刘惠萍
- 作品数：28 被引量：125H指数：7
- 供职机构：中国人民解放军更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大剂量HBsAg疫苗对小鼠细胞免疫应答的调节作用被引量：3
- 2003年
- 目的 :探讨大剂量HBsAg疫苗对机体细胞免疫应答的影响。方法 :不同剂量HBsAg疫苗两次免疫小鼠后 ,用氚 -胸腺嘧啶核苷 ( [3 H]-TdR)掺入法 ,ELISA方法分别测定免疫鼠T淋巴细胞增殖能力 ,细胞培养上清中白细胞介素 - 2 (IL - 2 ) ,γ干扰素 (IFN -γ)含量及血清中抗HBsIgG2a阳转率。结果 :大剂量HBsAg疫苗单次免疫后 ,小鼠T淋巴细胞增殖能力显著强于对照组 (P <0 0 5 ) ;Th1型细胞因子IL - 2、IFN -γ显著多于对照组 (P <0 0 5 ) ;抗HBsIgG2a阳转率显著高于小剂量组 (P <0 0 1)。加强免疫后 ,各项指标增高更显著 ,小剂量组才呈现显著性增高。结论 :大剂量HBsAg疫苗可诱生特异性细胞免疫应答 ,并使细胞免疫趋向Th1型。
- 熊一力刘惠萍祖萍贾彦征张宜俊
- 关键词：乙型乙型细胞小鼠
- 治疗性双质粒HBV DNA疫苗的体外转染表达与鉴定
- 探讨治疗性双质粒HBV DNA疫苗转染COS-7细胞后目的基因的表达情况,为进一步研究HBV DNA疫苗的药效学机理提供依据。采用脂质体转染试剂LipofectarnineTM2000介导,将带有preS2+s的重组疫苗...
- 饶桂荣陈光明刘惠萍何晓嫱黄英杨富强莫国玉
- 关键词：COS-7细胞体外转染
- 文献传递
- 慢性重型乙型肝炎患者外周血树突状细胞表型和功能的研究被引量：3
- 2010年
- 目的:研究慢性重型乙型肝炎患者外周血树突状细胞(DC)表型、免疫功能和分泌细胞因子的特性。方法:从20例慢性重型乙型肝炎患者和10例健康人外周血中分离单个核细胞培养DC,用流式细胞仪检测DC的表面标志CD80和CD86的表达。用3H-TdR掺入法检测DC诱导混合性淋巴细胞反应(MLR)的能力。并用ELISA方法检测MLR中细胞因子IL-12的分泌水平。结果:慢性重型乙型肝炎患者组的DC细胞CD80、CD86的表达率较正常人组高(P<0.05),诱导MLR的能力也较强(P<0.05),MLR中细胞因子IL-12的分泌水平也较高(P<0.05)。结论:慢性重型乙型肝炎患者外周血树突状细胞免疫功能亢进,免疫刺激能力也较高。
- 郑曲波邹越前程涛刘惠萍
- 关键词：树突状细胞免疫功能
- 恢复期SARS患者外周血T淋巴细胞及亚群的变化
- 严重急性呼吸综合征(severe actue respira-tory syndrome,SARS)是一种新的急性呼吸道传染性疾病,由新型冠状病毒(SARS病毒)引起,严重的危害人们的健康。本研究追踪观察9例恢复出院后S...
- 程涛伍伟玲李灼亮罗显荣刘惠萍郑曲波谢庆孔祥平
- 文献传递
- 治疗型双质粒HBV DNA疫苗对食蟹猴免疫功能的影响被引量：3
- 2008年
- 目的评价治疗型双质粒HBV DNA疫苗(简称HBV DNA疫苗)诱导食蟹猴HBV特异性体液免疫和细胞免疫的效果。方法30只食蟹猴随机均分为5组(雌雄各半),分别重复肌注高剂量2000μg/kg、中剂量660μg/kg、低剂量200μg/kgEP介导HBV DNA疫苗,330μg/kg EP介导的佐剂质粒和PBS对照。在不同时间点以酶联免疫吸附法(ELISA)及酶联免疫斑点法(ELIS-POT)检测其血清抗-HBs水平并计数外周血单个核细胞(PBMCs)HBsAg特异性分泌IFN-γ的T细胞频数。结果食蟹猴接种不同剂量HBV DNA疫苗后第10周起均产生不同滴度的特异性抗体。16周时EP介导的HBV DNA疫苗高、中、低剂量组各3只食蟹猴中分别有3、2、3只HBsAg特异性IFN-γT细胞计数阳性;29周时高、中、低剂量组全部动物应答呈阳性,其计数结果分别为30.0±13.5SFCs/3×105PBMCs,30.7±26.3SFCs/3×105PBMCs及17.7±6.4SFCs/3×105 PBMCs;而相同时间点佐剂组和PBS对照组3只食蟹猴均为阴性。结论EP介导的HBV DNA疫苗能有效诱导食蟹猴产生HBsAg特异性体液和细胞免疫应答。
- 杨富强刘惠萍莫国玉谢锐姬陈光明侯金林
- 治疗性双质粒HBV DNA疫苗的纯化与检定被引量：1
- 2007年
- 目的研究双质粒HBVDNA疫苗(pS2.S和pFP)的纯化工艺,并建立质控标准。方法首先对两工程菌(DH5α/pS2.S和DH5α/pFP)的高效发酵菌体采用碱裂解法进行质粒初提;然后通过三步柱层析(依次为分子筛层析、亲和层析、阴离子层析)进行质粒纯化,并检测质粒含量、超螺旋比例、内毒素等,最后对终产品质粒溶液进行全面质量检定。结果质粒初提液通过分子筛层析后,去除了大量的RNA、宿主DNA、内毒素等,再经亲和柱纯化后获得了高比例的超螺旋质粒DNA,达95%,最后经阴离子柱层析有效去除内毒素,并浓缩了质粒,质粒得率为0.9～1.1mg/g菌,质粒总回收率达78%。三批终产品全面质量检定均符合规定。结论建立了稳定的双质粒HBVDNA疫苗(pS2.S和pFP)的纯化工艺及质量控制标准,为进一步研究奠定基础。
- 饶桂荣黄明杨富强莫国玉刘惠萍陈光明
- 关键词：DNA疫苗质粒纯化
- 治疗性双质粒HBV DNA疫苗的体外转染表达与鉴定被引量：4
- 2006年
- 目的:探讨治疗性双质粒HBVDNA疫苗转染COS-7细胞后目的基因的表达情况。方法:以脂质体转染试剂LipofectamineTM2000介导,将带有preS2+S基因的重组疫苗质粒pS2.S和带有hIL2+hIFNγ融合基因的重组佐剂质粒pFP分别转染COS-7细胞,同时设立空质粒转染和未转染细胞为对照组,于转染后24,48,72,96h采用ELISA法检测细胞培养上清的HBsAg、融合蛋白白细胞介素(IL-2)及干扰素(IFN-γ)的表达,并测定融合蛋白的IL-2、IFN-γ活性,采用ECLWesternblotting分析和鉴定目的蛋白preS2+S、IL-2及IFN-γ的分子质量大小。结果:双质粒在转染COS-7细胞后不同时间均可进行分泌表达,且48h时目的蛋白的表达量达峰值,其中表达的融合蛋白具有较高的IL-2和IFN-γ的生物学活性,pS2.S和pFP的转染上清分别在30.6ku和110ku处有特异性阳性反应条带。结论:HBVDNA疫苗质粒pS2.S和佐剂质粒pFP在COS-7细胞的最佳表达时间是转染后48h,并鉴定双质粒表达产物的分子质量大小分别为30.6ku和110ku。
- 饶桂荣刘惠萍何晓嫱杨富强莫国玉陈光明
- 大剂量HBsAg疫苗对HBV转基因小鼠细胞免疫调节的研究被引量：4
- 2005年
- 目的 研究大剂量HBsAg疫苗对HBV转基因小鼠 (Tg鼠 )细胞免疫应答的影响。方法 Tg鼠 4 8只 ,每只注射 6 μg(相当于人产生抗体剂量的 180倍 )的HBsAg疫苗后 ,用流式细胞术、氚 胸腺嘧啶核苷 (3 H TdR)掺入法和ELISA法 ,分别检测其树突状细胞(DC)、T淋巴细胞增殖及其诱生细胞因子IL 2、IFN γ的水平。结果 大剂量HBsAg疫苗组DC表面共刺激分子CD80、CD86和I Ek的阳性百分率 (% )均高于对照组 (P <0 0 5 ) ,特异T淋巴细胞增殖能力 8个月的cpm值 (10 0 77 2± 85 74 0 )显著高于 1周的 (5 32 9 1± 30 86 0 ) (P <0 0 5 ) ;其诱生细胞因子的水平 8个月时IL 2 (46 2 4± 12 2 5pg/ml)、IFN γ(976 1± 5 4 4 1pg/ml)显著高于 1周时IL 2 (15 6 1±78 7)、IFN γ(5 8 3± 4 9 5 ) (P <0 0 1)。结论 大剂量HBsAg疫苗能够增强Tg鼠细胞免疫应答能力 ,恢复对乙型肝炎抗原的应答。
- 刘惠萍熊一力施理张宜俊
- 关键词：转基因小鼠
- 登革热患者外周血CD4^+、CD8^+T细胞及IL-10的检测分析被引量：4
- 2006年
- 目的:观察登革热患者外周血CD4+、CD8+T细胞及白介素-10(IL-10)的变化,探讨其在登革热疾病的发生和发展中的作用。方法:12例健康人和18例登革热患者于治疗前后采静脉血,采用流式细胞仪检测CD4+、CD8+T细胞并计算CD4+/CD8+比值,ELISA法检测血清IL-10水平,同时作外周血白细胞、血小板计数。结果:与正常健康人和治疗后相比,登革热患者治疗前外周血CD4+细胞百分比、CD4+/CD8+比值明显降低(P<0.01),CD8+细胞百分比和血清IL-10显著增高(P<0.01),白细胞、血小板计数均明显下降(P<0.01);治疗后患者以上指标均与健康人无明显差异。结论:CD4+、CD8+T细胞在登革热病毒感染后异常激活,CD4+/CD8+比值明显降低,IL-10分泌增高,可能在登革热的发病中起重要作用。
- 程涛李灼亮伍伟玲刘惠萍谢庆
- 关键词：登革热白细胞介素10
- 大剂量HBsAg疫苗对小鼠细胞免疫应答的调节作用
- 2003年
- 目的：探讨大剂量HBsAg疫苗对机体细胞免疫应答的影响。方法不同剂量HBsAg疫苗两次免疫小鼠后，用氚-胸腺嘧啶核苷(^3H—TdR)掺入法，ELISA方法分别测定免疫鼠T淋巴细胞增殖能力，细胞培养上清中白细胞介素-2(IL-2)，γ干扰素(IFN—γ)含量及血清中抗HBs IgG2a阳转率。结果：大剂量HBsAg疫苗单次免疫后，小鼠T淋巴细胞增殖能力比对照组显著增强(P＜0．05)；Tb1型细胞因子IL-2、IFN—γ显著增高。(P均＜0．05)；抗HBs IgG2a阳转率显著高于小剂量组(P＜0．01)。加强免疫后，各项指标增高更显著，小剂量组才呈现有意义增高。结论:大剂量HBsAg疫苗可诱生特异性细胞免疫应答，并使细胞免疫趋向Th1型。
- 熊一力刘惠萍祖萍贾彦征张宜俊
- 关键词：大剂量HBSAG疫苗小鼠细胞免疫应答乙型肝炎表面抗原
