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斑点免疫金渗滤法定量测定血清淀粉样蛋白A方法的建立及性能评估被引量：7: 2013年; 目的建立斑点免疫金渗滤法(DIGFA)定量测定血清淀粉样蛋白A(SAA)并评估其分析性能。方法选用2株商品化抗SAA单克隆抗体,分别结合于硝酸纤维素膜和胶体金,制备免疫金渗滤试剂板条(SAADOT)以定量检测SAA。按照EP文件,评估SAA-DOT的分析性能(检测限、精密度、准确性、线性范围等)。结果SAA-DOT最低检测限为5 mg/L;10和100 mg/L的批内变异系数(CV)分别为9.07%和10.21%,天间CV分别为11.33%和11.53%;线性范围为5～230 mg/L;SAA-DOT的测定结果与商品化乳胶增强速率散射比浊法(LERN)试剂具有良好的相关性(r=0.995,P<0.05)。表观健康者血清SAA浓度中位数为5.7 mg/L,95%可信区间为0～9.6 mg/L。结论基于DIGFA的SAA-DOT简便、快速,能在5 min内完成检测,各项分析性能指标达到国家食品药品监督管理局(SFDA)对体外诊断试剂的要求,可用于临床患者血清标本的检测。; 陈长强杨晶顾志冬万颖蕾毛客自冯晓静徐建新樊绮诗; 关键词：斑点免疫金渗滤法血清淀粉样蛋白A

定点医院新型冠状病毒肺炎患者核酸检测工作的实践和探索被引量：2: 2022年; 目的:探讨现阶段新型冠状病毒(新冠)肺炎患者核酸检测中的相关问题和解决方案,为临床实验室提供参考。方法:选取2022年4月1日至4月10日入院的462例新冠肺炎患者,对其核酸检测基础循环阈值(cycle threshold,Ct值)和时间变化规律进行分析;分析3月20日至3月31日和4月1日至4月10日2个时间段内,因样本采集原因导致的核酸检测结果假阴性的情况。选取213份临床核酸检测样本,采用试剂A和试剂B进行平行检测,比较两者间的差异。根据相关文件,制定可疑样本的复检标准作业程序(standard operation procedure,SOP)文件;制备弱阳性质控品,参考定量试验的质控方法,每天分5批次检测,共4 d,获得20组数据,以此为初始数据制作质控图。结果:462例新冠肺炎患者的ORF1ab和N基因基础Ct值中位数分别为24.50(20.58~32.10)和23.38(19.43~31.24),184例Ct值<30的患者,其Ct值升至30以上所需的中位时间为6(4~8)d。北部院区转型前期和转型后期,采样不合格率分别为12.4%和2.4%,差异具有统计学意义(P<0.01)。2种试剂在新冠核酸检测Ct值<30的样本中一致性较好,但检测Ct值在30~40的样本时,两者一致性降低。自制弱阳性质控品20次检测ORF1ab和N基因Ct值分别为35.17±0.55和35.23±0.88,能较好地监控临床上较为关注的Ct值在35左右的样本检测情况。结论:对于入院基础Ct值<30的新冠肺炎患者,其核酸检测频次可设定为3~4 d进行1次。2种常用新冠核酸检测试剂,在检测Ct值≤30的样本时一致性较好,但检测Ct值在30~40的样本时,两者结果差异明显。建立适用于定点医院实验室的样本复检规范和流程,同时应加强对Ct值处于35左右样品检测的质量监控,以保证实验室新冠核酸检测结果的一致性。; 陈长强孟俊金佩佩戴菁; 关键词：室内质控

MxA、CRP和WBC计数鉴别诊断急性呼吸道病毒感染与细菌感染的价值被引量：5: 2022年; 目的探讨黏病毒抗性蛋白A(MxA)、C反应蛋白(CRP)和白细胞(WBC)计数在急性呼吸道病毒感染与细菌感染鉴别诊断中的应用价值。方法选取急性呼吸道感染性疾病患者594例,其中流感病毒感染350例(病毒感染组)、细菌感染244例(细菌感染组)。另选取体检健康者100名作为正常对照组。检测所有对象的MxA、CRP和WBC计数。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价各项指标鉴别诊断呼吸道病毒感染与细菌感染的效能。结果病毒感染组MxA水平显著高于细菌感染组和正常对照组(P<0.05、P<0.01),细菌感染组显著高于正常对照组(P<0.05)。细菌感染组CRP水平和WBC计数显著高于病毒感染组和正常对照组(P<0.05、P<0.01),病毒感染组显著高于正常对照组(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,MxA、CRP和WBC计数单项检测及联合检测模型鉴别诊断呼吸道病毒感染与细菌感染的曲线下面积(AUC)分别为0.829、0.703、0.665、0.850。联合检测模型的鉴别诊断效能优于各项指标单独检测(P<0.01)。结论MxA、CRP和WBC计数在急性呼吸道感染性疾病中具有较好的临床应用价值,MxA在鉴别呼吸道病毒感染和细菌感染中优于CRP和WBC计数,三者联合检测效率更高。; 刘春晓易长林王小山朱咏臻罗安珥陈长强; 关键词：急性呼吸道感染

FAK突变体的亚细胞定位及生物学特性: 2014年; 目的探讨外显子33缺失型黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)突变体(FAK-Del33)的亚细胞定位及生物学特性。方法采用基础实验研究设计。将野生型FAK以及突变型FAK-Del33分别构建到pEGFP表达载体,并转染乳腺癌细胞株,以研究分析其细胞表达和定位情况。另构建过表达FAK或FAK-Del33的MDA-MB-468乳腺癌稳转细胞株,研究评价其细胞表达和体外克隆形成能力。结果构建FAK-GFP融合蛋白表达载体转染MDA-MB-468后的细胞定位显示,野生型FAK在胞浆中弥散分布,而FAK突变体蛋白在胞浆中呈点状不均匀分布,并聚集成簇。经限制性内切酶酶切分析与测序分析,成功构建出过表达FAK的慢病毒载体,以293T细胞包装的重组慢病毒能够高效感染乳腺癌细胞;经抗生素puromycin筛选和荧光定量PCR鉴定,成功筛选到稳定表达FAK的细胞株。在软琼脂克隆形成实验中,FAK野生型的克隆形成数为(335±48)/1000个,FAK突变体为(735±91)/1000个,后者对MDA-MB-468乳腺癌稳转细胞株的增殖能力高于前者(t=9.437,P<0.01)。结论初步研究表明外显子33缺失可改变FAK的亚细胞定位;并能增强肿瘤细胞株的体外克隆形成能力,这种FAK突变体可能参与肿瘤的发生发展。; 方旭前刘湘帆姚玲顾志冬陈长强倪培华郑新民樊绮诗; 关键词：酪氨酸激酶黏着斑激酶

紧急转制的新型冠状病毒感染患者定点收治医院检验科的应急转型经验被引量：2: 2022年; 2021年2月下旬,上海出现了一轮本土新型冠状病毒(简称新冠病毒)感染疫情,使得新冠疫情由常态化防控转为疫情防控攻坚战。根据国家卫生健康委印发《区域新型冠状病毒核酸检测组织实施指南(第三版)》要求,具备核酸检测能力的各级医疗机构迅速开展新型冠状病毒核酸检测,这给非定点收治新冠患者医院紧急转制为定点医院提出了更高的检测防控要求。检验科作为与新冠病毒检测标本近距离接触的临床科室,存在实验室工作时间长、工作强度大,面临临床常规标本和核酸标本气溶胶和接触传播的潜在风险,更需科室组织管理、人力资源规划、实验室核酸检测、实验室感染防控、医疗物资保障、工作人员心理疏导等多方面完善。本文结合上海交通大学医学院附属瑞金医院北部院区检验科应急转型工作实践,包括人员配置、临床样本的检测项目规划、核酸应急检测建立,科学、规范、有序开展相关工作,为兄弟单位提供检验科在应对新冠肺炎疫情紧急检测统筹管理方面的经验。; 孟俊金佩佩陈长强陈韭铭范臻佳陈诗恺戴菁; 关键词：新型冠状病毒检验科

免疫磁性微球富集检测结核分枝杆菌方法的建立被引量：1: 2012年; 目的:建立一种基于免疫磁性微球富集的检测结核分枝杆菌的新方法 ,以提高其临床阳性检出率。方法:提取结核分枝杆菌H37Rv抗原,并免疫新西兰白兔,制备兔抗结核分枝杆菌H37Rv血清。分离纯化抗血清,采用酶联免疫吸附试验和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术鉴定抗体的效价和纯度。将抗结核分枝杆菌抗体与生物素标记,并与结合有链霉亲和素的磁性微球进行连接获得免疫磁性微球,优化反应条件,建立免疫磁性微球富集检测结核分枝杆菌的方法。以培养结果作为判断金标准,比较免疫磁性微球富集方法与常规涂片镜检方法的检出率。结果:制备的抗结核分枝杆菌抗体浓度为14 mg/mL,最终效价为1∶20 000。检测158例临床标本,免疫磁性微球富集方法可使涂片镜检阳性率从5.1%提高到13.9%。22例免疫磁性微球富集后涂片镜检阳性的标本培养均为阳性,其特异度为100%。结论:建立的免疫磁性微球富集方法简便、有效,能显著提高结核分枝杆菌镜检的灵敏度和特异度。; 古丽仙.吐尔逊顾志冬陈长强周敏卫蓓文张海晨费凤英樊绮诗; 关键词：结核分枝杆菌免疫磁性微球涂片镜检

血清淀粉样蛋白A在疾病应用中的研究进展被引量：93: 2012年; 血清淀粉样蛋白A（serum amyloid A,SAA）是一类多基因编码的多形态蛋白家族,组织淀粉样蛋白A的前体物质,属于急性时相反应蛋白。炎症或感染急性期其在48～72 h内即迅速升高,并且在疾病的恢复期迅速下降。目前,细菌、病毒感染、动脉粥样硬化、冠心病、急性移植排斥反应、; 陈长强顾志冬樊绮诗; 关键词：淀粉样蛋白A C反应蛋白急性时相反应移植排斥反应

二例H7N9禽流感病毒感染患者实验室检测分析报告: 2014年; 2013年3月31日,3例H7N9禽流感病毒感染患者经中国疾病预防控制中心（Chinese Center for Disease Control and Prevention,CDC）确认[1]。由于H7N9禽流感病毒是一类新亚型的禽流感病毒,人感染H7N9禽流感病毒在全球尚属首发,具有起病急、进展快、致死率高等特点[2]。然而,目前医学界对人感染H7N9禽流感病毒的发病和病情演变规律了解甚少,; 万颖蕾陈长强梁璆荔顾志冬

乳胶颗粒凝集法检测梅毒特异性抗体的性能评估被引量：3: 2015年; 目的对乳胶颗粒凝集法梅毒螺旋体特异性抗体检测试剂（Mediace TPLA）进行性能评估。方法参考美国临床实验室标准化协会（CLSI）EP系列文件,评估Mediace TPLA的分析性能。用Mediace TPLA检测111例梅毒确诊患者和78例排除梅毒感染者的血清,并与化学发光微粒子免疫分析法（CMIA）进行比较。结果Mediace TPLA检测结果在8.0、28.6及166.0 T.U.这3个水平的总变异系数（CV）分别为8.77%、3.94%和6.57%;检测线性范围为0-250 T.U.;总回收率为95.31%;一定程度的溶血（血红蛋白〈4.8 g/L）、脂血（甘油三酯〈8 mmol/L）、黄疸（胆红素〈20μmol/L）及类风湿因子（〈450 IU/mL）对检测结果无明显影响;排除梅毒感染的30例抗核抗体（ANA）阳性患者、10例肝炎患者及10例妊娠期妇女血清检测结果为阴性。以CMIA结果为相对标准,Mediace TPLA Cut-off值取10 T.U.时,其检测灵敏度为99%、特异性为100%。结论 Mediace TPLA具有抗干扰能力强、重复性好、准确性好、线性范围宽及特异度高等特点,可在全自动生化分析仪中使用。; 胡亮陈艺陈长强瞿晨芸顾志冬樊绮诗; 关键词：梅毒血清学检测

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陈长强

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