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甲型H1N1流感病毒HA蛋白的截短表达、纯化及鉴定: 2011年; 构建pET表达载体,通过原核表达系统制备甲型H1N1流感病毒HA的截短表达蛋白,获得纯化蛋白,并分析HA蛋白的反应原性。人工合成A/California/04/2009 H1N1流感病毒HA基因,以其为模板,PCR扩增HA的一部分基因,去除HA蛋白信号肽、跨膜区、胞内区的基因序列,仅扩增HA1和HA2的基因。将扩增的基因构建到pET 28(a)质粒上,重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达HA蛋白,并经过Ni-NTA His Bind柱对其进行纯化,SDS-PAGE电泳鉴定HA蛋白的表达,Western blot鉴定HA蛋白的反应原性。通过原核表达获得了HA的截短表达蛋白,并制备了较高纯度的蛋白,Western blot显示HA蛋白具有很好的反应原性,为建立甲型H1N1流感病毒检测技术奠定了基础。; 贾园沈阳邱亚峰史子学邵东华王晓杜邓绪芳王皓婷赵福广; 关键词：甲型H1N1流感病毒 HA蛋白原核表达

甲型H1N1流感病毒HA蛋白原核表达: 甲型H1N1流感病毒给人类带来极大地恐慌,而HA蛋白作为流感病毒重要的表面抗原,在产生抗体方面扮演重要角色。本研究通过原核表达系统表达甲型H1N1流感病毒HA蛋白,并经过Ni-NTAHisBind柱进行纯化,获得较高纯度...; 贾园沈阳邱亚峰史子学邵东华王晓杜邓绪芳王皓婷高小琪罗金燕赵福广马志永; 关键词：甲型H1N1流感病毒 HA蛋白原核表达; 文献传递

甲型H1N1流感病毒HA重组蛋白的表达及鉴定: 流感病毒属于正黏病毒科流感病毒属,是单股负链RNA病毒,基因组由8个RNA片段组成,共编码至少11种蛋白,依据NP蛋白的不同,流感病毒分为甲型、乙型与丙型流感病毒,即A型、B型、C型。根据HA与NA的不同可以将甲型流感病...; 贾园; 关键词：甲型H1N1流感 HA蛋白原核表达系统昆虫杆状病毒表达系统; 文献传递

甲型H1N1流感病毒HA蛋白原核表达: 甲型H1N1流感病毒给人类带来极大地恐慌，而HA蛋白作为流感病毒重要的表面抗原，在产生抗体方面扮演重要角色。本研究通过原核表达系统表达甲型H1N1流感病毒HA蛋白，并经过Ni-NTA His Bind柱进行纯化，获得较高...; 贾园罗金燕赵福广马志永沈阳邱亚峰史子学邵东华王晓杜邓绪芳王皓婷高小琪; 关键词：甲型H1N1流感病毒 HA蛋白原核表达; 文献传递

杆状病毒的应用: 杆状病毒作为节肢动物专一性的昆虫病毒,不仅能够作为生物杀虫剂,而且还在真核表达系统、基因转移载体、蛋白表面展示、表达病毒样颗粒（virus-like particles,VLPs）和表达异源病毒等研究方面发挥重要作用。因...; 贾园沈阳邱亚峰史子学邵东华赵福广马志永; 关键词：杆状病毒; 文献传递

甲型H1N1流感病毒HA基因在昆虫细胞中的截短表达: 2011年; 目的:利用Bac-to-Bac Baculovirus Expression System表达重组HA蛋白,Western blot及IFA方法鉴定其表达。方法:采用PCR方法扩增A/California/04/2009(H1N1)HA基因,将其克隆到pFastBacHT A载体上,重组质粒pFastBacHT-HA经双酶切及测序鉴定正确后,转化阳性重组载体进入E.coli DH10Bac感受态细胞中,通过Bluo-gal蓝白斑筛选、PCR鉴定获得重组转座子rBacmid-HA。从重组转座子中提取rBacmid-HA质粒DNA转染sf 9昆虫细胞,制备重组杆状病毒。重组杆状病毒感染sf 9细胞表达重组蛋白,Western blot及IFA鉴定重组蛋白表达情况。结论:成功构建了甲型H1N1流感病毒HA基因的昆虫杆状病毒表达载体,该表达载体转染昆虫细胞后制备的重组杆状病毒病毒滴度较高,重组杆状病毒表达的重组蛋白经Western blot及IFA鉴定后具有良好的免疫反应原性。; 贾园沈阳邱亚峰史子学邵东华王晓杜邓绪芳王皓婷赵福广马志永; 关键词：H1N1 BAC-TO-BAC BACULOVIRUS

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贾园