刘辉
- 作品数：38 被引量：107H指数：6
- 供职机构：长春生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吴阶平医学基金吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 牛细小病毒的分离鉴定及在不同细胞中的复制动力学研究被引量：2
- 2015年
- 本研究旨在获得牛细小病毒分离株,并对牛细小病毒(BPV)在不同细胞中的复制动力学进行探讨,为牛细小病毒疫苗的开发筛选出合适的病毒株及适宜病毒扩增的细胞株。将96批次牛血清样品分别接种于BT细胞中,盲传3代,逐日观察细胞病变(CPE),对出现典型细胞病变的样品采用直接免疫荧光法检测;分离得到1株牛细小病毒,并且对这株病毒的红细胞凝集特性进行分析。通过将牛细小病毒接种在Vero、BT和MDBK 3种细胞中,筛选出适合牛细小病毒培养用的细胞株。结果,通过对96批次牛血清样品接种于BT细胞进行病毒分离培养,获得4株病毒阳性株,使用直接免疫荧光法检测,获得1株牛细小病毒,进行红细胞凝集试验,这株牛细小病毒能凝集豚鼠、马、人的红细胞,但不能凝集家兔、山羊和鸡的红细胞。这株牛细小病毒在BT细胞中可稳定传代,在MDBK和Vero细胞中盲传3代仍未检测到牛细小病毒。结果表明,通过细胞体外培养法分离得到1株牛细小病毒,可以作为牛细小病毒疫苗制备的病毒株,对这株牛细小病毒在不同细胞中的复制动力学的研究结果表明,BT细胞是最适合培养这株牛细小病毒的细胞,候选细胞株MDBK和Vero细胞不适合这株牛细小病毒的扩大培养。本研究为牛细小病毒疫苗的开发奠定了基础。
- 刘辉杨红育赵红丽李野赵虹李婷婷丁壮
- 关键词：病毒分离
- 奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌ClfA核酸疫苗的构建及免疫原性试验被引量：8
- 2012年
- 扩增了奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌ClfA基因,并将其克隆至真核表达载体pVAX1启动子下游,构建成真核表达质粒,通过体外细胞转染试验,运用IFA方法进行抗原性初步确认,所构建的重组DNA疫苗质粒能在真核细胞中表达并被金黄色葡萄球菌抗体特异性识别。为进一步评价侯选疫苗的免疫原性,进行了BALB/c小鼠免疫试验,分别检测免疫后的ELISA抗体水平、Th1/Th2类细胞因子水平以及T淋巴细胞增殖试验。结果表明,构建的核酸疫苗pVAX1-ClfA免疫小鼠后,ELISA抗体水平提高,Th1/Th2类细胞因子含量提升,T细胞增殖能力增强。
- 尹荣兰王浩然张艳晶杨正涛刘辉李琳张乃生
- 关键词：金黄色葡萄球菌DNA疫苗免疫原性
- 遗传性子宫内膜癌的研究进展被引量：6
- 2015年
- 子宫内膜癌（EC）是女性生殖道三大恶性肿瘤之一,占女性全身恶性肿瘤的7%,其中3%是遗传性非息肉性结直肠癌综合征（HNPCC）相关性EC,HNPCC妇女EC终生累积发病率是40%～60%。EC最容易发生在肠外肿瘤患者及其家族中,可分为LynchⅠ型（遗传性大肠癌）和LynchⅡ型（癌家族综合征）。HNPCC又被称为Lynch综合征,包括卵巢癌（OC）、结直肠癌、EC、肾盂和输尿管癌、胃癌、小肠癌、胰腺癌、皮肤癌及脑癌等。
- 刘辉赵艳晖
- 关键词：LYNCH综合征遗传性非息肉性女性生殖道HNPCC遗传性大肠癌癌综合征
- 金黄色葡萄球菌FnBP配体结合区基因的克隆及其原核表达被引量：1
- 2009年
- [目的]克隆金黄色葡萄球菌FnBP配体结合区基因,并构建原核表达载体,进行原核表达。[方法]设计引物,采用PCR方法扩增FnBP配体结合区基因,T-A克隆后,构建了克隆质粒pMD18-FnBP。用BamH I和EcoR I双酶切pMD18-FnBP和pET28a(+),将纯化的基因FnBP亚克隆至pET28a(+),构建重组表达质粒pET28a-FnBP,并将其转化至大肠杆菌感受态BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,并对表达产物进行分析。[结果]PCR扩增出1条约370 bp的目的片段,表达产物经SDS-PAGE分析,在30 kDa处出现了与目的蛋白一致的外源蛋白带,Western blot分析表明该蛋白具有金黄色葡萄球菌的抗原性。[结论]已成功构建了FnBP配体结合区基因,并在原核细胞中表达。
- 尹荣兰杨正涛张艳晶刘辉刘珊杨琦曹永国张乃生
- 关键词：金黄色葡萄球菌基因克隆原核表达
- PPAR-γ激活对糖基化终末产物引起的大鼠肾系膜细胞TGF-β及CTGF mRNA表达的影响被引量：10
- 2010年
- 目的观察过氧化物酶体增殖体激活受体-γ(PPAR-γ)激活对糖基化终末产物(AGEs)引起的大鼠肾系膜细胞TGF-β及CTGFmR-NA表达的影响。方法体外培养正常大鼠肾系膜细胞,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测不同浓度AGEs(0～400μg/ml-1)及不同浓度PPAP-γ)激活剂(罗格列酮)和PPAR-γ阻断剂(GW9662)对AGEs(100μg/ml-1)引起的TGF-β及CTGFmRNA表达的影响。结果给予PPAR-γ激活剂可明显减轻AGEs引起的大鼠系膜细胞TGF-β、CTGFmRNA的表达。结论PPAR-γ激活剂可以明显减轻AGEs对系膜细胞TGF-β、CTGFmRNA的表达影响,从而改善肾小球细胞外基质积聚,在糖尿病时起到肾脏保护作用。
- 刘辉于晓艳魏海峰石艳苗春生李才邹颖刚
- 关键词：糖基化终末产物转化生长因子-Β结缔组织生长因子
- 牛副流感病毒3型在不同细胞中的复制动力学分析被引量：1
- 2016年
- 目的对牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)在Vero-E6、MRC-5和MDBK 3种细胞中的复制动力学进行分析。方法将BPIV3分别接种至Vero-E6、MRC-5和MDBK 3种细胞,盲传3代,逐日观察细胞病变(CPE)情况;采用直接免疫荧光抗体法检测3种细胞盲传3代后BPIV3的增殖情况;将病毒滴度为1.0×104TCID50/ml的BPIV3分别接种至MDBK和Vero-E6单层细胞中,培养7 d,逐日测定各细胞中的病毒滴度。结果BPIV3在MDBK细胞中盲传1代即可观察到明显的CPE;在Vero-E6细胞中盲传2、3代可见CPE;在MRC-5细胞中盲传3代未见CPE。在MDBK细胞中盲传3代可检测到较强荧光信号;在Vero-E6细胞中盲传3代荧光强度较弱;在MRC-5细胞中盲传3代未检测到荧光信号。BPIV3在MDBK和Vero-E6细胞中分别于培养第5和6天时病毒滴度达峰值,分别为1.2×1010和1.0×105 TCID50/ml。结论 BPIV3在MDBK细胞中的复制动力强于Vero-E6细胞,最适用于培养该病毒,MRC-5细胞不适用于培养BPIV3。
- 赵红丽刘智慧李婷婷黄晓娜初佳芮陶冬张楠柏丛霍琦刘辉
- 关键词：VERO-E6细胞
- 骨桥蛋白和整合素α<sub>v</sub>β<sub>3</sub>在卵巢上皮性癌组织中的表达及意义
- 背景及目的：卵巢恶性肿瘤（Ovariancancer，OC）是威胁女性健康和生命的妇科常见的三大恶性肿瘤之一。其中90%的卵巢恶性肿瘤为上皮性卵巢癌，现已成为死亡率最高的妇科恶性肿瘤。因发病早期无典型症状，一旦出现症状，...
- 刘辉
- 关键词：骨桥蛋白整合素ΑVΒ3上皮性卵巢癌
- 染氟成纤维细胞中ICF-1、CTCF和VECF的表达
- 本文将通过检测染氟条件下，与骨代谢凋控密切相关的细胞因子，包括胰岛素样生长因子(1GF-1)、结缔组织生长因子(CTGF)和血管内皮生长因子(VEGF)等的表达改变，探讨氟诱导成纤维细胞(FB)成骨功能增强的作用，以及这...
- 井玲魏海峰刘辉陈春红齐玲
- 关键词：成纤维细胞氟骨症骨代谢
- 文献传递
- 银杏叶提取物减轻糖基化终末产物对大鼠肾脏TGF-β及CTGF表达的影响被引量：3
- 2011年
- 目的观察银杏叶提取物对糖基化终末产物(AGEs)引起的大鼠肾脏TGF-β及CTGF过表达的影响。方法每日给正常大鼠尾静脉注射AGE-修饰大鼠血清蛋白(AGEs组),部分大鼠同时灌胃给予银杏叶提取物(GBE组),注射天然大鼠血清蛋白(RSP组)和不施加处理的正常大鼠(空白对照组)作为对照。Elisa法检测肾皮质TGF-β及CTGF蛋白的表达,RT-PCR检测TGF-β及CTGF mRNA的表达。结果与RSP组及空白对照组比较,AGEs组大鼠尿蛋白含量明显增加(P<0.05),TGF-β及CTGF蛋白、mRNA的表达均增高(P<0.01),给予GBE后尿蛋白含量明显降低(P<0.01),TGF-β及CTGF蛋白含量及mRNA表达均明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论 GBE改善AGEs引起的肾功能变化,减轻AGEs诱导的大鼠肾皮质TGF-β及CTGF过表达。提示GBE可通过抑制AGEs引起的TGF-β及CTGF过表达而在糖尿病中起到肾脏保护作用。
- 刘辉李凤苏青于晓艳
- 关键词：银杏叶提取物结缔组织生长因子
- 溶血磷脂酸受体1在人脑胶质瘤组织中的表达及意义
- 2012年
- 目的探讨溶血磷脂酸受体1(Lysophosphatidic acid receptor 1,LPAR1)在人脑胶质瘤组织中的表达及意义。方法收集临床切除的经病理证实的良性胶质瘤组织、恶性胶质瘤组织及正常脑组织,采用RT-PCR法及免疫组织化学染色法检测各组脑组织中LPAR1在mRNA及蛋白水平的表达,并分析LPAR1表达与脑胶质瘤临床病理特征之间的相关性。结果正常脑组织、良性胶质瘤组织、恶性胶质瘤组织中均有LPAR1 mRNA及蛋白的表达;胶质瘤组织中LPAR1 mRNA及蛋白的表达水平均明显高于正常脑组织,差异有统计学意义(P<0.05),且恶性胶质瘤组织中LPAR1蛋白的表达水平明显高于良性胶质瘤组织(P<0.05);LPAR1的表达与脑胶质瘤临床病理分级相关,而与年龄、性别、肿瘤部位无关。结论 LPAR1在脑胶质瘤组织中表达增高,可能在胶质瘤发生发展的过程中发挥重要作用。
- 杨志青刘辉许万振李蕴潜
- 关键词：胶质瘤逆转录聚合酶链反应
