邹灿
- 作品数：10 被引量：24H指数：4
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- RNA干扰Oct4的表达对肝癌细胞生物学行为的影响被引量：1
- 2011年
- 【摘要】目的探讨干细胞相关基因Oct4与Wnt／β-catenin在人肝癌组织及肝癌细胞系中的相互作用。方法PCR法检测Oct4、Wnt／β-catenin及其他相关基因在肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织的表达差异。使用SiRNA-Oct4沉默人肝癌HepG2细胞Oct4的表达，实时荧光定量PCR法检测Wnt／β-catenin基因表达。检测RNAi后细胞迁移以及克隆形成能力。结果肝癌患者的上述组织中，Oct4和β-catenin在癌内表达最高，癌旁次之，正常肝最低。使用SiRNA-Oct4沉默人肝癌HepG2细胞Oct4后，Oct4表达明显下调，β-catenin、Wntl0b表现为与Oct4表达呈正相关，TCF3表达与Oct4呈负相关。RNAi后HepG2细胞的迁移能力、克隆形成能力均下降。结论Oct4在肝癌组织内高表达而在正常肝细胞中的表达极低。RNAi后HepG2细胞的迁移能力、克隆形成能力均下降可能与Wnt／β-catenin通路功能减弱有关。
- 周文波袁方均邹灿朱正鹏马建波戴宗晴张有顺
- 关键词：肝细胞RNA干扰OCT4WNT/Β-CATENIN通路
- rhEPO和rhG-CSF对小鼠CD90^+细胞的动员作用
- 2009年
- 目的:探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)和重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对小鼠外周血CD90+细胞的动员作用。方法:30只雄性昆明小鼠随机分为对照组、rhG-CSF组和rhEPO组。rhG-CSF 40μg.kg-1.d-1、rhEPO 250 IU.kg-1.d-1连续皮下注射5 d;对照组连续皮下注射生理盐水。每组均于最后一次注射后6 h收集外周血,计数有核细胞(ANC)和单个核细胞(MNC),流式细胞仪检测外周血ANC中CD90+、CD34+CD90+和CD90+CD34-细胞的比例。结果:应用rhG-CSF和rhEPO动员后,小鼠外周血中ANC和MNC的数量均较对照组增加(P<0.05),但rhG-CSF和rhEPO两组之间无差异(P>0.05)。流式细胞术检测显示rhEPO组外周血ANC中CD90+细胞比例为(56.49±9.06)%,较rhG-CSF组明显增加(P<0.05);而rhG-CSF组和对照组CD90+细胞占ANC的比例无明显差异(P>0.05)。rhEPO组的CD90+CD34-细胞比例增至(53.5±8.9)%,占CD90+细胞中绝大多数。结论:rhEPO和rhG-CSF均有较强的造血干细胞动员能力,但rhEPO对CD90+细胞的动员作用强于rhG-CSF,提示rhEPO对早期造血干细胞可能具有更强的动员作用。
- 郑芳陈龙程范军刘岐焕张有顺邹灿
- 关键词：促红细胞生成素粒细胞集落刺激因子
- Oct4及Wnt/β-Catenin在肝癌中的表达及相互作用被引量：8
- 2010年
- 目的探讨干细胞相关基因Oct4与Wnt/β-Catenin信号转导通路在人肝癌组织及肝癌细胞系中的表达及相互作用。方法选取肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织,采用免疫组化SP法检测其Oct4的表达;RT-PCR法及实时荧光定量PCR检测Oct4、Wnt5b、β-Catenin的mRNA表达。Si RNA-Oct4沉默人肝癌HepG2细胞Oct4的表达后,以实时荧光定量PCR检测Oct4、Sox2、Nanog、β-Catenin等干细胞相关基因的表达变化。结果 Oct4在肝癌组织和癌旁组织中均有表达,正常肝脏组织几乎未发现明显的Oct4表达;实时荧光定量PCR发现Oct4和β-Catenin在癌组织内表达最高,癌旁次之,正常肝最低,而Wnt5b却相反。使用Si RNA-Oct4沉默人肝癌HepG2细胞Oct4后,Oct4表达明显下调,β-Catenin、Sox2、Nanog表达亦下调,与Oct4呈正相关关系,而Wnt5b表达却上调,与Oct4呈负相关关系。结论 Oct4在肝癌组织中高表达,且为肝癌发生过程的早期事件;Oct4及Wnt/β-Catenin在肝癌中存在一定的相互作用。
- 周文波邹灿张有顺胡洪生朱正鹏郑启昌
- 关键词：干细胞WNT/Β-CATENIN小分子干扰RNA
- 冷冻与化疗在促进肝癌细胞凋亡中的协同作用研究
- 目的在细胞水平研究冷冻治疗对肝癌细胞系的影响,化疗增强冷冻治疗作用及二者在诱导细胞凋亡的作用。方法1、在-80℃、-40℃、-25℃、-20℃及-15℃的冷冻条件下,分别对肝癌细胞系Bel-7402、SMMC-7721及...
- 袁方均周文波邹灿张志云黄玲张有顺戴宗晴
- 关键词：肝癌冷冻化疗凋亡BAX/BCL-2耐药细胞系
- 文献传递
- 红细胞生成素对骨髓间充质干细胞干性的影响
- 2010年
- 有研究表明,当体外培养的骨髓间充质干细胞（MSC）形成集落时,其多向分化潜能具有逐渐丧失的倾向,且在体外扩增过程中MSC出现了自发分化的倾向,限制了其在临床上的应用.我们前期实验发现,在体外促红细胞生成素（EPO）能促进MSC的增殖和迁移能力.本实验拟用EPO作用于MSC,观察其未分化相关转录因子端粒酶逆转录酶（TERT）、POU5fl转录因子-4（OCT4）、性别决定基因相关转录因子-2（SOX2）和多潜能维持因子（Nanog）mRNA的表达情况,探讨EPO对MSC干性的影响.
- 叶丽花程范军陈龙鱼强邹灿张有顺
- 关键词：骨髓间充质干细胞干性相关转录因子端粒酶逆转录酶多向分化潜能性别决定基因
- 攻癌夺命组方对肝癌细胞系HepG2的杀伤作用研究被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨中药组方攻癌夺命汤对肝癌细胞系HepG2的杀伤作用及作用机制。方法:攻癌夺命汤煎剂与肝癌细胞系HepG2共培养后,分别用MTT法检测煎剂对肝癌细胞的杀伤作用,用RT-PCR方法检测缺氧诱导因子HIF1α(Hypoxia-inducible factor 1α)、凋亡相关分子Bax和Bcl-2等基因的mRNA表达变化。结果:攻癌夺命汤对肝癌细胞系HepG2的杀伤作用明显,且随浓度增高而增强,按生药量计6.375 g·L-1药液质量浓度3 d时的细胞毒作用达到80%以上;药物作用使HepG2的HIF1α的表达迅速升高,12 h即达到3倍以上;凋亡相关分子的变化在不同药液浓度有所差别:在2.125 g.L-1药液作用时Bax的增加幅度要大于Bcl-2。在4.250 g·L-1药液作用下,在早期Bcl-2和Bax都增加,24 h后二者表达均下降。结论:中药组方攻癌夺命汤对肝癌细胞系HepG2有很强的杀伤作用。药物作用后缺氧诱导因子HIF1α迅速升高提示其作用机理可能是影响到细胞呼吸所致。药物可能对细胞凋亡有一定作用。
- 许筱梅袁房均张有顺邹灿戴宗晴钱行
- 关键词：肝癌细胞细胞杀伤缺氧诱导因子
- 冷冻与化疗在促进肝癌细胞凋亡中的协同作用
- 2009年
- 在长期肝癌冷冻实践中可见，经冷冻后体内仍有残余病灶、AFP水平仍高的部分患者可长期生存，残余病灶逐渐变小、AFP水平逐渐降低甚至正常、病灶消失。因此不能单纯靠冷冻的物理损伤的病理过程解释。本研究旨在观察肝癌细胞体外冷冻结合化疗诱导凋亡的作用。
- 袁方均周文波邹灿张志云黄玲张有顺
- 关键词：肝癌细胞凋亡冷冻后化疗病理过程诱导凋亡
- 肝癌细胞系中Oct4与Wnt/β-catenin和TGF-β信号通路的相互影响被引量：4
- 2011年
- 目的探讨干细胞相关基因Oct4与Wnt/β-catenin及TGF-β信号通路在肝癌细胞系中的相互作用。方法应用RT-PCR法检测Oct4、Wnt/β-catenin及TGF-β信号通路相关基因β-catenin、Wnt10b、TCF3及ELF、Smad3和Smad4在肝癌组织及细胞系中的表达;使用siRNA沉默人肝癌HepG2细胞Oct4和TCF3的表达,实时荧光定量RT-PCR法检测Wnt10b、β-catenin、TCF3及ELF、Smad3和Smad4等基因的表达变化。结果 Oct4和β-catenin、Wnt10b、TCF3及ELF、Smad3和Smad4在肝癌组织及细胞系中同时表达;siRNA-Oct4沉默人肝癌HepG2细胞Oct4后,Oct4表达明显下调,β-catenin、Wnt10b随之下调达40%～50%左右,而TCF3表达升高到3倍左右;同时ELF、Smad3和Smad4均下降到原来的1%以下;而siRNA-TCF3沉默TCF3后,Oct4的表达也升高2～3倍;ELF升高亦达2～3倍,Smad3和Smad4也略有升高。结论 Oct4和β-catenin、Wnt10b、TCF3及ELF、Smad3和Smad4在肝癌组织及细胞系中同时表达提示彼此之间有相互作用。RNAi实验证明Oct4对Wnt/β-catenin及TGF-β信号通路的成员有调控作用;Oct4与TCF3之间的负反馈作用值得深入研究。
- 袁方均周文波邹灿胡洪生张志云戴宗晴张有顺
- 关键词：OCT4WNT/Β-CATENINTGF-ΒRNAI肝细胞性肝癌
- 介导MDR1的RNAi腺病毒载体的构建被引量：2
- 2006年
- 目的介导MDR1的RNAi腺病毒载体,探讨RNA干扰MDR1基因对人肝癌细胞的作用。方法根据MDR1mRNA序列构建表达MDR1mRNA特异的shRNA的腺病毒穿梭质粒pshuttle-MDR1。与腺病毒载体体内重组为pAd-MDR1后转染人肝癌细胞SMMC-7721,以FCM检测细胞表面膜蛋白P-gp表达阳性率,以共聚焦显微镜检测细胞内Rh123的潴留,WesternBlot检测P-gp蛋白量的变化。结果构建成pshuttle-MDR1经限制性酶切和PCR证实与设计一致,将pAd-MDR1转染肝癌细胞SMMC-7721后,FCM检测细胞表面膜蛋白P-gp表达阳性率为22.9%和30.8%,远低于对照组(85.8%)。WesternBlot经病毒感染的SMMC-7721/R的P-gp含量明显低于对照SMMC-7721/R,而与SMMC-7721/S细胞接近。结论成功构建了pshuttle-MDR1腺病毒载体,并有效干扰了肝癌细胞细SMMC-7721MDR1的表达。
- 张志云郑启昌戴宗晴张有顺邹灿黄玲王菊
- 关键词：RNAI肝癌细胞多药耐药基因腺病毒载体
- 干细胞相关基因在肝癌细胞系中的表达被引量：6
- 2009年
- 目的了解Oct4、Sox2、Nanog、SMO、β-Catenin、Wnt5b等干细胞相关基因在4株人肝癌细胞系SMMC7721、Bel-7402、HepG2、MHCC-97和正常人肝脏细胞系L02中的表达情况，并比较不同细胞系中各基因量的差异和对全反式维甲酸（tRA）的反应。方法逆转录聚合酶链反应测定4株人肝癌细胞系中Oct4、Sox2、Nanog、SMO、β—Catenin、Wnt5b mRNA的表达，实时荧光定量PCR比较不同细胞中各基因量的差异以及对tRA的反应。单因素方差分析比较各基因在不同细胞系中的表达差异。结果干细胞相关基因Oct4、Sox2、Nanog、SMO、β-Catenin和Wnt5b在4株人肝癌细胞系SMMC-7721、Bel-7402、HepG2、MHCC-97和正常人肝脏细胞系L02中有不同程度的表达（P〈0．05）；人肝癌细胞系HepG2和正常人肝脏细胞系L02对tRA的反应也存在明显差异（P〈0．05）。结论干细胞相关基因在人肝癌细胞系中不同程度的表达，不同肝癌细胞系中这些基因表达有一定的差异，可能与其生物学特性不同有关；人肝癌细胞系HepG2中Oct4和Sox2的表达调控不同于胚胎干细胞。在肝癌细胞中可能存在着Oct4对于Wnt／β-catenin信号转导通路的调节作用。
- 邹灿袁方均周文波黄玲王菊张有顺
- 关键词：干细胞基因全反式维甲酸甲基化
