陈霞
- 作品数：19 被引量：18H指数：2
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省教育厅自然科学基金江苏省现代病原生物学重点实验室开放课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学艺术更多>>
- Ppp5c和TTC16基因的TPR结构域与Hsp70、Hsp90蛋白的相互作用及对细胞周期的影响
- 2012年
- 目的:研究Ppp5c及TTC16基因的TPR(tetratricopeptide repeat)结构域短片段和Hsp70及Hsp90家族蛋白的相互做用,及其过表达对细胞周期的影响。方法:通过生物信息学的分析及PCR的方法,克隆Ppp5c及TTC16基因的TPR结构域以及HSPA1A、HSP90AA1的全长基因,并连入酵母双杂交载体,通过ClonTech的酵母双杂交实验体系研究蛋白和蛋白之间的相互作用。把Ppp5c及TTC16基因的TPR结构域克隆入真核表达载体,构架稳定表达Ppp5c及TTC16基因的TPR结构域的MCF-7细胞系,并通过流式细胞实验观察细胞周期。结果:Ppp5c及TTC16基因的TPR结构域能与HSPA1A或HSP90AA1发生相互作用。Ppp5c及TTC16基因的TPR结构域在MCF-7中的过表达能严重影响细胞周期,引起细胞凋亡和S期阻滞。结论:本实验初步揭示了不同蛋白的TPR结构域在与Hsp70及Hsp90蛋白的相互作用性质的异同点以及其过表达对细胞周期的影响,为全面理解TPR结构域的功能、Ppp5c以及TTC16蛋白在细胞内的功能奠定了前期实验基础。
- 刘德康李蕾陈霞唐超李建民
- 关键词：蛋白相互作用细胞周期
- 泛素蛋白酶体系统与PP2A在精子发生中的作用
- 2023年
- 泛素-蛋白酶体系统(UPS)它在细胞内发挥着重要的作用,可以促进蛋白质降解,参与调节多种生物过程如调控细胞周期、免疫应答、DNA损伤修复、信号传导等。UPS选择性的蛋白质降解和调节功能参与精子发生中的DNA修复、鱼精蛋白组蛋白替换等过程,在精子发生中扮演重要角色。蛋白磷酸酶2A(PP2A)是一种重要的丝氨酸/苏氨酸磷酸酶,参与多种生命活动。有研究表明UPS对PP2A的泛素化发挥着重要作用,PP2A参与了减数分裂的多个步骤,在减数分裂过程中至关重要。现就UPS与PP2A在精子生成中的功能作一简要介绍。
- 陈冰雁(综述)陈霞史轶超(审校)
- 关键词：泛素化PP2A精子发生
- RPAP3蛋白中TPR结构域的功能研究
- 2012年
- 目的:构建针对RPAP3 TPR区域的慢病毒载体,观察过表达对细胞周期的影响。方法:通过生物信息学软件比较RPAP3结构域组成,推测功能;分析RPAP3核定位信号,构建瞬时表达质粒pEGFP-N2-RPAP3,激光共聚焦显微镜观察RPAP3蛋白的亚细胞定位;通过酵母双杂交和GST-Pulldown实验研究RPAP3与HSP70的相互作用及作用靶点;构建慢病毒载体pLJM.1-RPAP3,转染293T细胞,收病毒感染MCF7细胞,嘌呤霉素筛选获得稳定转染细胞系,流式细胞分析对细胞周期的影响。结果:RPAP3在多物种广泛存在,有高度保守性;蛋白存在典型核定位信号,激光共聚焦显微镜下,GFP标记的RPAP3蛋白主要分布在细胞核;酵母双杂交和GST-Pulldown实验证实RPAP3与HSP70间存在相互作用,且作用发生在RPAP3的三联TPR结构域和HSP70的GPTIEEVD末端之间;流式细胞显示RPAP3 TPR区域的高表达阻滞细胞周期且凋亡增加。结论:RPAP3与HSP70间的相互作用发生在RPAP3的三联TPR结构域和热休克蛋白70的GPTIEEVD末端之间;构建高表达细胞株发现其对细胞周期及凋亡有影响。
- 李靓云唐超陈霞李建民
- 关键词：亚细胞定位蛋白相互作用细胞周期
- 延续护理在食管癌术后带空肠造瘘管出院患者中的应用效果被引量：2
- 2022年
- 探讨延续护理在食管癌术后带空肠造瘘管出院患者中的应用效果。方法选取我院2018年8月~2019年12月行“右进胸食管癌根治术”术后留置空肠造瘘管患者共40例,按数字表法随机分对照组20例和观察组20例,对照组患者出院后实施常规电话随访,观察组实施延续护理干预,对实施前后体重变化、三头肌皮皱厚度改变、白蛋白、血红蛋白数值进行对比。结果观察组患者满意度高于对照组,P<0.05,差异具有统计学意义;观察组的体重变化、血清白蛋白、血红蛋白水平及三头肌皮褶厚度明显优于对照组,P<0.05,差异具有统计学意义。结论对食管癌术后带空肠造瘘管出院患者进行延续护理干预,可以明显改善患者营养状况,提高出院患者满意度。
- 陈霞孟婷婷张文珺陈泉殷素珍
- 关键词：食管癌术后空肠造瘘管延续护理
- 海马中特异性敲除Dicer1蛋白的小鼠的构建和表型被引量：1
- 2013年
- 目的:在小鼠海马中特异性敲除RNA酶Ⅲ酶(RNAase Ⅲenzyme)Dicer1,并初步观察Dicer1在小鼠海马的生长发育中起到的基本作用。方法:用在海马中特异性表达Cre酶的Frizzled9-CreERTM小鼠和Dicer1(flox/flox)小鼠交配,得到Dicer1(flox/+);Frizzled9-CreERTM小鼠,并再次与Dicer1(flox/flox)交配,得到Dicer1(flox/flox);Frizzled9-CreERTM小鼠,用他莫昔芬(TM)诱导Cre酶的表达,使Dicer1在海马中特异性敲除,观察小鼠的表型。结果:TM诱导的Dicer1全敲的小鼠出生率低,大部分在出生后40天左右死亡,海马中CA3区域变薄,猜测与海马中缺乏Dicer1酶有关。结论:Dicer1是miRNA产生过程中的重要因素,在海马中敲除Dicer1后影响小鼠发育,小鼠易猝死。
- 唐超陈霞仝欣潘筱云李建民
- 关键词：海马
- 结核杆菌ESAT-6抗原及Flt3配体双表达核酸疫苗的构建与体外表达被引量：2
- 2007年
- 目的:构建可同时表达flt3配体(flt3-ligand,FL)和结核杆菌6kD早期分泌蛋白(ESAT-6)的重组pIRES质粒,并在大鼠肾小球系膜细胞(GMC)中表达,为进一步研究结核杆菌DNA疫苗提供实验基础。方法:采用PCR方法将FL和ESAT-6基因分别定向克隆入真核双表达载体pIRES。在酶切分析及序列测定后,用脂质体转染至GMC细胞,Westernblot鉴定其体外表达。结果:核酸序列测定证实重组质粒构建正确,该重组质粒在体外GMC细胞中能表达FL和ESAT-6两种蛋白。结论:成功构建了结核杆菌FL和ESAT-6双顺反子真核表达质粒,并在体外实现了共表达。
- 徐闻欢徐娟王迎伟陈霞高玲娟吴宜琴
- 关键词：结核杆菌核酸疫苗体外表达
- 高表达人源SP15对小鼠生长和生殖的影响
- 2014年
- 目的:探究高表达人源SP15对小鼠生长和生殖的影响,为研究NYD-SP15在生物体中的功能提供动物模型。方法:将人源NYD-SP15 cDNA以及Cre序列插入PCAG启动子下游,构建NYD-SP15转基因表达载体,并通过原核注射,构建全身性表达NYD-SP15的转基因小鼠;将获得的NYD-SP15转基因小鼠与C57/BL6小鼠交配,PCR鉴定转基因小鼠是否有Cre插入,筛选出人源NYD-SP15表达的小鼠,统计转基因小鼠体重变化和后代阳性情况。结果:通过PCR鉴定及公司测序验证,我们成功构建了NYD-SP15转基因过表达载体。并通过PCR鉴定小鼠基因型,筛选出可以表达人NYD-SP15的转基因小鼠。比较转基因小鼠与同窝野生型小鼠体重,发现转基因小鼠体重与同窝野生型小鼠相比无明显区别,说明在体内过表达NYD-SP15对小鼠体重无明显影响。通过对后代阳性小鼠出生情况统计发现F2代阳性小鼠出生率较F1代明显降低。结论:人源NYD-SP15在小鼠体内能正常表达,对其生长无明显影响,但其后代阳性出生率呈逐代下降趋势,推测该原因可能与NYD-SP15在睾丸中表达有关。
- 陈霞仝欣潘筱云许译丹李建民
- 关键词：胞苷脱氨酶转基因小鼠生殖
- 结核杆菌ESAT-6抗原多表位DNA疫苗的构建与表达被引量：5
- 2008年
- 目的:构建含3个结核杆菌ESAT-6抗原T细胞表位及Flt3配体基因的重组质粒,并使其在大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)中表达。方法:用计算机软件预测结核杆菌ESAT-6抗原的T细胞表位谱,选取3个T细胞表位,并以Ala-Ala-Tyr(AAY)序列作为接头,合成全基因序列,定向克隆入真核双表达载体pIRES及质粒pIRES-FL。在酶切分析与序列测定后,用PEI转染至GMCs细胞,并行Western blot鉴定其体外表达。结果:核酸序列测定证实重组质粒构建正确,Western blot证实该重组质粒能在体外GMCs细胞中表达融合蛋白。结论:成功构建了结核杆菌ESAT-6抗原多表位基因重组质粒。
- 陈霞徐闻欢徐娟赵聃王迎伟
- 关键词：结核杆菌ESAT-6T细胞表位DNA疫苗
- 结核杆菌ESAT-6抗原Th1优势表位与FL重组纳米疫苗的制备及其特性研究被引量：5
- 2011年
- 目的:制备适当粒径的壳聚糖纳米粒,并连接质粒,评价该壳聚糖纳米粒对该质粒的结合能力与保护作用,为进一步研究重组纳米疫苗的免疫效果提供基础。方法:采用离子交联法制备成pIRES-TH-FL-壳聚糖纳米粒复合物,用紫外分光光度计检测纳米颗粒对质粒的包埋率;经琼脂糖凝胶电泳分析纳米载体与质粒的结合能力及对该质粒的保护作用;通过喷金电镜观察其大小形态;另用zata电位仪测定粒径和zeta电位;最后用Western blot实验鉴定其在真核细胞中的表达情况。结果:紫外分光光度计检测到该壳聚糖纳米质粒的包埋率为99.28%,琼脂糖凝胶电泳结果显示壳聚糖纳米粒能保护该质粒免受DNaseⅠ的降解。制得的壳聚糖纳米质粒粒径为300 nm左右,zeta电位为32.4 mV。Western blot证实,该纳米质粒能转染293T细胞并表达目的融合蛋白。结论:本实验成功制备了粒径适当且分布均匀的壳聚糖纳米质粒,并能够在体外实现有效表达。
- 蒋青桃冯旰珠夏梅陈霞邱文赵聃王迎伟
- 关键词：结核杆菌壳聚糖纳米粒
- 结核杆菌ESAT-6抗原多表位DNA疫苗的制备及其免疫效果的初步研究
- 第一部分结核杆菌ESAT-6抗原多表位DNA疫苗的构建与体外表达的鉴定
目的:构建含3个结核杆菌ESAT-6抗原T细胞表位及Flt3配体基因的重组质粒,并使其在大鼠肾小球系膜细胞/(GMCs/)中表达。方法:用...
- 陈霞
- 关键词：结核杆菌ESAT-6T细胞表位DNA疫苗结核杆菌FLDNA疫苗
- 文献传递
