赵文利
- 作品数:50 被引量:190H指数:9
- 供职机构:第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 茶碱在哮喘防治中免疫调节作用被引量:9
- 2003年
- 赵文利孔祥英何念海
- 关键词:茶碱哮喘免疫调节
- 人胎儿骨髓间充质干细胞体外分离培养及诱导分化为类肝细胞被引量:4
- 2006年
- 目的 建立人胎儿骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MMSCs)的体外分离、培养方法.体外诱导分化MMSCs为类肝细胞,观察MMSCs细胞生物学特性,并对类肝细胞进行分子生物学及功能鉴定。方法 采用体外细胞培养技术,分离培养人胎儿MMSCs,在1%Matrigel做基质,2.5gmol/inlAZA预处理10~12h,HGF10ng/ml+FGF410ng/ml+HGM培养基中诱导。用显微摄像和MTT研究细胞增殖及生长特征,用流式细胞仪、免疫组织化学和RT—PCR鉴定细胞表型。采用ELISA法检测培养上清中人清蛋白水平。结果 24h换液后可获得约(300±80)个贴壁细胞;培养细胞在种植后1~3d为生长滞留期,第4天达到对数生长期,以后进入到平台期,细胞分裂指数曲线的趋势与生长曲线类似。连续传10代后.每个胎儿来源的MMSCs可扩增达10^11~10^12个细胞。MMSCs表型为CD166阳性,CD34阴性。在添加FGF4和HGF的Matrigel上诱导培养的MMSCs在21~28d时,细胞形态由长梭形变为三角形、多角形或类圆形。细胞转圆率为40%~50%,双核细胞比率5%~7%。免疫组化和RT—PCR检测显示未诱导培养的MMSCs中,有较少的细胞表达AFP及其mRNA,未见其他肝脏特有的转录因子或者胞浆蛋白标志。诱导早期可见较多细胞表达GATA4、AFP和CK19及其mRNA,至诱导后期表达下降,而ALB、CK18、GST-Ⅱ和肝细胞转录因子HNF1d表达逐渐上升。ALB、CK18阳性细胞比例达61%~65%。未诱导分化的MMSCs没有分泌ALB,诱导分化的MMSCs以时间依赖方式产生清蛋白。结论 人胎儿MMSCs分离成分单纯,增生旺盛。诱导培养可获得高比例的类肝细胞。MMSCs向类肝细胞的横向分化是先分化为肝前体细胞,再分化为成熟肝细胞,在本实验诱导奈件下可获得在复制及翻译各环节肝细胞标志阳性的类肝细胞。诱导后MMSCs已具备肝细胞特有的功能性特征。
- 何念海赵文利王宇明
- 关键词:间充质干细胞类肝细胞细胞分化横向分化
- 临床病例讨论——不规则发热20天,伴口腔凝乳块样物9天被引量:3
- 2007年
- 钟华赵文利孟刚马巧玉张勇郝飞
- 关键词:病例报告
- 小鼠胚胎干细胞分化为肝前体细胞及其脾内移植的实验研究被引量:4
- 2006年
- 目的将体外小鼠胚胎干细胞(ESC)诱导为肝前体细胞(HPCs)并移植到预处理的C57/BL6小鼠脾脏,检测HPCs在小鼠脾脏内分化和移植细胞的功能及其在脾脏组织中的整合情况,探讨肝细胞合适的替换治疗细胞来源。方法体外培养ESC并制备拟胚体(EBs),体外诱导EBs 18 d后得到HPCs,然后用Hochest 3342荧光标记HPCs并制备成6.0×107/m l细胞悬液。移植受体小鼠用2乙-酰氨基芴(2-AAF)处理,移植前受体鼠经过7 Gy60Coγ全身辐照和50%肝脏切除,造成小鼠体内对肝细胞的极大需求;然后将0.1 m l含6.0×106HPCs细胞悬液经尾静脉注射移植入脾脏,细胞移植4周后,检测移植细胞在小鼠脾脏整合分化情况。结果体外培养ESC并制备出EBs,EBs经体外诱导为HPCs,并将HPCs移植到小鼠脾脏,4周后观察到移植细胞能够嵌合到受体脾脏组织,在脾脏组织中未形成畸胎瘤,并且移植细胞能表达肝细胞较特异标志物白蛋白、CK19和糖原PAS染色呈阳性反应。结论本实验建立一种将体外ESC诱导的HPCs移植并整合到脾脏的细胞移植技术,为研究肝细胞分化的分子机制和肝病的细胞替换治疗提供基础。
- 江海洪王宇明刘国栋陈耀凯李俊刚赵文利
- 关键词:胚胎干细胞肝前体细胞细胞移植2-乙酰氨基芴
- 嵌合肝研究进展
- 2003年
- 何念海赵文利陈耀凯王宇明
- 喘息性支气管炎与儿童哮喘相关性的初步探讨被引量:29
- 2008年
- 目的探讨喘息性支气管炎与儿童哮喘的相关性,为喘息性支气管炎的早期干预提供试验室依据。方法用ELISA方法测定血浆总IgE,伊红染色法检测EOS计数。结果(1)喘息性支气管组血浆总IgE(T-IgE)和EOS计数均高于正常对照组(P<0.05),低于哮喘急性发作组(P<0.05)。(2)哮喘组血浆IgE和EOS计数明显高于正常对照组(P<0.01)。(3)哮喘发作组和喘息性支气管炎组的血浆总IgE和EOS计数之间都有正相关关系(r=0.750,0.573,P<0.01)。结论喘息性支气管炎和哮喘存在有部分相同的发病机制。对评分小于5分的喘支患儿,如EOS计数和血浆总IgE升高,并且具有特应性体质的,则应尽早按哮喘进行预防干预。
- 张喜英赵文利何念海
- 关键词:喘息性支气管炎哮喘EOS总IGE
- 脱水治疗剧烈疼痛的腰椎间盘突出症40例临床观察
- 2001年
- 罗艳琳赵文利冯莉
- 关键词:脱水治疗疼痛腰椎间盘突出症
- 重庆市区新生儿及其生母血铅测定及影响因素调查被引量:10
- 2001年
- 目的 测定新生儿脐血铅及其生母血铅 ,探讨其间关系及影响因素。方法 采用非火焰原子吸收法测定全血铅含量。用自定的调查表调查并记录孕妇年龄、职业等相关因素并进行相关性分析。结果 新生儿脐血铅水平为 1 0 3 45± 3 8 69μg/L ,明显高于其母血铅水平 87 98± 3 7 71 μg/L ,且与其母血铅水平呈显著正相关 (P <0 0 1 )。新生儿脐血铅 >1 0 0 μg/L者占53 76% (50 /93 )。母亲年龄、孕期健康状况是新生儿血铅水平的主要影响因素。结论 本组新生儿铅中毒比例已相当高 ,预防儿童铅中毒应从其母孕期乃至孕前就应开始。治理环境铅污染已刻不容缓。
- 赵文利孔祥英刘力建
- 关键词:血铅铅中毒脐带血孕母
- 中国儿童感染性腹泻诊治进展
- 儿童感染性腹泻是一组广泛存在并严重危害儿童健康的胃肠道传染病,也是当今世界重要的公共卫生问题之一.虽然诊断方法日新月异,但仍没有真正广泛应用于临床尤其是农村和城市社区的诊断方法.WHO和联合国国际儿童紧急救援基金会推荐的...
- 何念海赵文利
- 关键词:感染性腹泻液体疗法病原学儿童
- 压电基因传感器检测巨细胞病毒PCR产物的实验研究被引量:4
- 2003年
- 目的 应用自行研制的压电基因传感器检测巨细胞病毒临床标本的PCR产物 ,探讨压电传感器检测核酸反应的可行性以及各种影响因素。方法 设计特异性DNA探针巯基法固定于传感器晶振表面并调节谐振频率在液相中稳定性达到± 1Hz ,定量加入 65份巨细胞病毒临床标本的PCR产物并观察核酸反应导致的频率变化情况 ,并与PCR产物的电泳结果作对照。结果 加入HCMVPCR阳性产物的传感器谐振频率明显下降 ,3 8例阳性产物的平均频率下降值为73 66Hz ,阴性产物的频率没有变化。与PCR电泳结果的阳性符合率为 86 8%,阴性符合率为 93 10 %。
- 陈庆海府伟灵边志衡陈鸣公衍文赵文利李晓文
- 关键词:压电石英晶体巨细胞病毒