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傅蓉: 作品数：13 被引量：56H指数：5; 供职机构：福州大学生物科学与工程学院生物工程研究所更多>>; 发文基金：福建省自然科学基金国家自然科学基金教育部重点实验室开放基金更多>>; 相关领域：生物学轻工技术与工程理学化学工程更多>>

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黑曲霉内切β-葡聚糖酶的纯化和性质被引量：6: 2002年; 黑曲霉(Aspergillus niger)的粗酶滤液经过硫酸铵沉淀和四种色谱CM-Sephadex C-50离子交换色谱、DEAE-Sephadex A-50离子交换色谱、POROS 20 HQ离子交换色谱和TSK-G3000SW凝胶色谱,从中提纯了一个新的内切β-葡聚糖苷酶该酶经SDS-PAGE电泳检测分子量为36.0KD,该酶活力的最适温度为70℃,最适pH值为3.6 纯化后的该酶只能降解羧甲基纤维素,不能降解微晶纤维素,对蔗糖、麦芽糖和纤维素也不起作用。其N-末端部分氨基酸序列为V F E W F G C N E C G A E F Tx N I P G。; 郭春腾傅蓉邓文汉林向阳饶平凡; 关键词：黑曲霉纯化

抗体免疫亲和色谱在蕲蛇酶分离纯化中的应用: 用免疫亲和色谱法及TSK G3000SW凝胶色谱从蕲蛇粗毒中分离出蕲蛇酶注射液的类凝血酶两组分之一--P3.以离子交换色谱纯化的P3作为抗原免疫产蛋鸡.用P3-POROS AL灌注亲和色谱柱从卵黄中分离抗P3特异性抗体...; 傅蓉; 关键词：凝血酶纯化; 文献传递

TAT-PTD融合蛋白可能存在的跨膜递送作用机制被引量：15: 2006年; 为探讨TATPTD融合蛋白的跨膜递送作用机制,采用DNA重组技术构建pGEXTATGFP表达质粒.在E.coliBL21表达GST-TAT-GFP,并用谷胱甘肽(glutathione)Sepharose4B亲和柱进行纯化.GST-TAT-GFP在不同条件下与细胞的作用结果表明,GST-TAT-GFP能有效进入HeLa、SMMC7721、L02和BEL7402细胞,GST-TAT-GFP在递送时对时间和浓度有依赖关系.同时,温度对GST-TAT-GFP跨膜作用具有明显的影响,GST-TAT-GFP的跨膜作用受代谢抑制剂的影响很小,肝素的存在能明显抑制GST-TAT-GFP跨膜进入细胞的能力,GST-TAT-GFP对细胞活性没有影响.这些结果说明,TATPTD可能是通过与细胞表面的硫酸乙酰肝素等受体相结合介导融合蛋白跨膜递送进入细胞的.; 何火聪刘树滔潘剑茹傅蓉陈菁陈躬瑞饶平凡; 关键词：跨膜递送

Tat短肽跨膜递送作用的研究(I)——模型蛋白Tat-GFP在毕赤酵母中的表达与纯化被引量：1: 2004年; 为探讨Tat短肽的跨膜递送作用,利用DNA重组技术在毕赤酵母表达系统中表达融合蛋白Tat-GFP,通过硫酸铵沉淀、SephadexG-75凝胶色谱和POROS-20HQ离子交换色谱分离纯化该融合蛋白.表达和纯化了分子量约为29kD的融合蛋白Tat-GFP,在经融合蛋白作用的细胞内检测到融合蛋白的存在.这个结果可望为外源性蛋白进行细胞内治疗提供一种新的工具.; 何火聪傅蓉刘树滔陈躬瑞饶平凡; 关键词：跨膜递送毕赤酵母

硫酸铵盐析在蕲蛇毒凝血酶样酶分离中的应用被引量：5: 2002年; 探讨了硫酸铵沉降对蕲蛇毒中凝血酶样酶的初步分离效果的影响 ,确定出最佳处理条件 :2 .0 %的蕲蛇毒在pH 5 .0及 4 5 %饱和度的硫酸铵溶液中盐析沉降蕲蛇毒中非凝血酶样酶杂蛋白。; 郭春腾宁千年薛伟明傅蓉饶平凡; 关键词：凝血酶样酶色谱分离 PH值

TAT蛋白转导结构域介导融合蛋白在小鼠活体的跨膜递送作用被引量：1: 2010年; 目的探讨跨膜递送短肽——TAT蛋白转导结构域(简称TAT)介导的与其融合的活性蛋白在活体的跨膜递送作用。方法以融合蛋白GST-TAT-GFP,GST-GFP-TAT和GST-GFP为研究模型蛋白,不经过蛋白质的变性处理、直接通过向小鼠腹腔注射和皮肤涂抹这两种含TAT的融合蛋白及作为对照的融合蛋白GST-GFP,一定时间作用后取体内器官和皮肤做冷冻切片,荧光显微镜检测这些融合蛋白的跨膜递送情况;并对分别融合在C端或者N端的TAT介导GFP在活体动物体内和皮肤的跨膜递送作用进行对比。结果腹腔注射实验结果表明,TAT可以介导不经过蛋白质的变性处理的融合蛋白GST-TAT-GFP和GST-GFP-TAT跨膜递送进入到小鼠的心脏、肝、肾、脾和肺,甚至脑组织;其中GST-GFP-TAT跨膜递送效率比GST-TAT-GFP更高。结构模拟分析提示GST-GFP-TAT与GST-TAT-GFP中的TAT的暴露情况不同可能是造成两种蛋白跨膜递送活性差异的重要因素。皮肤实验的结果则表明TAT不仅介导融合蛋白GST-TAT-GFP和GST-GFP-TAT进入小鼠表皮,而且使其进入小鼠皮肤的真皮层。结论 TAT可以跨膜递送不经过变性处理的融合蛋白进入小鼠皮肤和体内,递送效率可能与TAT的暴露程度相关;这些结果为在蛋白质疗法方面应用TAT提供了进一步的理论依据。; 刘树滔何火聪陈菁傅蓉潘剑茹饶平凡; 关键词：融合蛋白跨膜递送器官

Tat蛋白转导区域位于融合蛋白C端时的跨膜递送作用: Tat蛋白的蛋白转导区域(PTD)的核心序列由11个氨基酸(YGRKKRRQRRR)组成,该多肽片段介导Tat蛋白的转导及其在细胞内的定位.利用这一特性,可将与PTD-Tat融合的外源蛋白诸如卵清蛋白、超氧化物歧化酶、过...; 陈菁傅蓉刘树滔何火聪饶平凡; 关键词：TAT蛋白融合蛋白分子生物学; 文献传递

三种不同抗体免疫亲和色谱介质的比较: 分别以三种不同的抗体免疫亲和色谱材料POROS HY,CNBr-活化的Sepharose 4B和Actigel ALD为介质,偶联蕲蛇凝血酶样酶组分的多克隆抗体,对三种材料的结合容量、偶联度、稳定性等进行比较,分析.; 傅蓉郭春腾林向阳施群焰; 文献传递

小鼠酪氨酸酶的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：1: 2005年; 采用逆转录-聚合酶链式反应(RT -PCR)方法,从小鼠黑色素瘤总RNA中扩增得到小鼠酪氨酸酶的cDNA .该基因重组到T7启动子控制下的表达载体pET - 2 2b(+)中,构建表达质粒pET -TYR并转化大肠杆菌Rosetta (DE3) .SDS -PAGE及蛋白质序列测定表明,经0 .8mmol/L异丙基硫代- β-D -半乳糖苷(IPTG)诱导后,可高效表达重组的小鼠酪氨酸酶,表达量约占菌体总蛋白质的2 5 % 。; 邓文汉卢菀华傅蓉陈菁饶平凡刘树滔; 关键词：基因克隆基因表达大肠杆菌

从黑曲霉发酵的果胶粗酶中分离纯化内切聚半乳糖醛酸酶被引量：10: 2002年; 使用硫酸铵分级沉淀、CM -SephadexC - 5 0弱阳离子、POROSPE疏水层析和POROSHQ2 0强阴离子交换分离技术 ,从黑曲酶发酵的果胶酶粗品中纯化出一种电泳纯的果胶酶 .经SDS -PAGE电泳测定其相对分子量约 41.8kD ,最适pH和最适温度分别为 5 .0和 36℃ .; 林洪宝傅蓉薛伟明郭春腾饶平凡; 关键词：黑曲霉果胶酶纯化发酵生产

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