刘海远
- 作品数：8 被引量：11H指数：2
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- 相关领域：生物学农业科学环境科学与工程水利工程更多>>
- 18% 2,4-D微乳剂对薇甘菊的防治效果
- 原产于中、南美洲的薇甘菊现已成为广东、香港沿海的一种主要外来有害植物,尤其是在深圳市多处保护地、耕地、林地、公园等为害,造成严重的生态破坏。本试验研究了2,4-D微乳剂(ME)对深圳市某废弃果园薇甘菊的防治效果。结果表明...
- 韩海涛刘海远刘婕钟国华
- 关键词：薇甘菊杂草防除
- 文献传递
- 斜纹夜蛾蜕皮响应基因E75D的克隆、原核表达分析及microRNA作用位点预测被引量：3
- 2012年
- E75是昆虫蜕皮级联反应中的早期转录因子之一。本研究运用RT-PCR和RACE技术,首次获得了斜纹夜蛾Spodoptera lituraE75D基因,命名为Sli-E75D(GenBank登录号:JQ266225),其开放阅读框全长1836bp,编码611个氨基酸残基,3'非翻译区全长为358bp,同时获得其5'非翻译区共341bp。经核苷酸序列比对分析,E75在鳞翅目昆虫间保守性较高,尤其3'非翻译区具有高保守性,但由于启动子不同,E75异构体mRNA5'端序列存在差异;经氨基酸序列比对,Sli-E75D与棉贪夜蛾Spodoptera littoralis、烟草天蛾Manduca sexta、家蚕Bombyx mori E75D的一致性分别为98.4%,79.3%和76.5%。基于E753'非翻译区的高保守性,利用PITA和RNAhybird程序预测了最有可能调控鳞翅目昆虫E75基因的3种miRNAs:miR-14,miR-33和miR-87。构建pET28a-Sli-E75D表达载体,分别转化BL21(DE3)和Transetta(DE3)菌株,检测大肠杆菌Escherichia coli稀有密码子对E75D原核表达的影响,SDS-PAGE结果显示,转化Transetta(DE3)菌株的pET28a-Sli-E75D可高效表达大小约74.79kD(含预测的67.19kDSli-E75D,7.6kDT7·Tag和His·Tag)的重组蛋白,与其理论分子质量基本吻合,而转化BL21(DE3)菌株的pET28a-Sli-E75D质粒只见微量重组蛋白表达。由于Transetta(DE3)菌株可补充大肠杆菌6种稀有密码子的tRNA,较BL21(DE3)更适合于E75D的外源表达。qPCR检测了斜纹夜蛾从末龄幼虫到成虫发育过程中各时间点Sli-E75的相对表达水平:Sli-E75在6龄幼虫期的表达量较低,从预蛹开始,表达量急剧升高,并在蛹中期达到最高峰,之后迅速下降,但成虫期表达水平又出现回升。这些结果有助于深入研究E75在昆虫蜕皮级联反应中的作用。
- 高璐左洪亮姜春来刘海远钟国华
- 关键词：斜纹夜蛾克隆MICRORNA
- 18%2,4-D微乳剂对薇甘菊的防治效果
- 原产于中、南美洲的薇甘菊现已成为广东、香港沿海的一种主要外来有害植物,尤其是在深圳市多处保护地、耕地、林地、公园等为害,造成严重的生态破坏.本试验研究了2,4-D微乳剂(ME)对深圳市某废弃果园薇甘菊的防治效果.结果表明...
- 韩海涛刘海远刘婕钟国华
- 关键词：薇甘菊杂草防除
- 文献传递
- 斜纹夜蛾铁硫亚基蛋白的表达及功能鉴定
- 2012年
- 铁硫亚基蛋白(rieske iron-sulfur protein,RISP)是线粒体复合物Ⅲ的关键蛋白亚基之一,在呼吸链电子传递过程中起到重要作用。本研究通过RT-PCR克隆得到斜纹夜蛾Spodoptera litura RISP基因SlitRISP的ORF,构建了pET32a-SlitRISP原核表达载体,SDS-PAGE和Western blot检测结果显示,SlitRISP原核表达蛋白以包涵体的形式存在于菌体沉淀中,且RISP抗体可成功用于该蛋白的免疫印迹检测。为了进一步鉴定SlitRISP在斜纹夜蛾离体细胞系SL-1中的功能,通过向细胞内转染siRNA,利用RNAi技术沉默SL-1中的SlitRISP。qRT-PCR结果表明,分别经50nmol/L和100nmol/L siRNA处理48h后,SL-1中SlitRISP的表达均几乎完全被抑制;Western blot结果显示,SL-1中SlitRISP含量显著低于CK。当SL-1SlitRISP被成功沉默后,通过检测SL-1线粒体膜电位、细胞ATP含量和细胞增殖抑制率鉴定RISP在线粒体电子传递过程中的重要作用。流式细胞仪测定结果表明,经50nmol/L和100nmol/LsiRNA处理24h后,SL-1线粒体膜电位相对于CK分别降低23.52%和11.32%,而处理48h后,SL-1线粒体膜电位则分别升高5.58%和27.66%;siRNA处理24h和48h后,SL-1ATP含量相对于CK分别降低82.71%和84.50%,最终导致SL-1细胞增殖抑制率分别为53.64%和67.94%。这些结果表明SlitRISP在SL-1中参与线粒体膜电位的形成和细胞ATP的合成。介于RISP在线粒体电子传递链中的重要作用,其可能成为新型杀虫作用靶标,这可为研制新型呼吸抑制剂提供参考。
- 左洪亮陈永高璐刘海远钟国华
- 关键词：斜纹夜蛾原核表达蛋白功能
- 吡嘧磺隆水分散片剂对华南水稻田稗草的防除效果
- 2011年
- 农药新剂型水分散片剂可提高稻田施药的方便度,节省劳动成本,应用前景广阔。10%吡嘧磺隆水分散片剂对南方抛秧水稻田和直播水稻田稗草的防除作用试验结果表明,该药剂以有效成分22.5～30 g/hm2(制剂用量每667 m2为15～20 g)药后45d内的防效分别达77%～95%和82%～95%,除草速度和药效相当或优于10%吡嘧磺隆可湿性粉剂有效成分含量22.5 g/hm2(制剂用量每667 m2为15 g)喷雾处理同期效果,能有效防除南方水稻田稗草,并且省时省力,提高工效,值得推广应用。
- 刘海远韩海涛左洪亮高璐钟国华
- 关键词：吡嘧磺隆水稻田稗草防除效果
- 斜纹夜蛾水通道蛋白1(AQP1)基因的克隆、分子特性和表达分析被引量：8
- 2013年
- 水通道蛋白(aquaporin,AQP)是生物体中一种重要的跨膜通道蛋白,它通过一些中性小分子化合物的运输,从而参与了昆虫对食物中水分再吸收、抗寒和抗干燥等重要生理机制。为研究斜纹夜蛾中水通道蛋白的基因特征和时空表达特征,本研究利用同源克隆和RACE技术获得了斜纹夜蛾水通道蛋白1(AQP1)基因的两个转录异构体,并将其分别命名为SL-AQP1A(GenBank登录号:KC999953)和SL-AQP1B(GenBank登录号:KC999954),其中SL-AQP1B比SL-AQP1A在推导的编码区5'端连续性缺失81个碱基,而其他序列完全一致;同源分析显示推导的SL-AQP1与家蚕为代表的水通道蛋白1具有较高的同源性。拓扑学和三级结构模拟显示其有经典的6个全跨膜结构域、2个半跨膜结构域、2个保守的NPA(asparagine-proline-alanine,天冬氨酸-脯氨酸-丙氨酸)结构基序及选择性水孔构件ar/R(aromatic arginine,芳香族精氨酸)。qRT-PCR结果显示,SL-AQP1整体时空表达差异性十分明显,并且SL-AQP1B的表达量显著高于SL-AQP1A;SL-AQP1在卵期和预蛹期有较高的表达量,在中肠、马氏管、血淋巴、消化腺中有相对较高的表达量,暗示其在斜纹夜蛾中存在重要的渗透压调节作用。本文结果为进一步研究水通道蛋白在斜纹夜蛾中的作用提供了一定的分子基础。
- 刘海远舒本水姜春来李良德钟国华
- 关键词：斜纹夜蛾水通道蛋白分子特性
- 印楝素诱导黑腹果蝇复眼发育异常的形态学研究
- 2012年
- 将果蝇置于含印楝素2 mg/kg的昆虫培养基中产卵,待卵孵化发育至不同虫态,运用光学显微镜及扫描电镜研究果蝇新羽化成虫复眼外观,发现复眼明显萎缩并呈现不规则状,表面粗糙,出现异常凹陷,刚毛缺失或增生,排列不规则或弯曲;运用透射电镜研究复眼超微结构,结果表明,3龄末期幼虫复眼组织细胞中染色质高度聚集成小体、小体分散,吞噬泡数量明显增多,核膜皱缩、界限模糊,蛹和新羽化成虫复眼中感光细胞丢失.这些结果确证了印楝素诱导果蝇复眼发育异常,为寻找新型昆虫生长发育调节剂提供了可能的新靶标.
- 李海怡任太军刘海远钟国华
- 关键词：印楝素黑腹果蝇复眼发育异常
- 印楝素诱导Sf-9细胞凋亡的线粒体信号途径研究
- 线粒体是动物细胞生成ATP的主要细胞器,大量研究表明,线粒体途径是细胞凋亡信号转导的核心途径。但其调控机制在昆虫与哺乳动物之间,甚至在不同类属昆虫之间(果蝇属和鳞翅目昆虫)都存在很大的差异,凋亡体的形成是否依赖线粒体释放...
- 黄劲飞刘海远胡美英钟国华
- 关键词：印楝素喜树碱细胞凋亡信号转导线粒体
- 文献传递
