陈炜
- 作品数：45 被引量：199H指数：7
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家科技重大专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学哲学宗教更多>>
- 携带A53T突变人α突触核蛋白转基因帕金森病大鼠模型的建立被引量：3
- 2013年
- 目的大鼠在神经系统疾病模型方面比小鼠有更好的表现，建立人α-synA53T突变型转基因大鼠模型，为研究帕金森病发病提供更优良的疾病模型。方法构建人α—synA53T表达载体，显微注射法制备转基因大鼠。PCR法鉴定转基因首建鼠及其子代基因型。Western blot检测转基因大鼠脑组织中人α-syn蛋白的表达。免疫组化和免疫荧光观察中脑黑质酪氨酸羟化酶阳性神经元数目变化，观察人α-syn蛋白在转基因大鼠黑质神经元中的表达和分布。Rotatingrod实验和步态分析系统评价转基因大鼠的行为学改变。结果获得1个α-synA53T高表达且可以稳定传代的转基因大鼠品系。转基因大鼠中脑黑质酪氨酸羟化酶（TH）阳性神经元数目减少69％（P〈0．05），残存神经元胞浆中有大量的α—syn蛋白聚集。转基因大鼠在滚轴上保持平衡的时间显著减少40％～60％（P〈0．05），并表现出步态障碍如步宽加大、摆动期缩短和足迹最大接触面积减小等。结论建立了人α-synA53T突变型转基因的帕金森病大鼠模型。
- 张丽陈炜张旭孙秀萍杨亚军张连峰
- 关键词：转基因Α-突触核蛋白帕金森病突变
- 心脏特异表达LMNA^E82K转基因小鼠的建立被引量：4
- 2009年
- 目的建立心脏特异表达LMNAE82K转基因小鼠,为研究LMNAE82K与心肌病发病机制的关系提供工具动物。方法把LMNAE82K基因插入α-MHC启动子下游,构建转基因表达载体,显微注射法建立C57BL/6JLMNAE82K转基因小鼠,PCR鉴定转基因小鼠的基因型,采用Western Blot鉴定LMNAE82K在心脏组织中的表达,H&E染色和超声检测转基因小鼠心脏的病理改变。结果建立了2个心脏组织特异表达LMNAE82K的转基因小鼠品系。超声检查显示转基因小鼠心室壁变薄,收缩期容积和舒张期容积增加,射血分数及短轴缩短率降低。结论LMNAE82K转基因小鼠具有LMNAE82K引起的家族性扩心病有类似的病理变化,为研究LMNAE82K与心肌病发病机制的关系的研究提供了有价值的疾病动物模型。
- 吕丹陈炜冯娟张伟王书美张丽曹兴水秦川张连峰
- 关键词：核纤层蛋白突变转基因扩张型心肌病
- 双胞胎同患皮肤血管瘤2例
- 2000年
- 近见两女性双胞胎儿同患皮肤血管瘤,现报告如下。 例1,女,出生于1998年10月。出生时即见红疹和红斑。在患儿的左颊和背部可见红色皮疹,当时呈针尖大小;枕部可见大片红斑,压之褪色。患儿无任何自觉症状。体检:发育、营养一般,系统检查未见明显异常。皮肤科检查:左侧面颊和左肩胛骨分别可见直径约1cm和1.5cm的圆形或类圆形红色斑块,略高出皮面,色泽鲜艳,压之不易褪色,表面略粗糙。
- 陈炜顾恒等
- 关键词：双胞胎皮肤血管瘤
- 利用dCas9-FokⅠ编辑大鼠Dnmt1基因被引量：1
- 2016年
- CRISPR/Cas9的发现为多种生物的基因编辑提供了强有力的工具。然而,该系统在提供靶向性基因修饰的同时,会产生一些不需要的突变,即脱靶现象。为提高CRISPR/Cas9的特异性,我们将野生型Fok I核酸内切酶的功能结构域与催化功能区失活的Cas9蛋白(dCas9)进行融合,形成融合蛋白用于降低脱靶效应。FokⅠ是一种依赖于二聚化才能行使内切酶活性的核酸酶,在本研究中,通过将FokⅠ功能结构融合到dCas9的N端,构建表达质粒p ST1374-dCas9-FokⅠ。我们前期研究中,发现一个sgRNA在介导Cas9编辑Dnmt1基因建立条件敲除大鼠时,存在显著的脱靶现象。以此为基础,我们利用dCas9-FokⅠ/sgRNA系统编辑大鼠Dnmt1基因,研究该系统是否能够进行基因编辑以及是否能够提高基因编辑特异性。将转录好的dCas9-FokⅠmRNA和sgRNA显微注射到SD大鼠的受精卵中,用于产生基因编辑大鼠。通过显微注射以及胚胎移植,最终获得43只F0代大鼠,其中两只在靶点位置包含突变,突变效率达4.5%。对脱靶情况进行分析,结果显示,无脱靶现象存在。综上,表明dCas9-FokⅠ/sgRNA可以应用于编辑大鼠基因,并能显著提高特异性。尽管dCas9-FokⅠ/sgRNA系统相比于Cas9/sgRNA系统,基因编辑效率有所下降,但是该技术的发展为基因治疗提供了可供选择的潜在工具。
- 张旭于磊陈炜高珊潘硕张连峰马元武
- 关键词：DNMT1
- Dkk3心脏特异表达转基因小鼠心脏功能分析被引量：3
- 2009年
- 目的建立心脏特异表达Dkk3转基因模型小鼠,研究Dkk3对心脏发育及和心肌病的调节作用。方法把Dkk3基因插入心肌特异启动子-αMHC下游,构建转基因表达载体,显微注射法建立C57BL/6J Dkk3转基因小鼠,PCR鉴定转基因小鼠基因型,采用Northern blot检测Dkk3在心脏组织中的表达,HE染色和超声检查转基因小鼠心脏结构和功能。结果建立了3个不同表达水平的Dkk3转基因小鼠品系。转入的Dkk3基因在心脏组织的表达水平均高于同龄对照小鼠。组织学分析显示Dkk3小鼠室壁变厚,心腔减小,心肌细胞排列轻度紊乱。超声检查显示心室壁变厚,收缩期容积和舒张期容积显著减小,射血分数,短轴缩短率增加。结论Dkk3过表达导致转基因小鼠室壁变厚,心腔减小,心肌细胞排列轻度紊乱,心肌舒张功能轻度失调。
- 吕丹董伟陈炜张丽张伟赵海苹秦川张连峰
- 关键词：转基因心脏
- 利用dCas9-FokI编辑大鼠Dnmt1基因
- 目的 CRISPR/Cas9的发现为多种生物的基因编辑提供了强有力的工具。然而,该系统在提供靶向性基因修饰的同时,会产生一些不需要的突变,即脱靶现象。为提高CRISPR/Cas9的特异性,我们将野生型FokI核酸内切酶的...
- 张旭于磊陈炜高珊潘硕张连峰马元武
- 关键词：DNMT1
- 心肌α-MHC启动子驱动的人KIAA0174基因转基因小鼠的建立
- 2009年
- 目的:建立心肌高表达人KIAA0174基因转基因小鼠,研究该基因在心肌表达水平的变化对动物的影响,探索该基因的功能。方法:RT-PCR法克隆人KIAA0174基因,把该基因插入心肌α肌球蛋白重链启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立心肌高表达人KIAA0174基因转基因C57BL/6J小鼠。并利用特异引物PCR法鉴定转基因小鼠的基因型,Western blot检测基因表达水平。测定小鼠的心率、收缩压,以及扩张压的平均值。结果:建立了3个心肌高表达人KIAA0174基因转基因小鼠系。血压检测结果显示转基因小鼠的收缩压和扩张压均显著高于对照组。结论:成功建立了心肌α肌球蛋白重链启动子驱动的心肌高表达人KIAA0174基因转基因小鼠,为进一步探索KIAA0174基因的功能奠定了基础。
- 宋铭晶陈炜施海霞梁虹潘思丹张连峰
- 关键词：转基因小鼠
- 一个灵长类种属特异基因--XAGE-3转基因
- 2010年
- 目的分析XAGE-3基因在灵长类和啮齿类动物的基因组中的同源性,通过转基因研究XAGE-3基因在小鼠中的功能及生物学意义。方法根据Homologene及Taxplot数据库,通过Blast比对方法分析XAGE-3在两类动物基因组中的同源性;从人胎盘组织克隆XAGE-3基因,转入真核表达载体pCDNA3.1(+),显微注射方法得到转基因动物,基因组PCR鉴定基因型,反转录PCR分析基因的表达;Brdu标记3周龄动物显示睾丸内细胞的增殖。结果XAGE-3在人、黑猩猩和猕猴中存在高度同源基因,而在小鼠和大鼠中无同源区域;在基因型鉴定阳性的5个首建系中3个品系睾丸组织目的基因表达较高,在传代的两个品系中,在小肠,胸腺,睾丸等组织中目的基因均有表达;睾丸组织Brdu标记显示XAGE-3转基因动物有更多的发育晚期的精细胞被标记。结论XAGE-3作为灵长类种属特有基因在转基因小鼠中影响了精细胞发育。
- 向志光陈炜全雄志董伟曹兴水高珊张晓娟张海涛张连峰
- 关键词：转基因
- 无锡和南京地区汗斑病原菌种的分布被引量：1
- 2005年
- 探讨汗斑患者马拉色菌的菌学特征和分布。取临床标本做镜检和培养,观察菌的形态学特征,并采用一系列生化鉴定方法鉴定菌种。各菌种菌落形态不同,特别是钝形马拉色菌和球形马拉色菌菌落形态特征明显,孢子形态具有特征性,容易鉴别,可作为鉴定指标之一;致病优势菌依次为糠秕马拉色菌、合轴马拉色菌、球形马拉色菌等。准确鉴定马拉色菌需结合形态学和生化特征;7个致病菌种在汗斑皮损均有分布。
- 陶诗沁陈伟张海萍胡素泉陈炜沈永年杨莉佳刘维达
- 关键词：汗斑糠秕马拉色菌临床标本致病菌种皮损镜检
- 马拉色菌与花斑癣色素改变的相关性初探被引量：3
- 2005年
- 目的探讨马拉色菌与花斑癣皮疹色素改变及色氨酸产色三者之间的关系。方法从花斑癣患者皮损分离马拉色菌株,采用国际通用的生化鉴定方法鉴定,然后在不同浓度L-色氨酸的培养基上培养7d,观察产色反应。结果每个菌种均有产色反应阳性和阴性菌株,产色反应阳性菌株更易引起皮损色素沉着(P<0.005),且产色反应阳性标本颜色按色氨酸浓度递减而变淡。结论菌株的产色反应与马拉色菌的种属分类无必然的联系,色氨酸参与了马拉色菌产色反应。
- 陶诗沁陈炜杨莉佳陈伟张海萍吕桂霞刘维达
- 关键词：马拉色菌色素改变花斑癣L-色氨酸阳性标本皮损
