刘晓娜 作品数:14 被引量:11 H指数:2 供职机构: 长江大学动物科学学院 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 经济管理 更多>>
传染性法氏囊病重组亚单位疫苗免疫持续时间的研究 2008年 以三批次传染性法氏囊病(IBD)重组亚单位疫苗分别免疫SPF雏鸡和产蛋鸡,以琼脂免疫扩散试验检测鸡血清抗体或卵黄抗体,以其阳性率达到80%为免疫期确定依据。试验结果表明,IBD重组亚单位疫苗对青年鸡及产蛋鸡接种一次的免疫期为15~16周。 程太平 荣俊 刘晓娜 孙中杰关键词:传染性法氏囊病 重组亚单位疫苗 传染性法氏囊病病毒VP2基因在多杀性巴氏杆菌弱毒株中的表达及免疫原性研究 被引量:2 2008年 将重组质粒pET28 a-VP2转化禽多杀性巴氏杆菌弱毒株G190E40,探讨该转化菌表达的VP2是否具有免疫原性,以及重组表达质粒在转化菌内的稳定性。该转化菌在体外经IPTG或乳糖诱导,表达产物经AGP检测,VP2滴度可达1/4;经间接ELISA检测,VP2滴度可达1/512;经SDS-PAGE分析,出现VP2蛋白条带。结果表明,诱导表达的提取液中有一定量可溶性VP2。将pET28 a-VP2转化的禽多杀性巴氏杆菌弱毒株G190E40经诱导后,接种爱维茵肉仔鸡,21日龄及35日龄时,分别肌肉注射菌液0.1、0.2 m l/只(3×108个/m l活菌)。49日龄时,感染IBDV标准强毒株BC6/85。IBDVVP2血清抗体检测结果,不接种组(B)、0.1 m l接种组(C)、0.2 m l接种组(D)及空质粒转化菌接种组(E)的AGP抗体检测阳性率分别为0、65%、70%、0;间接ELISA抗体检测阳性率分别为0、80%、85%、0;IBDV强毒感染的免疫保护率分别为5%、75%、75%、5%。经t检验,B组与C组、B组与D组、E组与C组、E组与D组,P<0.05,差异均显著,但B组与E组、C组与D组,P>0.05,差异均不显著。免疫试验结果表明,诱导表达产物VP2可有效地刺激鸡体产生体液免疫应答,刺激鸡体建立的免疫力可以抵抗一定剂量强毒的攻击。在质粒稳定性测定中,第9代次及以后的3个代次,20个菌落的VP2目的基因PCR检测结果均为阴性,表明该质粒在禽多杀性巴氏杆菌弱毒株G190E40内是不稳定的。 程太平 荣俊 刘晓娜 邵伟 龚大春 杨待建关键词:多杀性巴氏杆菌 IBDV VP2基因 免疫原性 一种用大肠杆菌生产鸡传染性法氏囊病基因工程亚单位疫苗的方法 本发明涉及一种用于鸡传染性法氏囊病基因工程亚单位疫苗生产的菌种和用该菌种生产鸡传染性法氏囊病基因工程亚单位疫苗的方法,该菌种的特征是:Escherichia coli BL21/pBV220-VP2,CCTCC NO:M... 荣俊 程太平 刘晓娜 杨待建文献传递 湖北西部山区绿色资源产业化开发战略途径 李同明 傅廷栋 邢丹英 李秋洪 王雅鹏 费永俊 严奉宪 程泽信 马发生 刘武 鲍江峰 金明珠 刘晓娜 邱正明 吕宗浩 涂扬晟 周长辉 余德文 刘绍喜 章新国 张重才 郑琴缭 樊帆 此课题是2002年省教育厅下达的重大课题。研究此课题的背景是鉴于鄂西山区26个山区县市区虽拥有得天独厚的优势资源绿色资源,号称“绿色宝库”开发潜力极大,但由于绿色资源产业化开发战略途径选择失当,致使产业化经营规模小,加工...关键词:关键词:绿色资源 IBDV VP2基因重组质粒pBV220表达条件的优化 被引量:3 2007年 采用三角瓶小量法振荡培养,对含传染性法氏囊病病毒VP2基因的重组质粒pBV220在大肠埃希菌BL21内表达条件进行优化。在37。C时诱导,对起始OD600值(0.40±0.025~0.65±0.025)进行筛选;在42℃时诱导,对起始OD600值(O.40±0.025~0.65±0.025)进行筛选;在37℃和42℃时诱导,分别对诱导时间(5、6、7、8h)及待选培养基(R1、R2、R3)进行筛选。以菌体湿重和菌体VP2蛋白表达水平两个指标进行统计分析及综合评价。结果表明,37℃时诱导,最适宜起始OD600为0.45±0.025,最佳诱导时间为7h,最佳培养基是R1;42℃时诱导,最适宜起始OD600为0.40±0.025,最佳诱导时间为5h,最佳培养基是R2。42℃时的每一诱导时间组菌体湿重和VP2表达水平都显著低于37℃时。因此,以重组质粒pBV220的大肠埃希菌BL21表达IBDVVP2基因,在37℃时诱导表达要比42℃时好。 程太平 荣俊 刘晓娜 邹浩勇 齐晓亮 樊友净关键词:传染性法氏囊病病毒 PBV220 检测鸡IBDV血清抗体的IHA的建立 被引量:1 2007年 以大肠杆菌表达的传染性法氏囊病病毒(IBDV)衣壳蛋白VP2致敏绵羊红细胞,建立间接血凝试验(IHA)。对参考阳性血清(鸡新城疫病毒抗血清、鸡传染性支气管炎病毒抗血清、鸡禽痘病毒抗血清)及鸡参考阴性血清等分别进行微量IHA,加上抑制试验,结果证实其特异性高。对商品肉用仔鸡的30个血清样品、IBDV重组亚单位疫苗免疫试验鸡的20个血清样品,分别进行微量IHA和琼脂免疫扩散试验(AGID),将肉用仔鸡血清的阳性检出率进行t检验(P<0.05);而20份免疫试验鸡血清样品IHA阳性检出率与AGID阳性检出率均为100%。对30份肉用仔鸡血清样品和20份免疫试验鸡血清样品检测得到的阳性血清的平均滴度进行方差分析,IHA的平均滴度与AGID的平均滴度之间均具有显著性差异。对20份免疫试验鸡血清及IBDV参考阳性血清以3个批次和第2批次IHA试验制剂,分别进行重复性试验,对其IHA平均滴度进行了方差分析,均无显著性差异。对20份免疫试验鸡血清以在4℃、保存期分别为3、6、9个月的IHA的试验制剂进行了微量IHA,检出的IBDV抗体平均滴度中,3个月的与6个月的无显著差异;3个月的与9个月的及6个月的与9个月的,均有显著差异,结果表明该IHA试验制剂在4℃的保存期可达6个月。 程太平 荣俊 刘晓娜 彭本英关键词:间接血凝试验 血清抗体 一种传染性法氏囊病基因工程亚单位疫苗的制备方法和应用 本发明涉及一种用于鸡传染性法氏囊病基因工程亚单位油乳剂疫苗生产的菌种,其特征是:Escherichia coli BL21/pET-28a-VP2,CCTCC NO:M204038。该菌种的构建过程是先在表达质粒pET-... 荣俊 程太平 刘晓娜 杨待建文献传递 传染性腔上囊病病毒VP2基因表达条件的优化 被引量:3 2005年 用摇瓶培养法,对用作生产传染性腔上囊病基因工程亚单位疫苗的基因工程菌种BL21/pET28a-VP2的表达条件进行了优化研究.其结果为:温度37℃,诱导表达时间3~7h,用乳糖诱导时终浓度为20mmol/L时即达到最高表达量;用IPTG诱导时终浓度为0.33mmol/L时即达到最高表达量;乳糖的诱导效果优于IPTG. 荣俊 程太平 刘晓娜 刘园 杨待建关键词:传染性腔上囊病 大肠埃希氏菌 基因工程 亚单位疫苗 传染性法氏囊病重组亚单位疫苗免疫效力及安全性试验 2007年 以传染性法氏囊病(IBD)重组亚单位疫苗3批次实验室制品分4个剂量(即0.500 ml、0.250 ml、0.125 ml、0.075 ml)分别免疫12组14日龄SPF鸡。接种后观察各组鸡只的食欲和精神状态。免疫后第21 d,以琼脂免疫扩散试验检测IBDV血清抗体;除N组(不免疫不攻毒)外其他组均以标准强毒株BC6/85进行攻毒。攻毒后第4 d剖检,观察法氏囊及注射部位的眼观病变,检测法氏囊中IBDV抗原。结果,9个组(A、B、C、E、F、G、I、J、K)的免疫保护率与对照组(N)的免疫保护率之间差异均显著(χ2>χ20.004 2),但3个组(D、H、L)的免疫保护率与对照组的免疫保护率之间差异均不显著(χ2<χ20.004 2)。将12个试验组(A组至L组)的血清抗体水平进行方差分析,差异显著(p<0.05);以q检验进行多重比较,9个组(A、B、C、E、F、G、I、J、K)之间及3个组(D、H、L)之间差异不显著(p>0.05),而前9组与后3组之间差异显著(p<0.05)。上述结果表明,该实验制品可诱导鸡只产生显著的血清抗体水平及抗强毒攻击的免疫力,并具有可接受的安全性。 程太平 荣俊 刘晓娜关键词:传染性法氏囊病 重组亚单位疫苗 免疫效力 安全性 三峡库区移民开发、经济开发与库区可持续发展研究 李同明 梁福庆 张云 奚宏 严奉宪 刘晓娜 郑根保 刘宜霞 张平 雷享顺 朱忠贵 金明珠 张重才 谌姿 朱泽煌 樊帆 董利民 夏春萍 何蒲明 《三峡库区移民开发、经济开发与可持续发展研究》课题是2001年由教育部下达的全国人文社会科学规划“十五”重点课题。此课题是继1992年教育部下达的全国人文社会科学规划“八五”重点课题《长江三峡库区移民开发与经济开发研究》...关键词:关键词:经济开发 移民开发 可持续发展