陈玮
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 供职机构：西南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 人雄激素受体的雄激素结合区cDNA在E.coli中的高效表达被引量：1
- 2000年
- 将编码人雄激素受体 ( h AR)的雄素结合区 ( LBD)的 c DNA片段 ( 1 0 0 5 bp)克隆到由 P1 启动子控制的硫氧还蛋白表达载体p Trx Fus上 ,构建了表达质粒 p Trx AR,并转化到大肠杆菌 G1 72 4中。经色氨酸诱导表达后 ,SDS- PAGE分析 ,可观察到一高效表达的融合蛋白产物 ,此融合蛋白的分子量与理论值 ( 47KD)相吻合 ,氨基酸组分分析证明了L BD目的基因的表达。该融合蛋白的表达量可达菌体总蛋白量的 5 0 %左右。尽管采用不同温度诱导 ,该融合蛋白均以不溶的包含体形式存在。应用分子筛技术 ,该融合蛋白在变性剂 (尿素 )存在下 ,可一步分离纯化。此研究结果为进一步进行 LBD的蛋白质复性研究、免疫分析提供了材料 ,也为蛋白质的高效表达提供了实验途径及体系。
- 吴珍龄陈玮柳红杨盛山李跃民张家骅何明跃
- 关键词：蛋白质
- 人雄激素受体LBD基因高效表达条件的优化及产物纯化被引量：4
- 1999年
- 人雄激素受体（ｈＡＲ）激素结合部（ＬＢＤ）的ｃＤＮＡ片段克隆到表达质粒ｐＴｒｘＡＲ内，在大肠杆菌ＧＩ７２４中可被诱导表达。通过改变诱导培养时间、诱导剂浓度、诱导温度及培养基的ｐＨ，在３４℃～３７℃，ｐＨ６．４～７．７的培养基中，用１００μｇ／ｍｌＴｒｐ诱导培养４ｈ，可获得高效表达的ＬＢＤ融合蛋白产物。其最高表达量为５０～７０ｍｇ／Ｌ湿菌体。产物主要以包含体形式存在。经尿素溶解后，由ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００柱层析获得了电泳纯的目的产物。氨基酸组分分析和相对分子量测定表明与理论值一致。该表达条件的确定，为ｈＡＲ的ＬＢＤ基因表达和进一步研究提供了依据。
- 陈玮吴珍龄杨盛山吴文彬王三根王三根何明跃
- 关键词：纯化
