任天年
- 作品数：4 被引量：26H指数：2
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 根癌农杆菌EHA105和LBA4404冻融法转化条件的优化研究(英文)被引量：19
- 2011年
- 对传统的根癌农杆菌冻融法转化条件进行优化,研究了根癌农杆菌EHA105和LBA4404的菌株生长状态、CaCl_2浓度、质粒加入量、二甲基亚砜(DMSO)、聚乙二醇(PEG4000)对质粒pBI121-Ctube转化根癌农杆菌EHA105和LBA4404的影响。结果表明:EHA105比LBA4404更容易接受外源质粒,两株农杆菌在Ca^(2+)浓度为0.06 mol/L时,感受态转化能力最佳。OD_(600)分别为0.5和0.4时,EHA105和LBA4404的转化效率较高。10μg的pBI121-Ctube质粒会降低转化率。低浓度的DMSO和PEG4000均可以提高转化率,浓度过高会抑制农杆菌转化甚至产生毒害作用。在初步优化的感受态细胞中,添加DMSO和PEG4000(4%)的EHA105和LBA4404感受态细胞,转化率比没有DMSO和PEG4000制备的最佳农杆菌感受态细胞转化效率增加了28.6和22.3倍(P<0.01),结果表明该法比传统的优化效果更加有效。
- 王学全沈晓何赟绵任天年吴梧桐奚涛
- 关键词：根癌农杆菌转化率聚乙二醇
- SMYD3调控人乳腺癌MCF-7细胞增殖机制的研究被引量：1
- 2012年
- 目的:通过转染技术抑制或增强SMYD3基因的表达,以探讨SMYD3对乳腺癌MCF-7细胞增殖的调控机制机制。方法:以MTT法和软琼脂克隆形成实验研究抑制或增强SMYD3基因表达对细胞增殖的影响,以RT-PCR法和Western印迹法检测MCF-7细胞经转染后,胞内SMYD3、ERK/MAPK通路相关蛋白及其磷酸化产物,以及凋亡和细胞周期调控相关蛋白表达水平的变化。结果:用针对SMYD3基因的shRNAs表达质粒转染MCF-7细胞后,其SMYD3基因mRNA和蛋白表达水平下调,细胞生长受到抑制,细胞中ERK1/2、CyclinD1和CDK4蛋白水平明显下调;软琼脂克隆形成实验显示,增强SMYD3基因表达能明显促进MCF-7细胞克隆形成。结论:SMYD3可通过激活ERK/MAPK信号转导通路和上调细胞周期相关蛋白CyclinD1和CDK4的水平提高肿瘤细胞的增殖能力。
- 任天年何赟绵汤锋张婷沈晶奚涛
- 关键词：RNA干扰细胞外信号调节激酶1/2细胞周期蛋白D1磷酸化
- 乌索酸诱导人单核细胞白血病细胞株THP-1分化的研究被引量：5
- 2010年
- 乌索酸是一种常见的五环三萜类化合物,本文考察了其对原单核白血病细胞株THP-1的分化诱导作用。乌索酸作用72h后,通过显微镜形态观察,部分THP-1细胞贴壁生长,形态具有向巨噬细胞分化的特征。结晶紫染色结果显示细胞贴壁程度呈剂量依赖型增长。利用流式细胞分析技术分化标志物,发现CD11b和CD14阳性细胞百分比均有显著上调。Western blotting结果表明乌索酸能上调分化相关蛋白C/EBPα的p42亚基并且下调分化负调控因子c-myc的蛋白水平,且对二者的表达调控作用具有浓度和时间相关性。因此,乌索酸能够诱导THP-1细胞向单核/巨噬细胞方向分化。其作用机制可能是上调C/EBPα的p42亚基,进而下调c-myc,从而达到分化诱导作用。
- 张婷沈晶任天年刘昆梅奚涛
- 关键词：乌索酸分化白血病
- 乌索酸通过抑制A549细胞中ERK的激活而抑制COX-2的表达(英文)被引量：1
- 2011年
- 研究乌索酸对A549细胞的抗肿瘤作用及其机制。首先,通过MTT方法检测乌索酸对A549细胞增殖的影响;然后,用Western blot方法检测乌索酸对COX-2表达水平及MAPKs的作用。结果表明,乌索酸能够抑制A549细胞的增殖,并能抑制COX-2的表达及ERK的激活,ERK特异性抑制剂PD98059能够与乌索酸协调抑制COX-2的表达。乌索酸能够抑制LPS刺激后A549细胞中COX-2的表达,其可能的作用机制是通过抑制ERK的激活。
- 王劲松沈晶张婷唐聪任天年奚涛
- 关键词：乌索酸环氧化酶-2丝裂原激活蛋白激酶
