1∶160,ELISA测血清效价1∶6400。结论确定的细胞和小鼠毒力将为药物测定提供基础比对数据;制备的痘苗病毒免疫血清具有高度的敏感性和特异性,可作为测试对照血清使用。
- 谢军芳侯丽波佟巍乔红伟丛喆王卫蒋虹魏强
- 关键词:痘苗病毒BALB/C小鼠免疫血清
- 小鼠仙台病毒标准化血清的制备及鉴定被引量:6
- 2008年
- 目的制备标准化抗小鼠仙台病毒(Sendai Virus,SV)免疫血清,为清洁级及SPF级实验小鼠质量检测提供批量、稳定、敏感的质控血清。方法使用动物来源的仙台病毒(sv)感染BALB/c小鼠,获得高效价免疫血清,经IFA、IEA、ELISA等方法检测血清效价。结果制备多量抗SV血清,经多种方法检定,IFA效价达1:640,IEA效价达1:320,ELISA效价达1:102400~1:204800。结论本研究中制备的sV抗血清达到同批次大量高滴度的水平,可作为检测实验小鼠中sv病原的标准化质控血清。
- 侯丽波谢军芳佟巍乔红伟丛喆蒋虹王卫魏强
- 关键词:仙台病毒血清
- 小鼠脑脊髓炎病毒标准血清制备及间接ELISA检测方法的应用被引量:1
- 2009年
- 目的制备小鼠脑脊髓炎病毒(TMEV)标准血清,建立ELISA检测方法,实现一种病毒多种检测方法的比对研究。方法用TMEV感染3周龄SPF级BALB/c小鼠,制备免疫用抗原。分别在0、7、14d以腹腔注射的方式免疫SPF级6-8周龄BALB/c小鼠,免疫血清用IFA、IEA法进行鉴定;TMEV感染BHK-21细胞,制备EHSA抗原,确定酶结合物、抗原和标准阳性血清的最佳工作浓度,建立TMEVEHSA检测方法,进行敏感性、特异性、重复性和稳定性实验。结果制备TMEV免疫血清,以IFA、IEA测定血清效价分别为1:640和1:320,与痘苗病毒、小鼠肺炎病毒、小鼠肝炎病毒、仙台病毒和呼肠孤病毒-Ⅲ型均无交叉反应;建立了ELISA检测方法,确立了各种试剂的最佳工作浓度,其中酶结合物最佳工作浓度为1:10000,抗原为2.5μg/mL,阳性参考血清为1:200;EHSA检测灵敏度为1:3200。板内特异抗原、正常抗原平均变异系数为4.67%和5.7%,板间为4.39%和7.61%。稳定性实验相对偏差均小于20%。结论本研究制备的TMEV免疫血清可作为血清学检测方法中的标准质控血清;建立的ELISA方法重复性、稳定性好,敏感性和特异性强,可用于小鼠脑脊髓炎病毒血清抗体检测。
- 谢军芳佟巍侯丽波乔红伟丛喆王卫蒋虹魏强
- 关键词:标准血清ELISA
- 小鼠呼肠孤病毒Ⅲ型标准化血清制备及ELISA检测方法的建立被引量:7
- 2010年
- 目的制备标准化小鼠呼肠孤病毒III型(reovirus 3,Reo-3)免疫血清,建立小鼠Reo-3抗体ELISA检测方法。方法使用动物来源的Reo-3病毒感染BALB/c小鼠,获得高效价免疫血清;以BHK-21细胞制备Reo-3病毒抗原,同时制备做正常对照抗原。滴定抗原和标准化小鼠Reo-3血清的最佳工作浓度,进行特异性、敏感性、重复性、稳定性等实验。结果制备18 mL抗Reo-3血清,经检测,IFA效价达1∶640,IEA效价达1∶160;Reo-3抗原和标准化小鼠Reo-3免疫血清最佳工作浓度分别为5μg/mL和1∶2400;该ELISA检测体系Reo-3特异抗原批内变异系数为3.8%,批间变异系数为4.0%;检测灵敏度>1∶4400;与仙台病毒(SV)、小鼠肝炎病毒(MHV)、小鼠腺病毒(Mad)、小鼠脑脊髓炎病毒(TMEV)、小鼠多瘤病毒(POLY)均无交叉反应。经37℃破坏性试验,2 d稳定性试验相对偏差<27%。结论本研究制备的Reo-3抗血清达到同批次大量高滴度的水平,可作为检测实验小鼠Reo-3病原的标准化质控血清。本研究建立的ELISA方法重复性、稳定性好,特异性、敏感性强。该体系可用于大、小鼠等实验动物Reo-3抗体的检测。
- 侯丽波佟巍谢军芳乔红伟丛喆蒋虹王卫魏强
- 关键词:血清ELISA