赵晓利
- 作品数：2 被引量：7H指数：1
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 噬菌体展示短肽模拟脂多糖结合蛋白抗炎功能位点的研究被引量：7
- 2004年
- 目的 应用噬菌体随机 12肽库筛选脂多糖结合蛋白 (lipopolysaccharidebindingprotein ,LBP)具有抗炎作用的肽序列。方法 以LPS为目标分子 ,对噬菌体十二肽库进行亲合筛选 ,4轮筛选后 ,检测随机挑取的噬菌体克隆的结合活性和抑制活性 ,对可与LBP竞争性结合LPS的噬菌体克隆行细胞因子生成抑制实验和LPS内化抑制实验 ,对获得的阳性克隆进行DNA序列测定 ,推导外源肽氨基酸序列 ,并与LBP序列比较 ,确定LBP的抗炎功能位点。结果 随机挑取的 10 0个噬菌体克隆中 16个可与LBP竞争性结合LPS ,其中 7个噬菌体克隆对LBP的增敏LPS刺激PBMC分泌TNF α功能无作用 ,对这 7个克隆进行LPS内化抑制实验 ,其中 3个克隆可以抑制LBP增强LPS内化作用。测序发现这 3个阳性克隆融合多肽的序列均为FHTRWNYWPYLH ,与LBP一级结构氨基酸序列同源性低。结论 该
- 徐德斌钱桂生侯一峰赵晓利陈维中李淑萍
- 关键词：噬菌体随机肽库脂多糖结合蛋白功能位点
- 脂多糖结合蛋白抑制肽的筛选和鉴定
- 2005年
- 目的:获得具有抑制脂多糖结合蛋白(LBP)致炎作用的可溶性多肽。方法:以LPS为目标分子,对噬菌体12肽库进行亲和筛选,4轮筛选后,检测随机挑取的100个噬菌体克隆的结合活性和竞争抑制活性,将得到的可与LBP竞争性结合LPS的噬菌体克隆进行功能筛选,对获得的阳性克隆进行DNA序列测定,推导外源肽氨基酸序列,并与LBP序列比较,确定LBP致炎作用位点。固相法合成LBP抑制性多肽,并检测其生物学活性。结果:16个噬菌体克隆可与LBP竞争性结合LPS,其中9个噬菌体克隆可显著抑制LBP增敏LPS的致炎作用。9个阳性克隆融合多肽的核心序列为WKXRKXFXKXXG,与LBP的91-102位氨基酸序列有明显同源性。化学合成的12肽WKVRKSFFKLQG-NH2具有显著的抑制LBP致炎功能的作用。结论:此12肽具有抑制LBP致炎功能的活性。
- 徐德斌钱桂生侯一峰赵晓利
- 关键词：细菌噬菌体肽库脂多糖类肽类
