何燕萍
- 作品数：8 被引量：15H指数：2
- 供职机构：解放军三二三医院更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金陕西省科学技术研究发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 辛伐他汀对脂多糖诱导新生大鼠心肌成纤维细胞NO生成和AT2R蛋白表达抑制的影响
- 2007年
- 目的研究辛伐他汀(Sim)对脂多糖(LPS)调控心肌成纤维细胞(CFs)一氧化氮(NO)生成和血管紧张素Ⅱ受体2型(AT2R)蛋白表达的干预效应。方法体外培养新生大鼠CFs,以第1代CFs作为实验对象,采用硝酸还原酶法测定细胞内NO产量,Western blot检测细胞AT2R蛋白的表达,以AT2R/β-actin值对AT2R表达进行半定量。结果与LPS(10mg/L)单独作用组相比,0.01μmol/L和0.1μmol/L Sim与LPS共同作用组CFs的NO生成和AT2R/β-actin值无显著差异;在1μmol/L和10μmol/LSim与LPS共同作用组,NO生成量显著低于LPS单独作用组(均P<0.01),而AT2R/β-actin值显著高于LPS单独作用组(分别有P<0.05和P<0.01)。结论高浓度Sim可拮抗LPS引起的NO生成增加和AT2R蛋白表达下降。
- 刘少伟赵连友郑强荪尚福军张丽娟刘慧何燕萍赵晓燕
- 关键词：他汀类药物心肌成纤维细胞
- 糜酶介导心脏成纤维细胞增殖中转化生长因子β_1的作用被引量：7
- 2008年
- 目的探讨糜酶对大鼠心脏成纤维细胞（CFs）增殖的影响及其与转化生长因子β1（TGF-β1）信号的关系。方法用胰酶消化法分离、培养新生SD大鼠的CFs，采用四氮唑盐（MTT）比色法（A490值）测定细胞数目，[^3H]脱氧胸腺嘧啶核苷（[^3H]-TdR）掺入法测定CFs的DNA合成速率，逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测TGF-β1的mRNA表达水平。结果糜酶以剂量依赖方式增加CFs数目与DNA合成速率。15、30和60ng／mL糜酶组的A490值分别为0．263±0．033、0．348±0．031和0．387±0．026，均明显高于对照组的A490值（0．201±0．019，P〈0．01）。15、30和60ng／mL糜酶组的[^3H]-TdR掺入率均显著高于对照组（P〈0．01）；糜酶抑制剂预处理抑制糜酶引起的CFs数量与[^3H]-TdR掺入率的增加。糜酶以剂量依赖方式增加CFs的TGF-β1 mRNA表达水平。其中15和30ng／mL糜酶组的TGF-β1 mRNA表达水平分别为0．650±0．040和0．843±0．021，均显著高于对照组（0．417±0．031，P〈0．01）。缬沙坦和PD123319预处理都不影响糜酶引起的CFs数目、[^3H]-TdR掺入率和TGF-β1 mRNA水平的变化。TGF-β1中和抗体预处理却能抑制糜酶引起的CFs A490值和[^3H]-TdR掺入率的变化（P〈0．01）。结论糜酶具有促进大鼠CFs增殖的作用，其机制可能与TGF-β1基因表达上调有关，该作用与血管紧张素Ⅱ途径无关。
- 赵晓燕赵连友郑强荪陆小龙何燕萍
- 关键词：糜酶心脏成纤维细胞转化生长因子Β1
- 辛伐他汀对血管加压素诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响及其与小窝蛋白-1表达的关系被引量：1
- 2008年
- 目的研究辛伐他汀（simvastatin，Sim）对精氨酸血管加压素（arginine vasopressin，AVP，简称血管加压素）诱导成年大鼠心肌成纤维细胞（CFs）增殖的影响及其与小窝蛋白-1（caveolin-1，cavl）的关系。方法离体培养成年大鼠CFs，以四氮唑盐（MTT）比色法检测CFs的增殖，流式细胞分析仪测定其细胞周期，蛋白免疫印迹法检测cavl蛋白的表达。观察carl在AVP诱导大鼠CFs增殖前后及Sire干预后的变化。结果10^-7mol／LAVP干预24h后，MTT比色法检测CFs的吸光值（A）（0．24±0．03）较对照组（0．15±0．02）显著增高（P〈0．01）；给予10^-8 -10^-5mol／L的Sim和AVP共同干预后，CFs的A值呈递减趋势，分别为0．22±0．03、0．21±0．02、0．19±0．02和0．17±0．02，均较AVP组降低，差异具有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。以10^-7mol／L的AVP干预24h后，CFsS期的百分率（19．52±1．07）和增殖指数（48．25±1．27）较对照组（分别为7．02±0．27和18．93±3．03）均显著增高（均P〈0．01）；10^-7～10^-5mol／LSim与10^-7 mol／LAVP联合干预组CFs S期的百分率和增殖指数均较AVP单独干预组降低，差异具有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。10^-7mol／L的AVP分别与10^-8 - 10^-5moFL的Sim共同干预后，cavl蛋白的表达呈浓度依赖性地减少。甲羟戊酸（MVA）可逆转Sim对CFs增殖的抑制效应，并拮抗Sim诱导的cavl蛋白表达的降低。结论Sim可抑制AVP诱导的CFs增殖，Sim的干预效应可能受到cavl蛋白表达的调节。
- 何燕萍赵连友郑强荪刘少伟赵晓燕陆晓龙
- 关键词：小窝蛋白-1血管加压素辛伐他汀心肌成纤维细胞增殖
- 小窝蛋白-1反义寡核苷酸在AVP诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖erk1/2信号转导中的作用及辛伐他汀的干预效应
- 2011年
- 目的研究小窝蛋白-1反义寡核苷酸(cav1-AS ODN)在血管加压素(AVP)诱导的成年大鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖erk1/2信号转导中的作用及辛伐他汀(Sim)对cav1表达的干预效应。方法采用脂质体导入法将cav1-AS ODN导入离体培养的成年大鼠CFs,用3H-TdR掺入法定量观察CFs增殖,蛋白免疫印迹法分析cav1-AS ODN对AVP诱导大鼠CFs增殖后磷酸化erk1/2(p-erk1/2)、p21和细胞周期蛋白A(cyclin A)表达变化及Sim对cav1表达的影响。结果 cav1-AS ODN与10-7 mol/L的AVP共同干预组,大鼠CFs内3H-TdR掺入率和p-erk1/2蛋白表达量分别相当于空白对照组的(212±6)%和(7.9±0.3)%,10-7mol/L的AVP单独干预组的3H-TdR掺入率和p-erk1/2表达量分别相当于空白对照组的(172±4)%和(5.7±0.2)%,两组比较差异非常显著(P<0.01)。cav1-AS ODN单独干预或与10-7mol/L的AVP共同干预大鼠CFs 24 h后,两组CFs内p21表达丰度均较空白对照组下降,cyclin A表达丰度升高。β-环糊精、黄体酮或Sim可减少CFs胞膜上cav1蛋白表达。用10、15或20μg/ml胆固醇分别与10-7 mol/L Sim共同干预CFs 24 h后,CFs胞膜上cav1蛋白表达量分别相当于对照组的(86±3)%(、91±4)%和(94±5)%,与10-7mol/L Sim单独作用CFs组(66±4)%比较,均有显著的统计学差异(P<0.05,P<0.01)。结论 cav1-AS ODN可增强AVP促CFs增殖的作用,Sim降胆固醇作用影响CFs胞膜上cav1蛋白表达,从而影响CFs增殖。
- 何燕萍杨军岭赵连友刘少伟
- 关键词：小窝蛋白-1反义寡核苷酸血管加压素辛伐他汀心肌成纤维细胞
- 蛋白激酶C-细胞外信号调节激酶1/2通路介导精氨酸升压素对成年大鼠心肌成纤维细胞的促增殖作用(英文)
- 2008年
- 精氨酸升压素(arginine vasopressin,AVP)是高血压和心力衰竭时激活的神经体液和血流动力学因子,同时,它还具有直接的生长刺激作用。我们以往的研究显示AVP可诱导新生大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)增殖。本研究旨在进一步观察AVP是否对成年大鼠CFs具有促增殖作用,并探计其机制。采用组织块法培养成年大鼠CFs,用[3H]-TdR掺入法和流式细胞仪方法观察AVP作用下CFs的DNA合成和细胞周期分布。根据特异性底物髓磷脂基质蛋白(myelin basic protein,MBP)的磷酸化水平测定细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase1/2,ERK1/2)的活性。用Western blot检测ERK1/2的磷酸化和p27Kip1、细胞周期蛋白D1、A、E的表达。结果显示,AVP(0.1μmol/L)可促进成年大鼠CFs的DNA合成,该作用可被V1受体拮抗剂d(CH2)5[Tyr2(Me),Arg8]-vasopressin(0.1μmol/L)阻断,而不受V2受体拮抗剂desglycinamide-[d(CH2)5,D-Ile2,Ile4,Arg8]-vasopressin(0.1μmol/L)的影响。AVP可激活ERK1/2,用蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)激动剂佛波酯(phorbol12-myristate13-acetate,PMA,30nmol/L,5min)急性刺激可模拟该作用,而PMA持续慢性作用(2.5μmol/L,24h)耗竭PKC后则抑制AVP对ERK1/2的激活。AVP可抑制p27Kip1的蛋白表达,升高细胞周期蛋白D1、A和E的表达,同时促进细胞周期由G0/G1期进入S期。ERK1/2抑制剂PD98059(30μmol/L)阻断AVP对DNA合成、p27Kip1、细胞周期蛋白D1、A和E蛋白表达的作用,并抑制细胞周期进程。以上结果表明,AVP可促进成年大鼠CFs增殖,该作用由V1受体和PKC-ERK1/2通路介导。AVP可通过ERK1/2调控p27Kip1、细胞周期蛋白D1、A和E的表达,从而促进成年大鼠CFs的细胞周期进程。
- 何燕萍赵连友郑强荪刘少伟赵晓燕陆晓龙牛晓琳
- 关键词：精氨酸升压素细胞外信号调节激酶1/2P27^KIP1心肌成纤维细胞
- 小窝与心脏细胞信号转导研究概况被引量：1
- 2008年
- 随着近年生物学技术的进展,人们对小窝结构及小窝蛋白的研究逐渐深入。研究发现,小窝蛋白是小窝的标志性蛋白,小窝含有丰富胆固醇的膜微区,是许多重要的信号转导的枢纽,对维持细胞功能及细胞的生物学行为起关键性的影响,进而与机体的生理病理学变化相关。在心脏细胞上,对小窝及小窝蛋白的研究有助于探索心脏疾病的发生发展。本文简述了近年来心脏细胞上信号转导与小窝关系的研究概况。
- 何燕萍赵连友
- 关键词：小窝小窝蛋白信号转导心脏细胞
- 脂多糖对心肌成纤维细胞血管紧张素Ⅱ2型受体蛋白表达的影响及辛伐他汀的干预效应被引量：2
- 2007年
- 目的观察脂多糖(LPS)对心肌成纤维细胞(CFs)的一氧化氮(NO)生成和血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)蛋白表达的影响,研究辛伐他汀对LPS调控NO生成和AT2R蛋白表达的干预效应。方法体外培养大鼠CFs,采用硝酸还原酶法测定CFs的NO产量,用Western blot检测CFs的AT2R蛋白表达。结果1、10、100μg/mLLPS干预组明显减少AT2R(P<0.05),增加NO(P<0.05);用NO合酶抑制剂Nω-左旋精氨酸甲酯(L-NAME)预处理CFs,24h后可明显对抗LPS对CFs的AT2R表达下降及NO增加的作用,辛伐他汀(10-5mol/L)也有类似L-NAME的效果。结论LPS浓度依赖地抑制AT2R蛋白表达,该作用与其诱导细胞内NO生成有关;辛伐他汀可通过减少NO生成,拮抗LPS对AT2R蛋白表达的抑制效应。
- 刘少伟赵连友郑强荪尚福军张丽娟刘慧何燕萍赵晓燕
- 关键词：他汀类药物心肌纤维化
- 糜酶对大鼠心脏成纤维细胞增殖和胶原合成的影响被引量：6
- 2008年
- 目的探讨糜酶对大鼠心脏成纤维细胞(CFs)增殖和胶原合成的影响。方法用胰酶消化法分离、培养新生SD大鼠的CFs,采用MTT比色法(A490值)测定细胞数目,流式细胞术分析细胞周期,3H-脯氨酸掺入法测定总胶原合成,RT-PCR检测Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA的表达。结果①糜酶以剂量依赖方式增加CFs的数目。其中15、30和60μg/L组的A490值分别为0.263±0.033、0.348±0.031和0.387±0.026,均高于对照组的A490值(0.201±0.019),并有非常显著性差异(P<0.01)。②随着糜酶作用浓度的增加,CFs在G0/G1期的百分率逐渐减少,S期的百分率和细胞增殖指数逐渐增加。其中15、30和60μg/L组与对照组相比,上述各项指标均有显著或非常显著性差异(P<0.05或P<0.01)。③糜酶以剂量依赖方式增加CFs的3H-脯氨酸掺入量。其中15、30和60μg/L组的3H-脯氨酸掺入量分别为(520±75)、(684±62)和(769±58)cpm/孔,均高于对照组[(435±60)cpm/孔],差异有显著或非常显著性意义(P<0.05或P<0.01)。④随着糜酶作用浓度的增加,CFs的Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA表达水平均呈递增趋势。其中15、30和60μg/L组的Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的水平均显著高于对照组(P<0.01)。结论糜酶具有促进CFs增殖和胶原合成的作用,提示其可能在心肌纤维化过程中发挥重要作用。
- 赵晓燕赵连友郑强荪何燕萍陆小龙
- 关键词：糜酶心脏成纤维细胞增殖胶原
