陈常庆
- 作品数：125 被引量：512H指数：12
- 供职机构：中国科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金中国科学院院长基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 反义寡脱氧核苷酸在鸭体内抑制鸭乙型肝炎病毒复制与表达的研究被引量：5
- 1998年
- 目的研究反义核酸的抗病毒作用。方法设计合成了针对鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）前Ｓ（ＰｒｅＳ）基因区第９５１９６８位核苷酸的硫代反义寡脱氧核苷酸（ＡＳＯＤＮ），以２０μｇ／ｇ体重／日剂量对３只腹腔感染ＤＨＢＶ５２毒株后，血清ＤＨＢｓＡｇ及ＤＨＢＶＤＮＡ阳性鸭连续静脉注射１０天，同时以等体积生理盐水注射另３只感染鸭作为对照。结果对照鸭注射生理盐水后，血清ＤＨＢｓＡｇ及ＤＨＢＶＤＮＡ阳性未见明显改变，肝组织ＤＮＡＳｏｕｔｈｅｒｎ杂交在３０与２３ｋｂ左右杂交信号明显。注射ＡＳＯＤＮ鸭在１０天后，２／３鸭血清ＤＨＢｓＡｇ及ＤＨＢＶＤＮＡ量显著降低，３／３鸭肝组织中３０ｋｂ左右的杂交信号显著减弱，２３ｋｂ左右未见杂交信号。结论说明该段ＡＳＯＤＮ在鸭体内能部分抑制ＤＨＢＶ的复制与抗原表达。
- 何丽芳吴祥甫陈常庆陈常庆姚忻陈波
- 关键词：乙型肝炎病毒抗病毒治疗
- 乙型肝炎病毒preS1与肿瘤坏死因子融合肽基因的克隆和表达
- 1999年
- 为提高hTNFα和HBVpreS1(1～65)肽融合蛋白在大肠杆菌中的表达率,以及研究hTNFα和preS1(1～65)肽之间的联接肽段对hTNFα的影响,并引进蛋白酶切位点以利于融合蛋白中酶切制备preS1(1～65)肽,本文构建了5种含有两类不同基因接头和preS15′端经改造的hTNFα和HBVpreS1(1～65)肽的融合基因。然后分别将其插入表达载体pSB92中,并获得表达。SDSPAGE显示,不同结构的融合基因的表达水平不同,表达水平最高的pTPS5表达量达菌体总蛋白的60%。该表达产物经Westernblot验证,能分别特异地与抗hTNFα抗体与抗preS1抗体结合。稀释复性后,该融合蛋白还具有hTNFα的生理功能(对L929细胞的细胞毒活性),为一具有双功能活性的新的融合蛋白。经DNA序列测定表明,preS1(165)肽基因正确地融合在hTNFα基因之后。
- 陈波卢芳药立波苏成芝陈常庆
- 关键词：乙型肝炎病毒PRES1肿瘤坏死因子
- 对肝细胞具有专一亲和性的融合蛋白及其核苷酸顺序
- 陈常庆
- 乙型肝炎病毒表面抗原PrdS_1蛋白参与乙肝病毒与肝细胞受体的结合，同时也含有B细胞和T细胞的抗原决定簇，我们用PCR法合成了HBsAg-preS_1(1～65)肽段基因，将该基因融合在毒素蛋白基因（肿瘤坏死因子）之后，...
- 关键词：
- 关键词：融合蛋白肝细胞
- 两株中和性抗hTNFα单抗可变区与hTNFα相互作用的计算机模拟及实验研究
- 2000年
- 在SGI图形工作站上,用同源蛋白结构预测的方法,建立了2株中和性抗hTNFα小鼠单抗(1C3E6,3F6A10)可变区的三维结构模型;并在实验研究2株单抗表位特异性的基础上,根据2株单抗与hTNFα分子表面的形状、静电性、疏水性、氢键等性质,对2株单抗可变区与hTNFα分子的可能结合模式进行了模拟和分析。再根据结合模型,设计并制备了2个hTNFα突变体,然后从实验与计算机模拟两方面着手,对比研究了hTNFα突变前后与两株单抗的结合能力与结合方式的变化。对比研究结果支持了结合模型,该结合模型的建立,为下一步的抗体人源化或小分子化改造等打下了基础。
- 陈建军孙苗方佳刘惠陈常庆王德宝
- 关键词：HTNFΑ单克隆抗体
- 抗人IL－3McAb杂交瘤细胞系的制备与鉴定
- 1995年
- 抗人ＩＬ－３ＭｃＡｂ杂交瘤细胞系的制备与鉴定黄传书，鞠躬（第四军医大学神经科学研究所神经免疫研究室，西安７１００３２）陈常庆，杨立宏（中国科学院上海生物工程中心，上海２００２３３）１９８７年荷兰学者Ｄｅｒｓｓｅｒｓ从分裂原刺激人外周血细胞。ｃＤＮＡ文...
- 黄传书鞠躬陈常庆杨立宏
- 关键词：白细胞介素3单克隆抗体杂交瘤细胞系
- 金属螯合四肽单克隆抗体可变区基因在噬菌体中的表达
- 1996年
- 目的：在噬菌体中表达金属螯合四肽单克隆抗体可变区基因，为筛选小肽半抗原作准备，方法：将该基因克隆入噬菌体ｐＣｏｍｂ３中，以融合表达的降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）Ｎ端十三肽作为标记，并用酶标抗体进行检测。结果：ＥＬＩＳＡ检测呈阳性反应。结论：在噬菌体中能够表达该基因，且表达产物能与金属螯合四肽半抗原较强的结合。
- 韩丽英方佳陈常庆苏成芝
- 关键词：抗体酶单克隆抗体可变区基因噬菌体
- 中国人前列腺特异膜抗原基因的克隆及序列测定被引量：1
- 2001年
- 目的克隆人前列腺膜特异抗原 ( prostate- specific m embrane antigen,PSMA)的编码区 c DNA片段。方法从前列腺癌组织提取总 RNA,利用 RT- PCR技术扩增出人 PSMA基因编码区序列 ,将其克隆至 pc DNA3 .1载体中 ,并行序列测定。结果序列测定表明 ,克隆获得的 2 2 5 3 bp片段与文献报道的人 PSMA基因编码区 c DNA序列一致。结论本研究为进一步研究
- 叶传忠张芳林张永康陈常庆
- 关键词：反转录聚合酶链反应CDNA克隆PSMA前列腺癌
- 乙型肝炎病毒PreS基因的克隆表达及亲和层析纯化被引量：10
- 2001年
- 目的 获取乙型肝炎病毒前 S区基因 (HBVpre S) ,序列测定正确后进行融合表达 ,为今后研究其机制及应用创造条件 .方法 利用乙型肝炎病毒基因组为模板体外扩增HBVPre S基因后进行基因克隆 .目的基因经测序正确后克隆入融合表达载体 p RSET- C中 ,转化大肠杆菌 JM10 9(DE3) .目的基因经 IPTG诱导 ,由 T7启动子调控表达了氨基端带 6个连续组氨酸残基的 HBV- Pre S蛋白 ,在变性条件下对目的蛋白进行纯化 .结果 成功地扩增到 pre S区全长基因 ,得到融合 6个 His的 HBV- Pre S蛋白纯度大于 90 % .结论 构建了乙型肝炎病毒前 S区基因的重组表达载体 ,获得了稳定表达的工程菌 .
- 杨敏刘新平韩炯张晓光药立波苏成芝陈常庆
- 关键词：乙型肝炎病毒基因克隆基因表达亲和层析纯化
- MTT比色法测定7株抗hIL-5mAb对TF-1细胞的增殖抑制活性
- 1998年
- 利用人红白血病细胞系（ＴＦ－１）细胞具有对ｈＩＬ－５依赖生长的特性，采用四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）法〔１〕对所制备的抗ｈＩＬ－５ｍＡｂ进行活性测定。１材料与方法１．１细胞和试剂ＴＦ－１由中国科学院上海生物工程研究中心保存，ｈＩＬ－５标准品为英国Ｐｅｒｏ...
- 史皆然方佳孙滨卢芳陈常庆
- 关键词：单克隆抗体免疫活性比色法
- 用人工神经网络方法确定真核基因启动子被引量：2
- 1994年
- 本文运用神经网络方法，并结合分子生物学的有关理论与实验统计事实，对真核基因启动子区域进行了识别．文中选择了人类、牛、猪、猫、山羊、兔、绵羊、大鼠、小鼠、小马、仓鼠、鸡、鸭、大豆等共13种真核生物360个基因组，作为研究对象．学习组选择了300个基因组，预测组选择了60基因组．结果表明，将神经网络模型与基因理论相结合，能够运用计算方法，从大量的可能启动子组合中排列出唯一的启动子区域．
- 蔡煜东周斌陈常庆陈德辉
- 关键词：真核基因启动子人工神经网络
