陶昆
- 作品数：15 被引量：78H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金重庆医科大学创新基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 对高等医学双语教学若干问题的探讨被引量：22
- 2008年
- 双语教学在我国高等医学院校已实施了数年,目前存在不少问题亟待解决。本文论述了双语教学的意义及其搞好双语教学的关键因素与关键环节,以及面临的困难和问题。
- 鲍依稀谢友红陶昆
- 关键词：高等医学教育双语教学
- 抗结核分支杆菌抗体在结核性脑膜炎诊断中的应用
- 1999年
- 卢贤瑜邓一平陈芳陶昆吴立翔兰景刚
- 关键词：结核性脑膜炎结核分支杆菌抗体ELISA
- 结核菌H37Ra免疫小鼠后巨噬细胞TNF-α表达的初步探讨被引量：2
- 2005年
- 目的:探讨小鼠接种结核菌H37Ra株后,巨噬细胞表达TNF -α的活性情况。方法:H37Ra皮内、腹腔途径免疫小鼠后第30、6 0天,采用生物学活性方法检测小鼠腹腔巨噬细胞表达的TNF -α活性。结果:小鼠接种H37Ra后,30天时TNF-α活性分别为2 2 .0 6U/ml(腹腔)和2 2 .6 3U/ml(皮内) ;6 0天时TNF -α的活性分别为36 .76U/ml(腹腔)和33.78U/ml(皮内) ,明显高于未免疫组(P <0 .0 1) ;与BCG皮内免疫组比较,30天时无显著性差异(P >0 .0 5 ) ,6 0天时有明显差异(P <0 .0 5 )。结论:H37Ra免疫小鼠后能诱导机体产生TNF -α。
- 陶昆卢贤瑜成海恩
- 关键词：H37RA肿瘤坏死因子Α巨噬细胞
- 结核菌H37Ra皮内接种对小鼠巨噬细胞的激活效应被引量：4
- 2006年
- 目的探讨小鼠皮内接种结核菌H37Ra后,腹腔MΦ是否被免疫激活以及激活后氮氧化物的产生、抗结核细胞因子的表达,从而了解H37Ra的免疫应答过程及对MΦ的抗菌免疫作用。方法用H37Ra、BCG皮内免疫小鼠后第30、60天,分别采用Griess法、化学法、ELISA法检测小鼠腹腔MΦ在受到、未受到IFN-γ刺激后NO、H2O2的产生以及IL-12、TNF-α的表达水平。结果①H37Ra免疫小鼠后能显著诱导MΦ分泌表达IL-12、TNF-α,与BCG皮内接种组、未免疫组比较,其差异均有统计学意义(P<0.05);也能诱导MΦ产生NO、H2O2,与未免疫组比较具有统计学意义(P<0.05),与BCG皮内接种组比较,无明显差异;②IFN-γ对巨噬细胞氮氧化物的产生、细胞因子的表达具增强效应。结论H37Ra皮内接种小鼠后能诱导巨噬细胞活化并产生较强的激活效应,且该效应略优于BCG。
- 陶昆卢贤瑜
- 关键词：H37RA巨噬细胞氮氧化物
- 结核菌H37Ra免疫小鼠后机体抗结核细胞免疫功能的研究被引量：6
- 2006年
- 目的探讨小鼠皮内接种H37Ra后,细菌在体内的定植及机体能否产生针对结核菌的免疫力。方法用H37Ra皮内免疫小鼠后15、30、60 d,检测结核菌在小鼠体内脏器的定植;免疫后第30、60天,MTT法检测小鼠脾淋巴细胞受PPD刺激后的增殖转化刺激指数、ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞受PPD刺激后IL-2、sIL-2R的表达量。结果小鼠脾、肺脏中有结核菌定植,并至少存活60 d;脾淋巴细胞30、60 d的刺激指数分别为(2.81±0.63)、(2.16±0.52),与BCG皮内接种组无显著性差异,与未免疫组有显著性差异(P<0.05);脾淋巴细胞IL-2、sIL-2R表达量分别为(126.88±8.11)、(91.26±7.29)pg/m l和(138.58±7.67)、(127.09±5.47)pg/m l,与BCG皮内接种组、未免疫组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论H37Ra免疫小鼠后能诱导机体产生特异性的抗结核免疫力,且免疫效果略优于BCG。
- 陶昆卢贤瑜陈思静夏长胜
- 关键词：H37RA细胞免疫
- 稳定表达BCR／ABL的小鼠BaF3-P210细胞株的建立及其生物学特性的研究被引量：12
- 2008年
- 目的构建能稳定表达BCR/ABL的小鼠转化细胞株BaF3-P210,并初步探讨BCR/ABL对BaF3细胞生物学特性的影响。方法将含有bcr/abl基因的逆转录病毒载体转染到包装细胞,收集病毒感染BaF3细胞,经筛选和亚克隆,获得稳定表达BCR/ABL的转基因BaF3-P210细胞。用PCR、DNA测序、RT-PCR和Westernblot检测bcr/abl基因在靶细胞中的整合和表达;用台盼蓝细胞计数法、流式细胞仪(FCM)和MTT法研究BCR/ABL对BaF3细胞生物学特性的影响。结果bcr/abl基因整合在BaF3细胞基因组中,BaF3-P210细胞能稳定表达bcr/abl基因及其蛋白。与对照组相比,BaF3-P210细胞增殖速度增快(P<0.05);G0/G1期细胞比例下降,S期和G2/M期细胞比例增高(P<0.05);经STI571处理后的细胞增殖抑制率为(54.08±1.90)%(P<0.05),早期凋亡率为(12.35±2.04)%(P<0.05)。结论成功构建的能稳定表达BCR/ABL的小鼠BaF3-P210转化细胞株具有增殖能力增强、细胞周期进程加速和对STI571敏感的恶性表型特征。
- 史梦冯文莉张文萍王小中黄世锋曾建明温健萍陶昆陈新敏曹唯希黄宗干
- 关键词：慢性粒细胞白血病BCR/ABL融合基因逆转录病毒载体
- 泛素连接酶β-TrCP降角翠BCR-ABL融合蛋白对白血病K562细胞增殖的抑制被引量：3
- 2010年
- 目的:t(9;22)(q34;q11)突变导致的BCR-ABL融合基因及其编码的融合蛋白在慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)发病中发挥重要作用。本研究观察可与BCR-ABL融合蛋白N端寡聚化区域(Oligomerization domain,OD)特异性结合的嵌合泛素连接酶E3 β-TrCP的β-TrCP-OD-HA的重组腺病毒载体,经泛素-蛋白酶体途径降解BCR-ABL融合蛋白对白血病K562细胞增殖的影响。方法:HEK293细胞扩增野生型Ad5β-TrCP-OD-HA、突变型Ad5ΔF-TrCP-OD-HA及空载Ad5GFP重组腺病毒载体,感染K562细胞。以未感染K562细胞作空白对照,流式细胞术检测重组腺病毒载体感染效率,Western blot检测外源性重组蛋白和BCR-ABL融合蛋白的表达,通过细胞增殖曲线、甲基纤维素集落形成试验、细胞周期检测β-TrCP-OD-HA对K562细胞增殖的影响。结果:成功建立携β-TrCP-OD-HA重组腺病毒载体的K562细胞株,重组腺病毒载体感染效率达66.4%以上,β-TrCP-OD-HA、ΔF-TrCP-OD-HA可在K562细胞中表达。三组重组腺病毒载体感染K562细胞后,Ad5β-TrCP-OD-HA组Western blot检测BCR-ABL融合蛋白含量下降;K562细胞生长和集落形成能力均受抑制;细胞周期显示S期细胞数下降至10.88%±2.42%、G_0/G_1期升高至85.6%±5.61%,与Ad5β-TrCP-OD-HA组、Ad5GFP组及对照组相比,差异具有统计学意义(P均<0.05)。结论:重组腺病毒介导的β-TrCP-OD-HA、ΔF-TrCP-OD-HA能够在白血病K562细胞中表达;β-TrCp-OD-HA可以抑制K562细胞的生长增殖,其机制可能与其降解BCR-ABL融合蛋白、阻滞细胞周期而实现。
- 田文君罗红伟袁颖黄世峰刘钉宾陶昆冯文莉
- 酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼对K562细胞的DNA损伤修复功能的影响被引量：1
- 2008年
- 目的建立人类慢性粒细胞白血病（CML）细胞系K562细胞在伊马替尼（Imatinib mesylate）处理前、后的DNA损伤模型，探讨伊马替尼对K562细胞的DNA损伤修复功能的影响。方法用噻唑蓝（MTT）法确定伊马替尼预处理K562细胞的浓度；用免疫印迹法（Western blot）检测伊马替尼处理后K562细胞BCR／ABL的磷酸化状态，以反映BCR-ABL酪氨酸激酶活性受抑制情况；用彗星实验检测不同浓度过氧化氢（H2O2）诱导的K562细胞、伊马替尼预处理K562细胞的DNA损伤模型；用彗星实验对各组细胞在DNA损伤后的修复进行动态观测。结果MTT实验结果显示，伊马替尼预处理K562细胞的最佳终浓度为1μmol／L，作用时间24h；Westernblot实验结果显示，该浓度的伊马替尼可有效抑制BCR／ABL融合蛋白第177位酪氨酸激酶磷酸化，密度比为0．100±0．018，与对照组（0．425±0．039）相比，降低了（77．11±5．59）％，差异有统计学意义（t=4．57，P〈0．05）；彗星实验确定了各组细胞DNA损伤模型的建立条件，采用10μmol／L终浓度的H2O2对K562细胞和伊马替尼预处理后K562细胞进行染毒，H2O2作用温度和时间为4℃、10min。修复结果显示，经伊马替尼预处理的K562细胞修复时间为120min，与未处理组修复时间60min相比，前者DNA损伤修复时间明显延长（F=97．79，P〈0．05）。结论本研究建立了伊马替尼处理前、后的白血病K562细胞的DNA损伤模型，BCR／ABL融合蛋白的酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼能减弱K562细胞的DNA损伤后修复能力。
- 史梦冯文莉黄世峰曾建明王小中温健萍张文萍陶昆陈新敏曹唯希黄宗千
- 关键词：K562细胞哌嗪类DNA修复
- 结核菌H37Ra免疫小鼠后PPD刺激淋巴细胞增殖转化的探讨被引量：4
- 2005年
- 目的探讨小鼠接种H37Ra后,PPD刺激鼠淋巴细胞的增殖转化情况。方法用H37Ra皮内、腹腔免疫小鼠后30、60天,检测小鼠脾淋巴细胞受PPD刺激后的转化率。结果小鼠接种H37Ra后,30天淋转率分别为21.98%(腹腔)和24.85%(皮内);60天淋转率分别为25.50%(腹腔)和25.02%(皮内),明显高于未免疫组(P<0.01);与BCG皮内免疫组比较,无显著性差异(P>0.05);H37Ra腹腔和皮内不同途径接种,淋巴细胞转化率无明显差异。结论H37Ra免疫小鼠后能诱导机体产生抗结核的免疫应答。
- 陶昆卢贤瑜成海恩徐以民
- 关键词：H37RA淋巴细胞转化结核分枝杆菌PPD
- CTP-OD-HA融合蛋白的原核表达及其活性鉴定被引量：4
- 2009年
- 目的构建CTP-OD-HA融合基因原核表达质粒,表达并纯化融合蛋白,并检测其在人慢性粒细胞白血病(CML)K562细胞株中的转导活性及胞浆定位。方法分别将胞浆转导肽(CTP)、寡聚化区域(OD)基因和流感病毒血凝素抗原表位(HA)片段依次连接入pET32a(+)质粒,构建重组原核表达质粒pCTP-OD-HA,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,经亲和纯化、Western blot验证、肠激酶切割、目的蛋白回收和FITC标记后,将FITC-CTP-OD-HA融合蛋白作用于K562细胞,观察其转导活性及细胞定位。结果重组原核表达质粒pCTP-OD-HA经酶切及测序鉴定,证明构建正确。37℃,1 mmol/LIPTG诱导4h,目的蛋白的表达量最高,约占菌体总蛋白的35%,纯化后纯度达95%以上。FITC-CTP-OD-HA融合蛋白在K562细胞中具有高转导活性和显著的胞浆定位特性。结论已成功构建CTP-OD-HA融合基因原核表达质粒,并高效表达了目的蛋白,为进一步研究其在CML信号转导通路中的作用,阐明CML的发病机制及探讨蛋白肽在CML中的治疗策略奠定了基础。
- 刘钉宾黄世峰曾建明袁颖陶昆温健萍曹唯希黄宗干冯文莉
- 关键词：血凝素慢性粒细胞白血病原核表达
