韩大成
- 作品数：12 被引量：43H指数：4
- 供职机构：华北煤炭医学院附属医院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 瘦素对成骨细胞及骨形成的影响被引量：3
- 2006年
- 目的:瘦素是近年来发现的具有调节食欲及能量消耗功能多肽激素。目前认为瘦素作用不仅限于中枢神经系统,其对骨代谢的调节作用,特别是对成骨细胞和骨形成的直接作用已越来越明确,深入研究其机制将为防治人类骨质疏松症等骨代谢疾病提供新途径。资料来源:应用网络检索自1994年瘦素基因发现以来Pubmed数据库相关文章,检索词“leptin,bone,boneformation,osteoblast”,限定文章语言种类为English。同时检索中国期刊全文数据库、万方数据、中国医院知识仓库CHKD期刊全文库相关文章,检索词“瘦素、骨、骨形成、成骨细胞”,限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,选取符合研究要求的有关文章查找全文。纳入标准:①瘦素受体及在成骨细胞表达的研究。②瘦素与体外培养成骨细胞增殖和分化的研究。③瘦素对体内骨形成的影响的研究。排除标准:重复研究。资料提炼:共收集到447篇有关瘦素与骨相关的文章,其中与骨形成和成骨细胞相关文章分别为112篇和85篇。排除重复或类似的同一研究,选择其中有代表性的18篇进行总结。资料综合:①瘦素受体表达于小鼠、大鼠、人成骨细胞、成骨细胞系ROS17/2.8、以及人骨髓间充质干细胞分化来源的成骨细胞中。②在体外培养细胞中,瘦素促进人原代成骨细胞增殖,同时,瘦素促进成骨细胞分化,其作用机制不同于骨形态发生蛋白2。③体内研究显示:循环瘦素水平与骨密度呈正相关关系;外源性瘦素替代治疗增加骨量;瘦素具有通过中枢神经系统调节骨形成的功能。结论:成骨细胞表达瘦素受体,是瘦素作用的直接靶点。瘦素通过外周和中枢途径作用于成骨细胞和骨形成。
- 曲强郭伟韩大成周立
- 关键词：瘦素成骨细胞骨生成骨形态发生蛋白质类
- 辛伐他汀作用下大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞分化中相关基因表达谱: 基因芯片的分析(英文)被引量：2
- 2010年
- 背景:辛伐他汀可上调骨形态发生蛋白2的表达从而促进骨形成,但是具体分子水平的作用机制尚不清楚。目的:从基因水平明确辛伐他汀在体外诱导大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞分化过程中对成骨相关基因表达谱的影响。方法:取大鼠股骨、胫骨骨髓基质干细胞进行体外培养,给予辛伐他汀或安慰剂干预,培养第7天,提取、纯化mRNA,反转录合成cDNA,荧光标记后与大鼠全基因组寡核苷酸芯片杂交、扫描后筛选出差异表达的基因,分析与成骨分化相关基因。第14,21天分别进行碱性磷酸酶和钙结节茜素红染色。结果与结论:第14天,碱性磷酸酶染色阳性细胞比例实验组明显多于对照组;茜素红染色表明辛伐他汀能促进成骨细胞的矿化能力。在22575个基因中,共检出2倍差异表达基因和表达序列标记(ESTs)103条,其中包括与细胞增殖及成骨分化相关差异表达基因,如C/EBPδ,Cited,Ascl2,Ptpn16,Wisp2,Tieg等。结果表明,辛伐他汀能够促进骨髓基质干细胞向成骨细胞分化,其作用机制与从基因水平调控多种成骨相关基因的表达有关。
- 孟亚强张柳田发明韩大成郑杰蔡俊
- 关键词：辛代他汀骨髓基质干细胞成骨细胞基因
- 辛伐他汀对大鼠骨量及骨髓基质干细胞增殖、分化过程中Smad1,2,7表达的影响被引量：4
- 2008年
- 目的观察辛伐他汀体内给药对大鼠骨量和骨髓基质干细胞增殖、分化的影响。方法16只6w龄雌性SD大鼠按体重随机分成2组,每组8只:第一组(G1),实验组,辛伐他汀灌胃20mg/kg·d(S20),持续6w;第二组(G2),对照组,每天蒸馏水灌胃(N),持续6w。于最后一次灌胃的第二天处死所有大鼠,取左侧股骨行骨密度和骨组织形态计量学测定;取右侧股骨和胫骨骨髓细胞向成骨方向诱导培养,并作如下检测:采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测定向成骨分化中的骨髓基质干细胞的增殖能力;细胞培养第16d和28d分别检测碱性磷酸酶(ALP)比活性、ALP染色和von Kossa染色;细胞培养第21d,提取总RNA,采用Real-time RT-PCR检测Smad1、2、7的mRNA的表达。结果辛伐他汀体内给药干扰6w后大鼠骨量和骨密度无显著变化,体外培养骨髓基质干细胞所有检测基因mRNA水平、细胞增殖能力、矿化能力(von Kossa染色)、ALP比活性、ALP染色两组间均无显著差别。结论辛伐他汀体内给药6w对大鼠骨量及骨髓基质干细胞的增殖和分化无显著作用。
- 高建清张辉田发明韩大成张柳
- 关键词：辛伐他汀骨组织形态计量学
- RNA干扰Axin2对大鼠骨髓基质干细胞的成骨分化表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的通过对大鼠Axin2基因的RNA干扰(RNAi),探讨Axin2对大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)向成骨细胞分化过程的影响。方法取6周龄雌性SD大鼠双侧股、胫骨骨髓细胞,采用全骨髓培养法进行原代和传代培养。细胞传2代后实验组进行Axin2 mRNA干扰质粒转染,对照组进行阴性干扰质粒转染。转染48 h后换用成骨诱导分化培养基。诱导分化28 d后用von Kossa方法进行细胞外基质矿化染色。采用适时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)技术检测诱导分化后第7、14天β-catenin、骨钙素(OCN)、frizzled-2、Lef-1、Wnt5a mRNA的表达水平。结果对照组大鼠BMSCs经体外诱导后分化为具备矿化细胞外基质能力的成熟成骨细胞,而实验组BMSCs成骨分化不全;RQ-PCR检测显示,诱导分化后第7天实验组β-catenin、frizzled-2 mR-NA表达水平显著低于对照组,而OCN、Lef-1、Wnt5a mRNA表达水平显著高于对照组;诱导分化后第14天实验组frizzled-2、Lef-1和Wnt5a mRNA表达水平均显著高于对照组(P<0.05)。结论对大鼠BMSCs Axin2进行RNAi后,BMSCs向成骨细胞分化晚期细胞外基质矿化能力减弱。
- 张磊张柳高建清田发明韩大成牛军强刘晓宁
- 关键词：成骨细胞RNA干扰干细胞WNT信号转导途径
- 辛伐他汀对大鼠骨量及骨髓基质干细胞增殖、分化的影响被引量：17
- 2007年
- 目的观察辛伐他汀体内给药对大鼠骨量和骨髓基质干细胞增殖、分化的影响。方法16只9周龄雌性SD大鼠按体重随机分成2组,每组8只:第1组(G1),对照组,每天蒸馏水灌胃(N);第2组(G2),实验组,辛伐他汀灌胃20mg·kg-1.d-1(S20),持续3周,于最后1次灌胃的第2天处死所有大鼠,取右侧股骨行骨密度和骨组织形态计量学测定;取左侧股骨和胫骨骨髓细胞分别向成骨、成脂方向诱导培养,并作如下检测:(1)成骨组:采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测定向成骨分化中的骨髓基质干细胞的增殖能力;细胞培养第16d和28d分别检测碱性磷酸酶(ALP)比活性、ALP染色和von Kossa染色;细胞培养第16d,提取总RNA,采用Real-time RT-PCR检测骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)、碱性磷酸酶(ALP)、破骨细胞分化因子(RANKL) mRNA的表达;(2)成脂组:采用CCK-8法检测定向成脂分化中的骨髓基质干细胞的增殖能力;细胞培养第18d,检测LPL比活性,并提取总RNA,采用Real-time RT-PCR检测脂蛋白脂酶(LPL) mRNA的表达。结果辛伐他汀体内给药干扰21d后大鼠骨量和骨密度无显著变化。体外培养骨髓基质干细胞所有检测基因 mRNA水平、细胞增殖能力、矿化能力(von Kossa染色)、ALP比活性、ALP染色、LPL比活性两组间差异均无显著性。结论辛伐他汀体内给药3周对大鼠骨量及骨髓基质干细胞的增殖和分化无显著作用。
- 田发明张柳孟亚强郑杰蔡俊韩大成曲强
- 关键词：辛伐他汀骨组织形态计量学骨髓基质干细胞
- Wnt信号途径与成骨细胞被引量：4
- 2007年
- 韩大成张柳曲强
- 关键词：WNT成骨细胞细胞分化
- RNA干扰Axin2对大鼠骨髓基质干细胞的成骨分化及Wnt信号途径相关因子mRNA表达的影响
- 2010年
- 我们利用已建立的大鼠BMSCs体外培养模型，在诱导其成骨分化同时对Axin2进行RNA干扰（RNAi），从而探讨Axin2基因沉默对骨髓基质于细胞（BMSCs）向成骨细胞分化过程以及Wnt信号途径的影响。
- 张磊张柳高建清田发明韩大成牛军强刘晓宁
- 关键词：WNT信号途径RNA干扰成骨分化MRNA表达体外培养模型
- 辛伐他汀对人骨髓基质干细胞向成骨细胞分化过程的影响
- 2009年
- 目的:观察辛伐他汀(SIM)对体外人骨髓基质干细胞(hBMSCs)向成骨分化的影响,探讨其刺激成骨的作用机制.方法:取健康成人骨髓进行体外成骨诱导培养,实验分为对照组(G1):不给予药物干预;实验组(G2):传代后加入SIM1×10-7mol/L.于传代后7,14,21d采用RealtimeRT-PCR检测mRNA水平和BMP-2,Smad1,β-catenin,Frizzled2的表达,并用免疫组织化学检测蛋白水平β-catenin的表达.传代后7d行细胞碱性磷酸酶(ALP)染色和比活性检测;传代后21d行vonKossa染色,检测细胞外基质矿化.结果:SIM作用后7,14,21d3个不同时间点,BMP-2表达均显著高于对照组;Smad1在成骨诱导14,21d时表达高于G1,其余组间差异均不显著;β-catenin免疫组织化学染色2组差异不显著;G2组ALP表达和矿化能力均显著高于G1组.结论:SIM1×10-7mol/L可促进体外成骨诱导培养的hBMSCs向成骨细胞分化,上调TGF-β/BMPs信号通路部分信号分子表达,但未能显著改变Wnt/β-catenin信号通路部分相关因子的表达.
- 牛军强张柳张磊刘晓宁田发明韩大成
- 关键词：辛伐他汀人骨髓基质干细胞成骨细胞BMP-2实时定量聚合酶链反应
- 辛伐他汀对大鼠BMSCs成骨诱导Wnt信号传导通路相关因子mRNA表达的影响被引量：9
- 2009年
- 目的探讨辛伐他汀(simvastatin,SIM)对大鼠BMSCs成骨分化过程中Wnt信号传导通路相关因子mRNA表达的影响,研究SIM促进BMSCs成骨分化的作用机制。方法取6周龄雌性SD大鼠双侧股骨、胫骨骨髓细胞,全骨髓培养法进行原代和传代培养。取第2代细胞换用成骨诱导培养基培养,并将细胞分为2组,实验组加入1×10-7mol/LSIM,对照组加入等量无水乙醇和PBS。诱导培养7d倒置相差显微镜观察两组细胞形态,并行ALP染色观察;培养28d行vonKossa染色观察ECM矿化;培养7、14d采用实时定量PCR检测Wnt信号传导通路相关因子Axin2、β-catenin、骨钙素(osteocalcin,OC)、frizzled-2、Lef-1、Wnt5amRNA的表达。结果诱导培养7d倒置相差显微镜观察显示,实验组以多边形和三角形细胞居多;对照组细胞多呈长梭形,少数为小圆形或三角形。诱导培养7dALP染色观察显示,实验组细胞质中出现蓝染的ALP,阳性染色细胞和区域明显多于对照组;培养28dvonKossa染色观察显示,两组细胞均可见点状及片状钙沉积,与对照组相比,实验组钙沉积明显增多。实时定量PCR检测显示,诱导培养7d,实验组Axin2mRNA表达水平显著低于对照组,frizzled-2、Lef-lmRNA表达水平显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);其余各因子mRNA表达两组差异无统计学意义(P>0.05);培养14d,实验组除β-catenin外,其余各因子mRNA表达水平均显著高于对照组(P<0.05)。结论SIM可促进BMSCs向成骨细胞分化,并伴Wnt信号途径相关因子mRNA表达水平的改变。
- 张磊张柳田发明韩大成牛军强刘晓宁
- 关键词：BMSCS成骨诱导分化信号传导通路辛伐他汀
- 辛伐他汀对幼鼠骨小梁中骨形成相关因子表达以及BMSCs成骨分化的影响被引量：1
- 2011年
- 目的既往研究表明辛伐他汀具有促成骨作用,现探讨辛伐他汀对幼鼠骨小梁中骨形成相关因子表达以及BMSCs成骨分化的影响。方法 40只1周龄雄性SD大鼠,体重17.5～19.5 g,随机分为2组,每组20只。实验组于大鼠颈部皮下注射辛伐他汀注射液[5 mg/(kg.d)],对照组同法注射等剂量生理盐水。于注射后1、3周,两组分别脱颈处死10只大鼠,采用免疫组织化学染色检测胫骨上端骨小梁BMP-2、基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)、VEGF的表达情况。注射后1、3周,两组分别取大鼠双侧股骨,采用全骨髓培养法体外分离培养BMSCs,取第1代BMSCs成骨诱导培养,培养后14 d行ALP染色,培养后21 d采用实时荧光定量PCR检测BMP-2、Runx2、Osterix、Msx2、Dlx3、Dlx5 mRNA的表达,培养后28 d行von Kossa染色。结果免疫组织化学染色示注射后1、3周两组胫骨上端骨小梁BMP-2、MMP-13、VEGF表达,差异均无统计学意义(P>0.05)。成骨诱导培养14 d,注射后1、3周两组ALP染色阳性细胞百分比差异均无统计学意义(P>0.05);成骨诱导培养21 d,实时荧光定量PCR检测示注射后1、3周两组BMP-2、Runx2、Osterix、Dlx3、Dlx5、Msx2 mRNA表达水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);成骨诱导培养28 d,注射后1、3周两组钙结节单位面积比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论皮下注射辛伐他汀5 mg/(kg.d)后1、3周对幼鼠骨小梁中骨形成相关因子表达以及BMSCs成骨分化无明显影响。
- 张柳刘晓宁田发明张辉韩大成
- 关键词：辛伐他汀BMSCS成骨分化
