乔宪凤
- 作品数：111 被引量：202H指数：7
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 湖北白猪IGF-1基因的克隆及序列分析(英文)
- 2011年
- [目的]以湖北白猪肝脏作为试验材料,克隆出湖北白猪胰岛素生长因子(IGF-1)基因,并对其序列进行分析。[方法]采用Trizol法从湖北白猪的肝脏中提取总RNA,将其作为RT反应的模板,用P2(5'-CAGGTAACTCGTGCAGAGCAAAGGA-3')引物合成IGF-1基因cDNA第一链,以其产物为模板,再以P1(5'-CCCATCTCCCTGGATTTCTTTTTG-3')和P2为上下游引物扩增到大小约为607bp的产物,并将其克隆至pCRII载体上,经蓝白斑筛选、酶切、测序。[结果]经筛选、酶切、序列分析,表明该片段为IGF-1基因的cDNA克隆,它由607个核苷酸组成,其中1～145位是5'端非翻译区,从第146位ATG起始密码子开始至第538位TAG终止密码子,539～607位是3'端非翻译区,包含一完整的ORF,该ORF共有393核苷酸,编码一个推断由130个氨基酸组成的多肽。与GenBank中的序列比较,该序列与Muller等报道的猪IGF-1基因编码序列完全同源。[结论]成功克隆了湖北白猪IGF-1基因,并对其进行序列分析,证实了IGF-1基因的高度保守性,为采用转基因技术对湖北白猪进行育种奠定了基础和提供了技术依据。
- 乔宪凤张立苹毕延震刘西梅华文君华再东肖红卫周荆荣郑新民
- 关键词：湖北白猪IGF-1基因
- 猪肌生成抑制素(MSTN)基因cDNA克隆及序列分析被引量：5
- 2010年
- 利用GenBank中猪肌生成抑制素(MSTN)编码序列设计引物,以湖北白猪背最长肌肌细胞总RNA为模板,利用RT-PCR技术,扩增出MSTN基因cDNA片段。该片段全长1277bp,包含猪MSTN基因的全部编码序列。将所得片段与pUCm-T载体连接,转化到DH5α大肠杆菌中,成功地筛选到阳性克隆,其质粒测序结果与文献报道的一致。
- 乔宪凤刘西梅华文君周荆荣刘中华张立萍肖红卫华再东李莉郑新民
- 关键词：MSTN基因MYOSTATINCDNA片段RT-PCR技术GENBANK
- 基因沉默技术的研究动态及在畜牧业中的应用
- 2008年
- 从RNA干扰现象的发现、筛选及基因沉默的发生开始,概述了细胞水平基因沉默的效应,并由细胞水平上过渡到模型动物试验阶段,在此基础上,着手家畜基因沉默的研究,最后,涉及到基因沉默技术在畜牧业上的应用前景。
- 郑新民刘中华周木清肖红卫李莉乔宪凤王亚刚田永祥
- 关键词：基因沉默RNA干扰畜牧
- 猪体细胞克隆技术研究进展被引量：3
- 2011年
- 克隆不仅可以保护濒危动物,而且与干细胞工程技术结合应用于克隆性治疗,具有重大的科学意义和应用价值。体细胞克隆猪因其在人类器官移植方面具有巨大的应用潜力,已成为当今研究的热点,但是体细胞核移植技术仍存在许多问题,其中最主要的是体细胞核移植的环节多,克隆效率低。对体细胞克隆猪的关键环节,即供核细胞、卵母细胞、显微操作、克隆胚的激活、培养及移植技术进行了简要综述。
- 华再东魏庆信郑新民乔宪凤许厚强
- 关键词：克隆显微操作重构胚
- 应用多重引物RT-PCR快速诊断禽流感亚型
- 2007年
- 将本实验室分离保存、已经过PCR扩增、核酸测序鉴定的三种不同亚型禽流感病毒(AIVH5N1、H6N2、H9N2)分别接种鸡胚,收集尿囊液,分离提取AIV总RNA。参考H1￣H15亚型禽流感病毒的核蛋白(NP)基因序列以及H5、H6、H9亚型AIV血凝素(HA)基因序列,设计四对引物:NP1,NP2;H5P1,H5P2;H6P1,H6P2;H9P1,H9P2,混合为PCR扩增多重引物MP1,下游引物NP2、H5P2、H6P2,、H9P2混合为逆转录反应多重引物MP2。AIV总RNA在相同反应条件下经MP2逆转录,用MP1进行PCR扩增,AIVH5亚型材料得到205bp,563bp两条扩增带,AIVH6亚型材料得到205bp,233bp两条扩增带,AIVH9亚型材料得到205bp,690bp两条扩增带,都与实验设计相符合,阴性材料没有扩增带。该方法成功实现四对引物进行RT-PCR反应同时检测出AIV,准确诊断H5、H6、H9三种禽流感亚型,检测时间短,特异性强,能及时检测出AIV亚型。
- 华文君乔宪凤郑新民
- 关键词：禽流感
- 快速抽取卵母细胞装置
- 一种快速抽取卵母细胞装置，包括采集管，管塞，穿刺针和导气管，采集管与穿刺针间的输液管穿过管塞，其特征在于：输液管与穿刺针为一体，输液管的长度为3-5cm，输液管与穿刺针成一直线或成一角度。通过真空泵产生的负压采集卵母细胞...
- 肖红卫乔宪凤李莉华文君张立苹毕延震华再东吴艳魏金涛
- 文献传递
- 转基因动物研究的技术思路
- 2012年
- 从转基因动物研究的目的出发,探讨转基因动物研究的不同思路,分析使用各种载体所考虑的基本出发点,说明受体动物遴选所需要考虑的因素,总结了转基因方法的技术特点,提出转基因动物检测手段的设计原则,论述了转基因动物繁殖的必要性,为从事转基因动物方面的研究提供技术思路。
- 刘西梅乔宪凤张立苹程妮毕延震李莉肖红卫华再东华文君
- 关键词：转基因动物转基因方法
- 采集猪早期胚胎或卵母细胞的器械
- 本发明涉及一种用于采集猪输卵管早期胚胎或卵母细胞的器械，其特征在于：包括冲卵器和集卵管；冲卵器包括长200—300mm、外径1.0-1.1mm、管壁0.08-0.1mm的胶质软管，软管的一端为9-12号针头，软管的另一端...
- 刘西梅李莉乔宪凤肖红卫魏庆信华文君熊忠良程妮华再东
- 文献传递
- 我国禾谷缢管蚜微卫星位点扩增稳定性及遗传多样性被引量：5
- 2015年
- 为筛选用于我国禾谷缢管蚜种群遗传学研究的微卫星位点,从8个省(市)共9个地区采集282头试虫,采用微卫星PCR产物荧光标记与自动扫描分型方法,研究了8个欧洲禾谷缢管蚜微卫星位点在试虫个体中的扩增稳定性和遗传多样性。结果显示:位点R1.35在9个种群中均不能扩增;位点R5.29b只在7个种群的少数样本中能扩增;位点R2.73、R3.171、R5.10、R5.138、R5.50和R6.3在各种群中均能稳定扩增,这6个位点的无效等位基因频率为0.0044~0.2663,平均等位基因数为2.9~9.3个,观测杂合度为0.047~0.912,其中位点R6.3具有较低的观测杂合度(0.047)和等位基因数(2.9),不适合用于种群遗传多样性研究,而位点R2.73、R3.171、R5.10、R5.138和R5.50均具有较高的杂合度和等位基因数,可用于我国禾谷缢管蚜的种群遗传学研究。
- 段辛乐乔宪凤彭雄左亚运刘高鸣陈茂华
- 关键词：禾谷缢管蚜微卫星多态性
- 日本脑炎病毒WHe株NS1基因的克隆、测序及表达
- 2007年
- 以日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)WHe株的基因组RNA为模板,采用RT-PCR技术,克隆了JEV WHe株的NS1基因,并对其进行了测序和序列分析。构建了pET28b-NS1表达载体,转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3),并对其进行了诱导表达,对表达产物进行检测。结果表明,NS1基因全长1 145 bp,其核酸序列与JEV P3株同源性为99．4％,与SA14和SA14-14-2等27个JEV毒株的核苷酸序列同源性为98％,表明NS1基因的保守性很高;pET28b-NS1表达产物的相对分子质量约为43 ku,大小与预期结果相符。NS1基因克隆表达成功。
- 乔宪凤唐青海郑新民熊忠良刘西梅华文君周荆荣何维明
- 关键词：日本脑炎NS1基因RT-PCR
