陈国兵
- 作品数：12 被引量：46H指数：5
- 供职机构：东南大学医学院病原生物学与免疫学系更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金铁道部科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 戊型肝炎病毒摩洛哥株非编码区基因序列鉴定及基因型分型被引量：8
- 2004年
- 目的 检测戊型肝炎病毒 (HEV)摩洛哥株非编码区 (UTR)序列 ,探讨HEV非编码区序列能否作为其基因型分型的依据。方法 使用基于RNA连接酶的cDNA末端快速扩增法 (RLM RACE)扩增HEV摩洛哥株 5′和 3′端片段并测序。所得序列使用LASERGENE和PHYLIP软件包与其他 2 9株HEV序列比较。结果 只有基于甲基化帽子结构的RLM RACE扩增出了 5′端片段。HEV摩洛哥株 5′端UTR有 2 6个核苷酸 ,3′端polyA之前有 6 5个核苷酸。基于 3′端UTR序列的进化树与基于全基因序列的进化树不全相同。HEV 3′端至少需要 10 0个左右核苷酸长的序列才可进行HEV基因型分型。结论 HEV摩洛哥株 5′端有甲基化帽子结构。HEV 3′端UTR序列不能完全代替全基因组序列进行基因型分型。部分序列替代全基因组进行基因型分型时需要考虑其部位和长度因素。
- 陈国兵孟继鸿
- 关键词：HEV戊型肝炎病毒非编码区CDNA末端快速扩增进化树
- γc家族新成员:白细胞介素21被引量：4
- 2003年
- 白细胞介素 2 1(Interleukin 2 1,IL 2 1)是最近发现的γc家族新成员 ,和IL 2、IL 15、IL 4高度同源 ,主要由活化的CD4 + T细胞产生。IL 2 1受体复合体由特异的IL 2 1受体识别亚单位和γc信号传导亚单位组成 ,高表达于胸腺、骨髓基质细胞、外周B细胞和NK细胞。IL 2 1能促进骨髓NK细胞增殖与分化 ,与抗CD4 0抗体协同刺激B细胞增殖 ,与抗CD3抗体协同刺激T细胞增殖。
- 陈国兵王净
- 关键词：白细胞介素21NK细胞
- mGM-CSF重组质粒的构建、表达及活性鉴定被引量：4
- 2004年
- 目的 构建pc mGM CSF重组质粒载体 ,为mGM CSF基因治疗肿瘤的研究奠定基础。方法 采用RT PCR方法从小鼠脾脏中获得目的基因mGM CSF ,克隆于 pcDNA3 .1/Myc His( -) (A )质粒上 ,成为pc mGM CSF ,用PCR、酶切进行鉴定 ,然后用脂质体转染小鼠骨髓瘤细胞SP2 / 0 ,用G 418筛选后通过RT PCR和SDS PAGE鉴定 ,将转染SP2 / 0上清加入NFS 60细胞 ,检测蛋白活性。结果 重组质粒中含有mGM CSF基因 ,在SP2 / 0中有表达 ,且表达产物能分泌到肿瘤细胞外 ,分泌到细胞外的产物用mGM CSF依赖株NFS 60细胞检测证明具有生物学活性。结论 成功构建含mGM CSF真核表达重组质粒 。
- 洪晓武窦骏陈国兵陈峻崧赵枫姝
- 关键词：重组质粒活性鉴定基因治疗粒细胞巨噬细胞集落刺激因子
- GM-CSF基因免疫治疗小鼠骨髓瘤的实验研究
- 2006年
- 目的:探讨mGM-CSF基因免疫小鼠是否可以诱发小鼠对肿瘤的免疫应答。方法:用SP2/0肿瘤细胞皮下接种Balb/c小鼠建立肿瘤动物模型,再以皮下或肌肉注射空质粒或重组质粒4次,共400μg。8周后观察小鼠的抑瘤率、肿瘤质量、肿瘤组织淋巴细胞的浸润情况,检测血清中IFN-γ和IL-2浓度,MTT法体外检测CTL、NK细胞活性。结果:基因免疫Balb/c小鼠8周后,重组质粒皮下注射组肿瘤质量[(0.880±0.405)g]轻于对照组[(1.548±0.221)g,P<0.01];重组质粒肌肉注射组肿瘤质量[(0.378±0.411)g]明显轻于对照组[(1.554±0.249)g,P<0.001];重组质粒肌肉注射组肿瘤组织可见淋巴细胞浸润;IFN-γ和IL-2的浓度及CTL、NK细胞活性显著高于对照组。结论:GM-CSF基因免疫能诱发小鼠抗肿瘤作用,肌肉注射比皮下注射效果好。
- 洪晓武窦骏赵枫姝陈峻崧陈国兵张爱凤
- 关键词：粒细胞巨噬细胞集落刺激因子基因免疫荷瘤鼠抗瘤活性
- 小鼠IL-21 cDNA克隆及其在肿瘤基因治疗中的初步研究
- 目的:克隆小鼠白细胞介素21(mIL-21)基因,构建其真核表达质粒,观察mIL21基因治疗小鼠Sp2/0皮下肿瘤的效果,并分析其可能机制.方法:分离BALB/c小鼠脾细胞,Con A活化后用RT-PCR方法扩增mIL-...
- 陈国兵
- 关键词：白细胞介素21克隆肿瘤基因治疗NKCTL
- 文献传递
- mIL-21基因治疗小鼠肿瘤及其机制的初步研究被引量：2
- 2005年
- 建立小鼠Sp2/0皮下肿瘤模型,以我们构建并鉴定过的真核表达质粒peDNA3.1/mIL-21在瘤体内直接注射,考察mIL-21基因治疗对小鼠Sp2/0肿瘤的疗效。结果显示pcDNA3.1/mIL-21质粒治疗对小鼠皮下Sp2/0肿瘤有一定的生长抑制作用,CTL和NK细胞毒活性明显增强,IFN-γ分泌升高显著,但抗体无明显升高。表明mIL-21基因治疗的抗肿瘤效应,可能和细胞免疫功能增强有关。
- 陈国兵窦骏赵枫姝陈峻崧褚莉莉唐权
- 关键词：白细胞介素21肿瘤基因治疗CTLNK
- 结核杆菌Ag85A和mGM-CSF共同表达载体的构建与CTL活性的诱导被引量：6
- 2004年
- 构建、鉴定结核杆菌Ag85A和细胞因子GM CSF共同表达质粒 ,为研究新型抗结核杆菌DNA疫苗提供新的策略。先从质粒pBSby5中扩增出结核杆菌Ag85A基因序列并插入到质粒pIRES上成为pI85A ,用PCR方法从pc mGM CSF质粒中扩增出mGM CSF ,构建于pI85A质粒上 ,成为共同表达质粒pI85AGM。然后转染 772 1细胞 ,进行蛋白的表达和鉴定。结果经酶切鉴定和DNA测序证实重组质粒构建正确。通过RT PCR、SDS PAGE、Westernblot检测证实Ag85A与mGM CSF基因的转录和蛋白表达正确。Ag85A与mGM CSF免疫组小鼠的CTL活性明显增强。表明细胞因子GM CSF和结核杆菌Ag85A共同表达载体构建成功 ,并能诱导小鼠的CTL活性 。
- 陈峻崧窦骏赵枫姝陈国兵房雪峰洪晓武唐权
- 关键词：结核杆菌GM-CSF基因疫苗
- 结核杆菌基因疫苗构建物对小鼠的免疫效应
- 目的:设计与构建结核杆菌Ag85A和细胞因子GM-CSF基因疫苗构建物,研究其在小鼠体内的免疫效应。方法:从结核杆菌H37Rv株基因组DNA中扩增出结核杆菌Ag85A基因序列并插入到质粒pIRES上成为pI85A,用PC...
- 窦骏陈峻崧陈国兵赵枫姝褚莉莉唐权房雪锋潘猛
- 关键词：结核杆菌GM-CSF基因疫苗
- 文献传递
- 小鼠白细胞介素21 cDNA的克隆及真核表达质粒的构建被引量：17
- 2004年
- 目的 :克隆小鼠白细胞介素 2 1(IL 2 1)基因 ,构建真核表达质粒 ,用以进行肿瘤的基因治疗。方法 :用RT PCR法 ,从ConA活化的小鼠T细胞中扩增IL 2 1cDNA ,克隆入哺乳动物细胞高效表达质粒 pcDNA3.1中 ,构建重组mIL 2 1真核表达质粒。重组体用载体上的通用引物和PCR下游引物为测序引物 ,鉴定克隆的正确性。将已鉴定的重组质粒用脂质体法转染Sp2 / 0细胞 ,用RT PCR法鉴定转染细胞中IL 2 1基因的表达 ,用MTT比色法检测表达的mIL 2 1诱导的NK细胞杀伤活性的增强。结果 :正确构建了重组真核表达质粒 pcD NA3.1/mIL 2 1,并在转染的细胞中检测出IL 2 1的表达 ,表达的mIL 2 1可在体外增强NK细胞的杀伤活性。结论 :成功地构建了重组真核表达质粒pcDNA3.1/mIL 2 1,为进一步在肿瘤动物模型中进行IL 2
- 陈国兵窦骏陈峻崧洪晓武
- 关键词：白细胞介素21RT-PCR重组质粒
- 肿瘤抗原P1A与细胞因子mGM-CSF共表达载体的构建和表达被引量：5
- 2004年
- 目的 :构建并鉴定细胞因子mGM CSF和肿瘤特异抗原P1A共表达载体 ,为研究新型的肿瘤疫苗提供新的策略。方法 :以PCR方法从pCI neo P1A中扩增出P1A编码基因片段 ,构建于pRSC质粒上 ;再从pORF mGM CSF中扩增出mGM CSF基因片段 ,插入pRSC P1A重组质粒P1A基因的上游。以酶切和DNA测序进行鉴定。并将鉴定过的重组质粒以脂质体法转染 772 1细胞 ,用RT PCR法鉴定转染细胞中P1A基因和mGM CSF基因的表达。结果 :经酶切鉴定和DNA测序证实mGM CSF和P1A重组质粒构建正确 ,并在转染此质粒的 772 1细胞中检测出了P1A和mGM CSF基因的表达。结论 :成功构建mGM CSF和P1A的共表达载体 。
- 赵枫姝陈峻崧房雪峰陈国兵洪晓武窦骏
- 关键词：细胞因子MGM-CSF肿瘤疫苗
