颜军
- 作品数：16 被引量：42H指数：5
- 供职机构：昆明市疾病预防控制中心更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 单核细胞增生李斯特菌三种检测方法的比较被引量：3
- 2013年
- 目的：通过比较国标法、real—timePcR法和LAMP方法，得到适合基层实验室快速检测单核细胞增生李斯特菌的方法。方法：分别用国标法、real-timePcR法和环介导的等温扩增（100p—mediated isothermal amplification，LAMP）法检测李斯特菌，并进行方法比较。结果：三种方法对单增李斯特菌的检测结果一致．国标法整个检测过程需5～7d；real—timePCR法实验条件要求高，成本高，检测需1．5～2．5d；LAMP法实验条件低，成本低，检测时限与real—timePCR相同。结论：LAMP~检测单增李斯特菌灵敏度高、特异性强、快速高效和低成本，适合基层实验室应急检测和现场监测使用。
- 张烜榕颜军李文龙侯敏蒋玉佳卜舒李桂满
- 关键词：国标法LAMPPCR
- 2020年昆明市6起手足口病聚集性疫情病原学监测及CV-A6分子特征分析
- 2022年
- 目的了解云南省昆明市手足口病的病原学特征,分析主要病原柯萨奇病毒A6型(Coxsackievirus A6,CV-A6)的流行特征。方法采集昆明市2020年6起手足口病聚集性疫情中19个病例的粪便样本,用实时荧光RT-PCR法检测肠道病毒并测定VP1基因序列,比较核苷酸、氨基酸序列同源性,并进行氨基酸位点变异及基因进化分析。结果19份粪便样本中有18份检出肠道病毒核酸,其中14份为CV-A6阳性,测序成功13份,均为D3基因亚型D3a进化分支。13株CV-A6之间核苷酸同源性为97.2%~100.0%,氨基酸同源性为98.7%~100.0%,12株与2020年曲靖株(LC626198、LC626200)亲缘关系较近,1株与2019年眉山株(MW178716)亲缘关系较近。测序成功的13株CV-A6VP1区氨基酸变异主要在S97N、A128V、E129G、F130S、T131P和S139R等位点,未出现V174I变异。结论2020年昆明市手足口病聚集性疫情的主要病原是CV-A6,属于D3基因亚型D3a进化分支。
- 刘艳艳易忠仁刘如锦李文龙简千棋马丽波杨瑶朱心颜军
- 关键词：手足口病聚集性疫情
- 一种便携组装式试管用支撑架
- 本实用新型提供一种便携组装式试管用支撑架。所述便携组装式试管用支撑架包括支撑板；支撑槽，所述支撑槽开设在所述支撑板的顶部，所述支撑槽的底部内壁上开设有多个贯穿开口；多个橡胶缓冲套，多个所述橡胶缓冲套分别设置在多个所述贯穿...
- 刘艳艳颜军李桂满侯敏简千棋杨瑶庞磊马丽波段忠文王慧雯蒋玉佳
- BD MAX全自动工作站在肠道病毒检测中的优势
- 2021年
- 目的比较常规检测方法与BD MAX全自动工作站在手足口病病原学检测中的差异,探讨应用BD MAX全自动工作站检测肠道病毒的可行性。方法收集2017年1月—2020年9月昆明市临床诊断为手足口病病例的标本,随机选择136份,以实验室常规采用的实时荧光PCR检测方法和BD MAX全自动工作站方法,对结果进行Cohen’s kappa一致性分析;用无酶水对检测试剂盒提供的U/CA16/EV71假病毒阳性对照做10倍梯度稀释,记录各稀释度检测结果;随机取两份阳性标本,分别用两种方法平行重复检测10次,计算Ct值的平均值和变异系数,进行重复性分析。结果两种方法对肠道病毒U/CA16/EV71的检测结果一致性好,Cohen’s kappa值为0.889,95%置信区间(95%CI)为0.803~0.976;两种方法检测CA16的敏感性一致,常规方法检测EV71和U的敏感性略高于BD MAX方法;在CA16标本的检测中,常规检测方法变异系数CV(通用型)=1.07%、CV CA16=0.62%,BD MAX方法 CV(通用型)=1.63%、CV CA16=2.19%;在EV71标本的检测中,常规检测方法变异系数CV(通用型)=1.28%、CV EV71=1.20%,BD MAX方法 CV(通用型)=2.37%、CV EV71=1.73%。结论 BD MAX全自动工作站检测结果较为准确,敏感性、重复性好,人工操作少,便于标准化推广,且耗时短,在小批量标本的病原检测及暴发疫情或应急检测中具备较好优势。
- 刘艳艳侯敏陈春燕段忠文李桂满张艳李育芬颜军
- 关键词：手足口病实时荧光PCR肠道病毒
- 一种可调节式的多功能试管架
- 本实用新型提供一种可调节式的多功能试管架。所述可调节式的多功能试管架包括试管架本体，所述试管架本体包括承载板、第一定位板和第二定位板；支撑筒，所述支撑筒设于所述承载板的下方；弧形支撑板，所述弧形支撑板固定安装在所述承载板...
- 颜军侯敏刘艳艳庞磊段忠文蒋玉佳杨瑶
- 2015—2016年昆明市市售生鲜海产品中副溶血性弧菌污染状况及毒力基因检测被引量：8
- 2018年
- 目的调查昆明市市售生鲜海产品中副溶血性弧菌的污染状况及其毒力情况,为相关食品安全监管提供依据。方法采集昆明市有代表性的两个生鲜海产品市场和一家餐饮场所出售的生鲜海产品178份,按照GB 4789.7-2013进行副溶血性弧菌的分离与鉴定;应用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)方法检测分离出的副溶血性弧菌及其毒力基因tlh、tdh和trh。结果 178份生鲜海产品中,按照GB 4789.7-2013检测法检出副溶血性弧菌66株,应用Real-time PCR方法确证为58株,检出率为32.58%。58株均携带毒力基因tlh,tlh的携带率为100%;未检测出tdh和trh,tdh和trh的携带率为0.0%。结论昆明市市售生鲜海产品中副溶血性弧菌检出率较高,但均不携带耐热溶血毒素基因,建议不要生食生鲜海产品,避免引起食物中毒。日常应加强对该菌的食源性主动监测,特别加强对生鲜海产品的食品安全监督与管理。
- 李桂满颜军王慧雯张艳侯敏
- 关键词：副溶血性弧菌毒力基因
- 酶底物法快速检测食品中的大肠埃希氏菌被引量：1
- 2017年
- 目的将水质检验的酶底物法用于食品检验,探索酶底物法是否能快速检测食品中的大肠埃希氏菌。方法测定食品样品,比较酶底物法与传统鉴定法结果的一致性。结果传统方法检出24份阳性和8份阴性,酶底物法检出25份阳性和7份阴性。实验结果进行X^2检验,结果无显著性差异(X^2=0.087,P>0.05)。32份样品MPN值结果一致,8份样品MPN值有差异,其中7份样品酶底物法的MPN值大于传统法。结论酶底物法可用于食品中大肠埃希氏菌的快速检测,具有快捷简便、特异性高的优势。
- 蒋玉佳颜军谢超华魏茂琪杨晓蓉侯敏
- 关键词：食品大肠埃希氏菌酶底物法
- 炭疽芽孢杆菌DNA提取中的生物安全
- 2016年
- 目的探讨炭疽芽孢杆菌DNA提取过程中的安全操作技术。方法分别采用常规提取法-热裂解法、热裂解+0.45μm滤膜过滤法进行炭疽芽孢杆菌和蜡样菌群DNA提取,采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)方法进行炭疽芽孢杆菌鉴定和毒力基因的检测。结果常规提取法-热裂解法提取得到的炭疽芽孢杆菌DNA培养后出现了细菌菌落生长,生长比例占68.75%,热裂解+0.45μm滤膜过滤法提取得到的炭疽芽孢杆菌和蜡样菌群DNA培养后无细菌菌落生长。Real-time PCR检测中,炭疽芽孢杆菌疑似菌株均检出rpo B、pag A和cap基因。结论以热裂解+0.45μm滤膜过滤法进行炭疽芽孢杆菌DNA提取,对提取的DNA进行培养验证无菌生长后再进行下一步试验,可以有效地降低炭疽芽孢杆菌DNA提取过程中的生物安全风险。
- 李桂满王慧雯颜军张烜榕侯敏
- 关键词：炭疽芽孢杆菌DNA生物安全
- 昆明市首起由疑似肉毒梭菌引起食物中毒的实验室快速检测被引量：3
- 2020年
- 目的快速查明昆明市一起疑似由肉毒梭菌引起食物中毒事件的病原菌的具体类别。方法根据GB4789.12-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验肉毒梭菌及肉毒毒素检验》,样品在庖肉培养基中35℃厌氧增菌5 d后镜检,用2个不同生产厂家的肉毒梭菌实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测试剂进行检测并进行肉毒毒素分型。结果镜检符合典型的肉毒梭菌的特征,2个不同生产厂家的肉毒梭菌Real-time PCR检测结果均为阳性,且均检测出E型肉毒毒素。Real-time PCR检测只需在增菌后4~6 h的检测时间,即可得到结果,且无需进行菌体的纯化培养,鉴定时间节约至少96 h。结论此次事件为食用被E型肉毒梭菌及其毒素污染食品而引起的细菌性食物中毒事件,用Real-time PCR检测方法可对肉毒梭菌食物中毒事件作出快速判定。
- 李桂满张艳王慧雯颜军侯敏
- 关键词：食物中毒实时荧光定量PCR
- 昆明市2018—2021年手足口病病例中柯萨奇病毒A组4型流行情况及VP1编码序列基因特征分析
- 2022年
- 目的 分析昆明市2018—2021年手足口病病原构成,研究柯萨奇病毒A组4型(coxsackievirus A4,CVA4)的流行特点及VP1编码序列系统进化与氨基酸变异情况。方法 采用实时荧光逆转录聚合酶链反应(real-time reverse transcript-polymerase chain reaction, real time RT-PCR)对2018—2021年昆明市疾病预防控制中心监测到的昆明市手足口病病例标本3 553份进行肠道病毒核酸检测,描述CVA4的流行情况,并进行VP1编码序列全长测序、氨基酸位点变异及系统进化分析。结果 共检出肠道病毒阳性标本2 531份,阳性率71.24%,其中CVA16、EV-A71及其他肠道病毒(非EV-A71、非CVA16)占阳性样本的构成比分别为38.05%(963/2 531)、4.11%(104/2 531)和57.84%(1 464/2 531)。CVA4阳性52份,其高发区域为昆明市区及东南部,涉及5个县区,阳性数占CVA4病例总数的73.08%(38/52),高发时间为8—12月,占CVA4病例总数的71.15%(37/52),高危人群为1~3岁儿童,占86.54%(45/52),男性多于女性,多引起轻症。CVA4共测序成功51份,核苷酸相似性为90.90%~100.00%,氨基酸相似性为97.30%~100.00%,均为C基因型C2亚型,分为3个传播链(cluster),clusterⅠ以2019年昆明市毒株为主,clusterⅡ以2020和2021年昆明市毒株为主,clusterⅠ、Ⅱ包含了98.04%(50/51)昆明市毒株。与原型株High Point(AF081295)VP1区氨基酸序列相比,有R18K、T23V、A34T、S102A、A200T、I262V、R274K和Y285H共8个高频氨基酸变异位点。结论 2018—2021年昆明市手足口病病原谱中其他肠道病毒(非EV-A71、非CVA16)占主导地位,CVA4作为其中的一个重要类型,属于C2亚型。应针对昆明市主城区及东南部区县、8—12月和1~3岁儿童等因素合理配置防控资源,做好CVA4防控工作。
- 刘艳艳周永明赵云珍颜军刘如锦杨春丽伏晓庆侯敏
- 关键词：手足口病病原学系统发育
