刘国琴
- 作品数：52 被引量：270H指数：9
- 供职机构：中国农业大学生物学院植物生理学与生物化学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省教育厅科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学文化科学历史地理更多>>
- 豌豆肌动蛋白异型体(PEAc1)与绿色荧光蛋白融合基因的原核表达与特性分析被引量：18
- 2004年
- 肌动蛋白普遍存在于真核生物细胞中, 并在细胞生命活动中发挥重要作用. 在细胞中, 肌动蛋白多以异型体(isoform)形式存在. 植物肌动蛋白异型体的大量获得和理化特性分析一直是一个难题. 对豌豆肌动蛋白异型体PEAc1与组氨酸标签(His-tag)、绿色荧光蛋白(GFP)进行了基因融合和原核表达. 通过脲变性、梯度脲透析复性、镍柱亲和层析的方法从包涵体中纯化出大量、高纯度的PEAc1-GFP融合蛋白(> 2 mg/L培养物). 理化特性分析表明, 它同鸡骨骼肌肌动蛋白一样, 单体PEAc1-GFP能与DNaseⅠ 结合并显著抑制后者酶活性; 单体PEAc1-GFP能聚合成带有绿色荧光的丝状结构; 聚合的PEAc1- GFP能被微丝的特异标记物鬼笔环肽(phalloidin)标记; PEAc1-GFP与鸡骨骼肌肌动蛋白的聚合曲线趋势基本一致, 聚合临界浓度为0.24 mmol/L; 聚合的PEAc1-GFP能激活肌球蛋白Mg-ATPase活性, 其激活比率随浓度的增加而增加, 在1 mg/mL浓度下, 能激活4倍以上. 上述结果表明, 带有组氨酸标签和GFP标记的PEAc1表现出和天然肌动蛋白相似的理化特性; 基因融合、原核表达、变性、复性及亲和纯化是获得大量高纯度植物肌动蛋白异型体的有效方法.
- 张少斌任东涛徐小静刘国琴
- 关键词：肌动蛋白原核表达理化性质豌豆绿色荧光蛋白
- 拟南芥AtWHY1/AtWHY3能调控动蛋白AtKP1的转录抑制
- 刘国琴熊继元
- 钝顶螺旋藻(Sp.-D)藻胆蛋白的提取被引量：33
- 1999年
- 钝顶螺旋藻（Sp.－D）藻胆蛋白的粗提比较方便，用0．001mol／L磷酸盐缓冲液浸提，经反复冻融（三次）处理，可以获得纯度（AλAmax／A280）为0．54的藻胆蛋白粗提液；对粗提液用硫酸铵盐析，可使其纯度略有提高，达到0．59左右，但粗提液中藻蓝蛋白（PC）和别藻蓝蛋白（APC）仍未分离开：进一步通过连续两次羟基磷灰石（HA）柱层析纯化之后，藻蓝蛋白（PC）的纯度可达到4.1，别藻蓝蛋白（APC）的纯度可达到3．5。
- 彭卫民商树田刘国琴傅友兰吴庆余
- 关键词：螺旋藻钝顶螺旋藻藻胆蛋白
- 拟南芥中AtMEK_5激活导致不依赖于水杨酸信号途径的细胞死亡
- 2004年
- 用MBP作为磷酸化底物的凝胶内激酶活性分析结果显示,在转基因拟南芥植株中诱导表达组成型激活的AtMEK5蛋白(AtMEK5DD)引起的细胞死亡和用带有avr Rpt2基因的病原菌P.SyringaeDc3000 处理转基因植株导致的超敏性细胞死亡过程中,44和48 kD的2个MAPK均被激活;AtMEK5DD在NahG 转基因烟草叶片中瞬时表达和在拟南芥杂交植株AtMEK5DD×NahG中诱导表达依然引起细胞死亡,且杂交植株中AtMEK5DD表达并未引起水杨酸含量的显著变化;Northern检测结果显示,病原菌处理可显著诱导AtMEK5DD转基因植株中JPAL,PR1和PR5基因的大量转录;而AtMEK5DD的表达仅导致PR5基因的大量转录,表明有别于超敏性细胞死亡的水杨酸依赖特性,AtMEK5激活引起的细胞死亡不依赖于水杨酸信号途径.
- 刘红霞王滢周天虹孙宇静刘国琴任东涛
- 关键词：细胞死亡DDMEKPR信号途径转基因植株
- 一种解剖针
- 本实用新型涉及一种解剖用的器械，特别是一种解剖针。一种解剖针，包括针头（1）以及针柄（7），其中，所述针柄（7）下端部设有小孔（2）；针头（1）的根部可移除地固定在所述小孔（2）内；在所述针柄外表面设置有握持部（4）；在...
- 杨大祥刘国琴
- 文献传递
- 花粉高尔基囊泡类动蛋白的鉴定被引量：4
- 1994年
- 在萌发的烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ａｌａｔａ）花粉管顶端，有囊泡状的颗粒被牛脑动蛋白重链（ｋｉｎｅｓｉｎｈｅａｖｙ ｃｈａｉｎ）的单克隆抗体所识别。用蔗糖密度梯度离心法从榛木（Ｃｏｒｙｌｕｓ ａｖｅｌｌａｎａ）花粉中分离得到高尔基囊泡，体外免疫胶体金处理后可被标记。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹表明，分子量为１００ ｋＤ的多肽大量存在于高尔基囊泡，此多肽可与动蛋白单克隆抗体进行特异性反应，证明花粉高尔基囊泡上有类动蛋白，其重链分子量为１００
- 刘国琴阎隆飞
- 关键词：花粉
- 盘基网柄菌肌球蛋白分子缺失对生长、发育的影响被引量：1
- 1999年
- 将 4种在盘基网柄菌肌球蛋白分子尾部不同部位缺失突变 (internaldeletionmutation)的重链基因MyaaΔ82 4～ 941 ,MyaaΔ934～ 1 45 4,MyaaΔ934～ 1 1 94,MyaaΔ1 1 5 7～ 1 45 4,用标准电转化方法导入内源肌球蛋白重链基因封闭了的细胞 (myosinheavychaingeneT_nullcell)中表达 ,以野生型肌球蛋白重链基因细胞为对照 ,测试比较了它们在振荡培养下细胞生长和分裂、多细胞发育成子实体的体内功能 .结果表明 ,肌球蛋白分子缺失对盘基网柄菌的正常生长和分裂有影响 ,且尾部缺失愈长影响越大 .
- 舒适上田太郎刘爱校刘国琴阎隆飞
- 关键词：盘基网柄菌肌球蛋白发育
- 显微设备目镜的通用数码相机接口
- 本实用新型涉及一种显微设备通用配件，特别是一种显微设备目镜的通用数码相机接口，包括：连接圆筒（1），一端直接套在显微设备的目镜上，另一端有外螺纹；调节圆筒（2），一端有适于与连接圆筒（1）的端部外螺纹连接的内螺纹，另一端...
- 杨大祥刘国琴许也吴丹
- 文献传递
- 研究型大学生物科学教学组织模式的探索与实践
- 2011年
- 面对生命科学研究热潮,中国农业大学生物学院锐意改革,成立"生物学院教学中心",创建"教学委员会→教学中心→系列课程团队"三级教学组织管理新模式,发挥教学团队作用,调整课程体系,深化课程建设,促进科研成果向教学平台转化,教学改革取得良好进展。
- 刘国琴
- 关键词：教学中心团队建设
- 多角度、多层次提升本科生的教学与管理水平——上海交通大学、复旦大学、浙江大学教学考察总结与体会
- 通过对上海交通大学、复旦大学、浙江大学三所国内著名大学的生命科学学院的实验教学、理论教学及本科生管理等方面的考察和分析，提出了一些可资借鉴的宝贵的经验，阐述了高等学校在新形势下多角度、多层次提升本科生教学与管理水平的迫切...
- 陈文峰关国华刘国琴李颖袁红莉
- 关键词：本科生教育教学管理实验教学
- 文献传递
