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陈娴: 作品数：13 被引量：43H指数：4; 供职机构：贵阳医学院贵州省医学分子生物学重点实验室更多>>; 发文基金：国家自然科学基金贵州省科技攻关计划贵州省国际科技合作计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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氯离子通道蛋白及β-肌动蛋白基因在人胃癌组织中的表达被引量：3: 2012年; 目的:研究Hp(Helicobacter pylori,Hp)感染在胃癌发生发展中的作用。方法:运用实时定量PCR法检测氯离子通道蛋白基因(Chloride ion channel protein,CICP)及β-肌动蛋白基因在50例人胃癌组织的表达,并分析其表达与临床病理特征和胃癌组织中Hp感染状态的关系。结果:两个基因在人胃癌组织及淋巴结组织的表达显著高于癌旁组织(P<0.05)。氯离子通道蛋白基因的表达与胃癌患者pTNM分期及患者生存期相关(P<0.05),而β-肌动蛋白基因的表达与pTNM分期及淋巴结转移相关(P<0.05);人胃癌组织中Hp的感染与氯离子通道蛋白及β-肌动蛋白基因的表达上调相关(P<0.05)。结论:Hp的感染可以上调胃癌组织中氯离子通道蛋白及β-肌动蛋白基因的表达,检测这两个基因的表达对预测胃癌患者的预后有一定作用。; 王妍周建奖谢渊赵艳陈娴李毅; 关键词：幽门螺杆菌 Β-肌动蛋白

幽门螺杆菌毒素相关蛋白CagA处理胃癌细胞株后比较蛋白质组学研究: 目的:用含幽门螺杆菌NCTC11637(Helicobacter pylori，Hp)毒素相关基因A(cytotoxin associated gene A，cagA)的真核表达载体pcDNA3.1ZEO(-)/cagA...; 陈娴; 关键词：胃癌病理机制蛋白表达; 文献传递

免疫蛋白质组学与胃癌: 2010年; 免疫蛋白质组学是蛋白质组学一个相对新颖的概念,该方法在鉴定特异性抗原或抗体方面具有敏感、快速,且节省试剂的优点。近年来,对不同幽门螺杆菌菌株及幽门螺杆菌感染所致的不同胃部病变之间的研究成为胃癌免疫蛋白质组学的主要研究策略,该方法将为胃癌的临床诊治提供重要的肿瘤标志物。本文就有关免疫蛋白质组学在胃癌方面的研究作一综述。; 陈娴周建奖; 关键词：双向电泳蛋白质阵列

幽门螺杆菌诱导的差异蛋白基因在胃癌组织中的表达: 2012年; 目的研究幽门螺杆菌(Hp)诱导的差异蛋白基因在胃癌中的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法实时荧光定量RT-PCR检测Hp诱导的乳酸脱氢酶(LDH)、二氢硫辛酰胺脱氢酶(DLD)、mRNA前体处理因子19同系物(PRP/PSO4)、ATP合酶和Ran-特异性GTP酶活化蛋白(RanGAP)等差异蛋白基因在70例胃癌组织、淋巴结组织及癌旁组织中的表达,分析其表达与临床病理参数的关系。结果 LDH、DLD、PRP/PSO4和ATP合酶基因在胃癌组织中的表达量分别是癌旁组织的3.32,3.36,4.37及2.73倍(P均<0.05),在淋巴结组织中的表达量分别是癌旁组织的2.91,2.72,3.16及2.46倍(P均<0.05);LDH、DLD基因表达与肿瘤大小及生存时间、pTNM分期及伴有淋巴结转移有关(P均<0.05),PRP/PSO4及ATP合酶仅与淋巴结转移有关(P<0.05)。结论 LDH、DLD、PRP/PSO4和ATP合酶基因在胃癌及淋巴结组织中高表达,其LDH和DLD的高表达与胃癌患者预后不良相关。; 徐文杰周建奖赵艳谢渊陈娴; 关键词：胃癌乳酸脱氢酶 ATP合酶

shRNA表达载体的改建及鉴定: 2011年; 目的通过改建pSilencer3.1-H1载体快速有效筛选重组shRNA表达载体,并可使线性化载体环化,长期保存。方法制备含有单一限制性内切酶NotⅠ识别序列的双链DNA插入片段,与BamHⅠ和HindⅢ酶切线性化的shRNA表达载体pSilencer3.1-H1连接,构建载体pSilencer3.1-H1/NotⅠ,再用BamHⅠ和HindⅢ双酶切pSilenc-er3.1-H1/NotⅠ,将含靶向目的基因JAK2siRNA表达框的DNA模板与其连接,构建pSilencer3.1-H1/JAK2的shRNA表达载体,提取质粒DNA,用NotⅠ进行单酶切,快速选择阳性克隆,选取不能被NotⅠ切开的质粒进行测序鉴定。随后将pSilencer3.1-H1/JAK2转染胃癌细胞系,用Western blot检测JAK2蛋白的表达。结果通过测序证实pSilencer3.1-H1/NotⅠ和含JAK2siRNA表达框的表达载体成功构建,将其转染胃癌细胞系AGS后,抑制了JAK2蛋白的表达。结论通过对pSilencer3.1-H1表达载体的改建可以快速有效地筛选shRNA表达载体。; 陈娴谢渊赵艳周建奖; 关键词：RNA干扰基因沉默

幽门螺杆菌毒素蛋白CagA诱导的蛋白的差异表达分析及其基因在胃癌组织中的表达被引量：1: 2011年; 为了研究胃癌细胞中幽门螺杆菌(Hp)毒素蛋白CagA诱导的蛋白差异表达及其基因在人胃癌组织中的表达,用Hp感染胃癌细胞系SGC-7901和AGS及用含CagA基因的表达载体稳定转染SGC-7901细胞,构建3组实验模型.提取各组细胞的总蛋白进行双向凝胶电泳,筛选3组重叠的差异表达蛋白质斑点进行质谱鉴定.共获得135个差异表达的蛋白质,其中上调蛋白质73个,下调蛋白质62个.鉴定出10个差异表达蛋白质,其中有6个差异表达蛋白是首次发现,它们主要参与细胞的能量代谢和信号转导等.最后定量检测了这10个差异表达蛋白基因在人胃癌组织中的表达,发现有4个基因高表达和1个基因低表达.本结果将为研究幽门螺杆菌感染引起胃癌的分子机制提供新的线索.; 陈娴周建奖谢渊赵艳徐文杰王妍; 关键词：幽门螺杆菌胃癌蛋白质组学

幽门螺杆菌感染蒙古沙鼠胃癌模型的建立及蛋白质组学研究被引量：11: 2014年; 目的：构建幽门螺杆菌（ helicobacter pylori， HP）长期感染的动物模型，寻找与胃癌相关的差异表达蛋白，进一步阐明HP致胃癌的病理机制。方法蒙古沙鼠共50只，雄性，出生4～5周，体质量60～100 g，通过HP长期感染蒙古沙鼠构建动物模型，选择感染后3、6、12及24个月处死沙鼠，取胃组织，进行HP培养，同时用 PCR 扩增HP 16s rRNA基因及组织切片银染法检查HP感染定植情况，病理检查其胃组织病理改变。提取胃组织蛋白进行双向电泳，选取随时间点其蛋白表达呈增加趋势的差异蛋白质斑点进行液相色谱－质谱联用质谱鉴定，并检测差异蛋白基因在人胃癌及淋巴结组织中的表达。结果幽门螺杆菌感染3个月HP开始定植在鼠的胃组织，一直持续到24个月。病理检查可见急性胃炎、萎缩性胃炎、肠上皮化生及胃癌病理表现。蛋白组学分析共得到78个差异蛋白质，其中上调蛋白质36个，下调蛋白质42个，质谱鉴定出10个差异表达的蛋白质，包括乳酸脱氢酶、ATP合成酶、脂肪酸结合蛋白、细胞色素氧化酶C、过氧化物还原酶－4、过氧化物还原酶、transgelin、琥珀酰CoA连接酶、角蛋白－8、二硫化物异构酶A2。其中 transgelin、ATP 合成酶、乳酸脱氢酶基因在人胃癌和淋巴结组织高表达。结论 HP感染可能通过上调 transgelin、ATP合成酶、乳酸脱氢酶等基因的表达参与胃相关疾病的发生发展。; 赵艳谢渊陈娴徐文杰王妍周建奖; 关键词：胃肿瘤蛋白质组学

胃癌组织及转移淋巴组织中胃泌素基因的表达被引量：3: 2011年; 目的:分析胃癌患者癌组织及转移淋巴结组织中胃泌素基因的表达,进一步阐明胃泌素与胃癌发生、发展的相关机制,为胃癌的防治提供实验依据。方法:收集胃癌手术患者的癌组织、癌旁组织、淋巴结组织,提取及纯化总RNA,采用Taqman实时荧光定量PCR技术测定胃泌素mRNA的表达。结果:胃泌素mRNA表达在胃癌组织较癌旁组织降低,为癌旁组织的0.063倍;淋巴组织较癌旁组织增加,为癌旁组织的35.482倍;胃泌素mRNA在胃窦癌组癌组织及淋巴组织较胃体癌组增加,分别为胃体癌组的3.074倍和9.190倍;胃泌素mR-NA在淋巴转移组的癌组织及淋巴组织较未转移组增加,分别为未转移组的59.912倍和5.895倍;胃泌素mRNA在>T2组的癌组织及淋巴组织较≤T2组增加,分别为≤T2组1.540倍和13.833倍,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:胃泌素在胃癌的发生、发展中有重要的作用,胃泌素与胃癌发生部位、淋巴结转移及临床分型密切相关。; 赵艳谢渊王文玲汪苏陈娴周建奖; 关键词：胃肿瘤胃泌素类

transgelin基因在幽门螺杆菌感染胃癌细胞及人胃癌组织中的表达被引量：3: 2014年; 目的研究幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,HP）感染胃癌细胞及人胃癌、淋巴结组织中转凝蛋白基因（transgelin）的表达水平,探讨HP感染、transgelin基因与胃癌发生、发展的相关机制。方法用HP感染胃癌细胞系AGS和SGC-7901,同时收集胃癌患者手术切除的胃癌组织、切缘组织和淋巴结组织,提取及纯化总RNA。实时荧光定量PCR检测transgelin mRNA的表达水平,分析其与临床病理参数的关系。结果 transgelin mRNA在HP感染的AGS、SGC-7901细胞中的表达量增加,分别为对照细胞的11.39倍（t=30.025,P=0.000）、3.41倍（t=5.677,P=0.005）;transgelin mRNA在胃癌组织、淋巴结组织中的表达增加,分别是切缘组织的6.48倍（t=2.290,P=0.026）、2.64倍（t=2.043,P=0.046）;Ⅳ期胃癌组织transgelin mRNA表达量增加,是Ⅰ~Ⅱ期的2.32倍（t=2.111,P=0.049）;淋巴结转移组是无淋巴结转移组的2.93倍（t=2.123,P=0.043）。结论HP可上调transgelin基因的表达,transgelin基因可能参与胃癌的发生、发展,且与p TNM分期及淋巴结转移相关。; 赵艳谢渊王文玲陈娴汪苏周建奖; 关键词：胃癌幽门螺杆菌实时荧光定量聚合酶链反应

钙调蛋白、钙网蛋白及周期蛋白依赖性激酶1基因在胃癌组织中的表达被引量：5: 2013年; 目的研究钙调蛋白(CaM)、钙网蛋白(CRT)及周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)基因在胃癌组织中的表达,及其与胃癌发生发展的相关性。方法实时定量PCR法定量检测CaM、CRT及CDK1基因在人胃癌组织中的表达,并分析其表达与临床病理参数、幽门螺杆菌感染的关系。结果胃癌组织和淋巴结组织中CaM、CRT及CDK1基因的表达比癌旁组织高2.08～3.70倍,幽门螺杆菌感染组中此三个基因的表达比非感染组分别上调2.78～7.36倍。其中CaM基因的表达与生存时间相关,CDK1基因的表达与pTNM分期及淋巴结转移相关,而CRT基因的表达与肿瘤大小、生存时间及淋巴结转移相关。结论 Hp通过上调CaM、CRT及CDK1基因的表达参与胃癌的发生发展,联合检测三个基因对判断预后有一定作用。; 王妍周建奖谢渊赵艳陈娴; 关键词：幽门螺杆菌钙调蛋白钙网蛋白

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