叶树清
- 作品数：22 被引量：63H指数：5
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划北京中医药科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 微囊藻毒素MC-LR对Raji细胞中Epstein-Barr病毒早期抗原的诱导被引量：5
- 2006年
- 研究微囊藻毒素-LR对EB病毒早期抗原的诱导作用。采用免疫酶法激活Raji细胞中EB病毒早期抗原的表达。微囊藻毒素-LR可以诱导Raji细胞中EB病毒早期抗原的表达,当与丁酸、巴豆油、TPA等促癌物协同作用时,其表达率明显增高。
- 柳丽丽叶树清钟儒刚曾毅
- 关键词：微囊藻毒素EB病毒促癌物
- Ad5F35-LMP2重组腺病毒免疫效果的研究被引量：2
- 2007年
- 目的了解含有EB病毒潜伏膜蛋白2的非复制型重组腺病毒（Ad5F35-LMP2），免疫恒河猴的特异性细胞和体液免疫的效果。方法分别使用高剂量（1．5×10^10TCID50/只）、中剂量（1．5×10^9TCID50/只）、低剂量（1．5×10^8TCID50/只）Ad5F35-LMP2重组腺病毒，同时设对照组（PBS4．0 ml／只）。肌内注射免疫恒河猴，每个月一次，共免疫3次，第0、4、8、12周时使用Elispot方法检测猴外周血EBV—LMP2细胞毒性T细胞应答，同时应用免疫酶方法检测血清中LMP2抗体。结果3个剂量Ad5F35-LMP2腺病毒免疫恒河猴均可以诱导出有效的细胞免疫应答及一定的抗体应答，免疫应答水平的高低与病毒剂量的高低有一定的关系，较高剂量产生的细胞及体液免疫应答水平比低剂量的高。结论Ad5F35-LMP2非复制型重组腺病毒疫苗可以有效的诱导恒河猴产生EBV—LMP2特异性细胞和体液免疫反应。
- 莫武宁周玲吴小兵王湛唐安洲黄光武余双庆王琦叶树清杜海军曾毅
- 关键词：腺病毒疱疹病毒4型膜蛋白质类恒河猴
- Epstein－Barr病毒潜伏膜蛋白（LMP）基因在哺乳动物传代细胞中的表达被引量：3
- 1995年
- ＥＢ病毒潜伏膜蛋白（ＬＭＰ）是由病毒编码的主要的与病毒致宿主细胞潜伏感染有关的蛋白之一。我们用基因重组技术，把含有ＬＭＰ基因（ＢＮＬＦ１）３个外显子（ｅｘｏｎ）开放阅读框架（ＯＲＦ）的长１．８０ｋｂｐ的ＤＮＡ片段，和能分解ＨｙｇｒｏｍｙｃｉｎＢ的含有ＳＶ４０早期启动子和ＨｇｒｙｏｍｙｃｉｎＢ磷酸转移酶全基因（长１０２５ｂｐ）的ＤＮＡ片段（长１．６０ｂｐ），同时重组于亚克隆载体ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ（ｐＢＳ）中，并使该重组质粒ｐＢＳ－ＬＭＰ－Ｈｙｇ（长５７６７ｂｐ）在乳地鼠肾传代细胞（ＢＨＫ）中获得表达。ＢＨＫ细胞在经此重组质粒转染后，ＬＭＰ阳性细胞是２％，在ＨｙｇｒｏｍｙｃｉｎＢ的持续压力下，ＬＭＰ表达细胞率可达２０％。３个月后，ＬＭＰ表达细胞逐渐减少。５个月后，不能测到ＬＭＰ表达细胞。经免疫荧光和蛋白印迹（Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ）实验证实，人鼻咽癌、风湿性关节炎和正常人血清中不含有抗ＬＭＰ抗体。
- 纪志武李宝民叶树清曾毅
- 关键词：EB病毒潜伏膜蛋白
- 鼻咽癌血清学检测方法的改进被引量：1
- 2009年
- 目的改进现有鼻咽癌血清学早期诊断方法，提高检测灵敏度。方法用链霉亲和素一生物素放大免疫酶法与既有常规免疫酶法对鼻咽癌防治示范基地所取294份普查血清IgA／VCA，IgMEA抗体进行血清学检测，并用SPSS统计软件对检测结果进行χ^2检验和t检验。结果共检测30岁以上294份普查人群血清，其中鼻咽癌患者血清106份，健康人血清188份。改进的链霉亲和素．生物素放大免疫酶法与既往已有的免疫酶法相比，血清IgMVCA、IgMEA抗体的检测阳性率增加；检测血清抗体的几何平均数明显提高。结论改进方法可以提高血清学检测的灵敏度，同时保证了检测结果的特异性，提高了鼻咽癌的检出率，可以应用于鼻咽癌早期筛查工作。
- 詹少兵钟建明麦稚平叶树清周玲曾毅廖建
- 关键词：疱疹病毒4型鼻咽肿瘤生物素
- 携带EBV-LMP1Δ基因的DNA疫苗和腺病毒疫苗联合免疫效果研究被引量：6
- 2012年
- 目的构建携带EBV-LMP1Δ基因的DNA疫苗,并与携带LMP1Δ基因的重组非复制5型腺病毒疫苗联合免疫,观察在小鼠体内诱导LMP1Δ特异性细胞免疫应答的效果。方法用PCR方法获得去除癌基因的LMP1Δ基因,插入到pcDNA3.1(+)-His质粒载体中,构建携带LMP1Δ基因的DNA疫苗pcDNA-LMP1Δ。使用pcDNA-LMP1Δ单独或与携带LMP1Δ基因的非复制5型重组腺病毒疫苗Ad-LMP1Δ联合免疫Balb/C小鼠,末次免疫1周后应用IFN-γELISPOT方法检测小鼠脾淋巴细胞中LMP1Δ特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)水平。结果构建成pcDNA-LMP1ΔDNA疫苗,酶切及测序证实LMP1Δ基因插入正确,在细胞中能有效表达LMP1Δ蛋白。pcDNA-LMP1Δ单独免疫Balb/C小鼠能够诱导产生LMP1Δ特异性的CTL应答;与Ad-LMP1Δ联合使用后,能够提高特异性细胞应答水平。结论构建的重组DNA疫苗pcDNA-LMP1Δ能够有效表达LMP1Δ蛋白,并能够在小鼠体内诱导出LMP1Δ特异性的CTL反应;与重组腺病毒疫苗联合应用,可以提高特异性CTL应答水平。
- 尉秀霞王湛周玲杜海军叶树清曾毅
- 关键词：EB病毒潜伏膜蛋白-1DNA疫苗
- 诱导EB病毒早期抗原表达的中草药和植物的筛选被引量：2
- 1999年
- 应用Ｒａ．ｉ细胞筛选了２６８个科的１６９３种中草药和植物，共发现１８个科的５２种有诱导ＥＢ病毒早期抗原表达的作用。大戟科和瑞香科最多，分别有２５种和７种，其中甘遂、芫花、黄芫花，了哥王、苦杏仁、怀牛膝和巴豆等是常用药物。本文还讨论了这些草药和植物在体内对ＥＢ病毒的激活及其与鼻咽癌发生的关系。
- 曾毅钟建明叶树清倪芝瑜苗学谦莫永坤
- 关键词：EB抗原表达中草药植物诱导物
- HIV DNA疫苗与重组腺病毒伴随病毒联合免疫效果的研究被引量：2
- 2004年
- 目的 构建含HIV 1B亚型中国株gagV3基因的DNA疫苗及重组腺病毒伴随病毒(rAAV)疫苗 ,并研究DNA疫苗和rAAV联合免疫的免疫效果。方法 将HIV 1B亚型中国株gagV3基因克隆入真核表达载体pCI neo上 ,构建了含HIV 1gagV3基因的DNA疫苗pCI gagV3。采用电击法将pCI gagV3质粒转染p815细胞 ,用G4 18压力筛选 ,得到转入重组质粒的细胞系p815 gagV3,用免疫酶法检测细胞系中HIV 1基因的表达。用该DNA疫苗进行小鼠免疫实验 ,检测免疫效果 ;用该DNA疫苗初次免疫 ,含同样gagV3基因的重组腺病毒伴随病毒rAAV gagV3加强免疫 ,采用免疫酶法检测免疫小鼠血清中HIV 1特异性的抗体水平 ,用乳酸脱氢酶法检测免疫小鼠的HIV 1特异性CTL水平。结果 pCI gagV3可以在p815细胞中表达HIV 1的基因 ,免疫BALB c小鼠后可以在小鼠体内诱发HIV 1特异性的细胞和体液免疫反应。HIV 1特异性抗体滴度为 1∶2 0 ;效靶比为 5 0∶1时 ,CTL平均杀伤率为4 1 7%。pCI gagV3与rAAV gagV3联合免疫并不能明显提高抗体水平 ,但可以提高CTL反应 ,效靶比为 5 0∶1时 ,CTL平均杀伤率为 6 1 3% ,高于单独用DNA疫苗或重组AAV疫苗免疫后产生的CTL活性。结论 DNA疫苗与重组腺病毒伴随病毒联合免疫可以提高免疫小鼠产生的HIV 1特异性CTL反应。
- 刘雁征周玲王琦叶树清李红霞曾毅
- 关键词：DNA疫苗联合免疫B亚型特异性CTL免疫小鼠中国株
- 穿心莲提取物和阿昔洛韦对EB病毒抗原表达抑制作用的对比实验被引量：10
- 2007年
- 目的观察穿心莲提取物(炎琥宁)和阿昔洛韦(aciclovir)对EB病毒抗原表达有无抑制作用,并比较两者对EB病毒的作用强弱。方法免疫酶法测定炎琥宁及阿昔洛韦对Raji细胞早期抗原(early antigen,EA)的表达,分别计算出两者的阻断率(IR)。结果炎琥宁在无毒的浓度下,对Raji细胞EB病毒EA抗原表达有明显的抑制作用,阿昔洛韦在无毒的浓度下,对EB病毒EA抗原表达也有抑制作用。结论炎琥宁抑制EB病毒抗原的表达,其作用较阿昔洛韦为强。
- 刘晓红叶树清周玲李黎张忠浩刘力戈杨春霞郑杨王新佳詹少彬王绮
- 关键词：EB病毒抗原表达阻断
- 热毒净及阿昔洛韦对EB病毒抗原表达抑制作用的对比实验被引量：2
- 2007年
- [目的]观察热毒净及阿昔洛韦对EB病毒抗原表达有无抑制作用,并比较两者对EB病毒的作用强弱。[方法]免疫酶法测定热毒净及阿昔洛韦对Raji细胞早期抗原(EA)的表达,分别计算出两者的阻断率(IR)。[结果]热毒净在无毒的浓度下,对Raji细胞EB病毒EA抗原表达有较强的抑制作用,阿昔洛韦在实验的浓度下,对EB病毒EA抗原表达也有抑制作用。[结论]热毒净与阿昔洛韦比较能较强抑制EB病毒抗原的表达。
- 刘晓红叶树清周玲张忠浩刘力戈杨春霞郑杨王新佳王绮
- 关键词：热毒净EB病毒抗原表达阻断
- DC—LMP2与rAd—LMP2所诱导的细胞免疫应答效果研究被引量：2
- 2013年
- 目的比较DC-LMP2与rAd—LMP2在BALB／c小鼠中的免疫效果。方法从BALB／c小鼠中分离骨髓细胞，在细胞因子作用下体外诱导培养获得小鼠树突状细胞（mDC），再以100MOI的含EB病潜伏膜蛋白2的重组腺病毒（rAd—LNP2）感染，获得DE—LNP2，免疫酶法确定LMP2在DC中表达。于0，2，4周，分别以PBS、DC-LMP2和rAd-LMP2肌肉免疫BALB／c小鼠，第5和8周检测小鼠体内LMP2特异性细胞应答水平。结果骨髓细胞体外成功诱导获得DC，LMP2在DC中表达。DC—LMP2和rAd—LMP2均可诱导LMP2特异性细胞免疫应答，随时间推移而减弱。rAd—LMP2诱导特异性细胞免疫应答水平高于DC—LMP2。结论肌肉免疫rAd—LMP2能够在BALB／c小鼠中诱导较强的LMP2特异性细胞免疫应答。
- 杜海军王湛尉秀霞周玲叶树清曾毅
- 关键词：树突细胞病毒包膜蛋白质类
