周远成
- 作品数：67 被引量：250H指数：9
- 供职机构：四川农业大学更多>>
- 发文基金：四川省科技支撑计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学石油与天然气工程更多>>
- 规模化猪场常见传染病的样品采集方法被引量：1
- 2012年
- 实验室检测与分析主要针对动物的传染性疾病。动物传染病是危害养殖业最严重的一类疾病，它不仪可能造成动物大批死亡，而且某些人兽共患传染病还能给人类腱康带来严重威胁。随着我国规模化养殖的不断发展，饲养高度集中，一旦暴发传染病将会造成严重经济损失。因此，做好规模化养殖场传染病检疫与监测至关重要。样品采集是传染病检疫与检测的重要环节之一，
- 代洪波林艳周远成吴江江朱玲
- 关键词：常见传染病样品采集规模化猪场规模化养殖场动物传染病人兽共患传染病
- A型流感病毒在猪群中的流行情况
- 2013年
- 根据病毒内部核蛋白（NP）和基质蛋白（M）抗原性的不同，流感病毒可分为A、B、C3种类型，其中A型是造成流行的主要病原。A型流感病毒广泛分布于世界各地的猪群中，通过猪体流感病毒可完成禽一猪一人的传播过程，已有很多文献记载其发生过多次种间传播。当前，科研工作者和公众对A型流感病毒的关注不仅仅限于兽医学意义，更在于其潜在的公共卫生意义。本文对现有的关于A型流感病毒在猪群中传播的报道进行回顾，同时着重阐述其在猪种群内和种群之间的传播途径和影响传播的因素。
- 魏浩澈季宏伟徐志文周远成陈蕾吴云飞
- 关键词：A型流感病毒猪群公共卫生意义基质蛋白种间传播
- 猪轮状病毒四川株的分离鉴定及增殖规律被引量：9
- 2014年
- 为了解猪轮状病毒（PoRV）在MARC-145细胞系上的培养特性及增殖规律，本试验利用MARC-145细胞，从四川仔猪腹泻样品中分离到1株PoRV，并通过PCR检测、病毒理化实验与微量中和实验证实，命名为SC-R株。用含不同浓度胰酶营养液培养SC-R株48h后，分别收集病毒液进行定量分析；同时，以SC-R分离株感染MARC-145细胞，在感染后不同时间分别收集感染病毒液，利用PoRV荧光定量检测方法对不同样品中病毒RNA进行定量分析，绘制PoRV生长曲线。结果表明，用含3％胰酶营养液培养的细胞液中PoRV的RNA含量明显高于其他组；-步生长曲线显示细胞外病毒RNA含量呈“s型”曲线增长，感染后0～8h为潜伏期，病毒RNA含量维持在较低水平；8～36h为突破期，病毒RNA含量呈对数增长；感染48h增长速度减缓，维持在较高水平，逐步进入稳定期。胰酶可增加PoRV对细胞的感染性，3％是本试验最为适用的胰酶浓度；PoRV感染MARC-145后在细胞内增殖并逐步释到细胞外。
- 杨文宇朱玲周远成郭万柱徐志文
- 关键词：TCID50胰酶
- 猪流感病毒M2多肽抗体间接ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2015年
- 为建立快速检测猪流感病毒抗体的血清学方法,利用合成的甲型流感病毒M2蛋白多肽作为包被抗原,建立了检测猪流感病毒血清抗体的间接ELISA,并对各种检测条件进行了优化。结果显示,优化后确定的抗原最适包被量为250ng/孔,血清最佳稀释度为1∶100,酶标二抗最佳稀释度为1∶4 000。在优化条件下,阴阳性临界值的判定标准为0.249。用建立的间接ELISA对CSFV、PRRSV、PCV2、PPV、PRV、FMDV、JEV阳性血清进行了检测,均无交叉反应。用该方法对280份冬季采集的猪血清样品进行检测,有60份样品呈现阳性;同时用IDEXX甲型流感病毒抗体检测试剂盒进行平行检测,有61份样品呈现阳性,两者的符合率达到98.35%。结果表明,建立的ELISA具有良好的敏感性、特异性和可信度。本研究为猪流感的诊断和流行病学调查提供了一种准确、快速、简便的方法。
- 刘红亮周远成刘小琬李萍周桐枫徐志文朱玲杨泽晓
- 关键词：猪流感病毒间接ELISA
- 猪环曲病毒N基因的克隆及生物信息学分析被引量：1
- 2015年
- 为研究猪环曲病毒(PToV)N蛋白的生物信息学特征,运用RT-PCR技术扩增猪环曲病毒N基因,测序并对其进行生物信息学分析。结果成功获得了492bp的PToV N基因(GenBank登录号为KM036209)。经生物信息学分析,此序列编码163个氨基酸,理论等电点(pI)为12.14,理论分子质量为18 695.5u,不稳定系数为77.47;不同密码子对同一氨基酸选择上呈现一定的偏嗜性;最大疏水指数为1.589,最小疏水指数为-3.533;无信号肽和跨膜区;抗原表位主要位于N末端和C末端。预测其可能包含4个N-糖基化作用位点,2个蛋白激酶C磷酸化作用位点、1个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化作用位点、1个N-豆蔻酰化位点。进化树分析结果显示,KM036209与韩国株和上海株亲缘关系很接近,与荷兰及西班牙株不属于同一分支。
- 周桐枫周璐周远成刘小琬徐志文朱玲郭万柱
- 关键词：N基因克隆生物信息学分析
- 一例猪伪狂犬病病毒的分离鉴定及综合防治措施被引量：1
- 2015年
- 无菌采集疑似猪伪狂犬病病猪脑组织,进行病毒的分离鉴定。经PCR检测为阳性的病料接种PK-15细胞进行病毒分离,将所分病毒暂命名为SC株。蚀斑实验测定病毒滴度,并采用PCR和琼扩实验对其进行进一步鉴定。结果:PRV阳性病料接种PK-15细胞,传至第5代后产生稳定细胞病变,主要表现为细胞变圆、变亮、聚堆且可见典型的空斑,而对照组细胞贴壁生长良好;基于PRV gE基因的PCR检测,扩增产物为378 bp,与预期目的条带一致;用病毒蚀斑技术测定该分离株的滴度为2.65×104 PFU/mL;琼扩实验显示病毒原液至32倍稀释后均能与PRV阳性血清形成可见沉淀线。以上结果均表明所送检病猪为PRV阳性,据此为猪场提出综合防治措施。
- 杨凡徐志文李萍方和俊郭博周远成
- 关键词：猪伪狂犬病病毒
- 猪环曲病毒病原特点和流行病学被引量：5
- 2013年
- 猪环曲病毒在世界范围内广泛分布,猪群感染率高,在腹泻病例中检出率高,被认为是一种可能的猪腹泻病原。凸隆病毒的型间重组和抗原交叉反应,意味着猪环曲病毒存在人兽共患的风险。基于近年在我国部分地区因为仔猪腹泻导致了较大损失,本文介绍了猪环曲病毒发展历史,综述了该病毒基因组和蛋白特点、流行病学、实验室诊断等,以期为相关研究提供参考。
- 陈蕾朱玲周远成郭万柱
- 关键词：腹泻
- 猪瘟病毒野毒株TaqMan-MGB荧光定量PCR鉴别方法的建立与应用被引量：23
- 2009年
- 【目的】建立一种快速、敏感、特异地检测猪瘟病毒野毒的一步TaqMan-MGB荧光定量PCR方法,为临床鉴别猪瘟野毒和HCLV疫苗毒提供了准确可靠的工具。【方法】在猪瘟病毒基因组5′端非编码保守区设计一对猪瘟病毒通用引物和一条特异性MGB探针,通过优化,得到最佳反应体系和反应条件,进行特异性、灵敏度和临床样本符合检验。【结果】该方法在100～10-7范围内线性相关系数为0.998,检测极限达5.3×10-2pg病毒核酸;对24个质控样本检测结果显示,该方法能检测除猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV)以外的猪瘟流野毒株,其它猪相关致病病原检测阴性;对122份疑似猪瘟样本检测的结果与本实验室建立的RT-nPCR方法的符合率为94.3%(115/122),阳性和阴性符合率分别为86.4%(38/44)和98.7%(77/78),Kappa值为0.87>0.75【。结论】建立的一步TaqMan-MGB荧光定量PCR方法能鉴别猪瘟野毒和HCLV疫苗毒,且特异性好、灵敏度高、与笔者先前建立的RT-nPCR方法对临床样本的检测结果具有高度的一致性。
- 刘俊王琴范学政徐璐赵启祖黄伟汤波沙莎周远成陈蕾邹兴启
- 关键词：猪瘟荧光定量PCR兔化弱毒疫苗
- 猪呼肠病毒研究进展
- 2014年
- 猪呼肠病毒(Porcine reovirus)属于呼肠病毒科(Reoviridae)正呼肠病毒属(Orthoreovirus),基因组由10条分节段的dsRNA片段组成,编码11种多肽。猪感染呼肠病毒后多不表现明显的临床症状,但严重者可引起呼吸系统或胃肠道疾病。论文就近年来国内外对猪呼肠病毒形态特征、理化特性、培养特性、分子生物学、致病机制、病毒检测及防控措施等方面的研究进展进行综述,为猪呼肠病毒的深入研究提供参考。
- 刘鹏娟黄山朱玲周远成卓秀萍覃娟娟顾凡
- 关键词：呼肠病毒分子生物学病毒检测
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒流行病学研究进展
- 2014年
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)又称为"猪蓝耳病",是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染而引起的一种病毒性传染病,以仔猪的呼吸道疾病和母猪生殖障碍为主要特征。该病发生以来,给世界各地区养猪业造成了不可估量的经济损失,蓝耳病已经成为集约化养猪的主要疫病之一。就目前PRRSV基因的多样性及我国现阶段主要流行的PRRSV基因变异情况作一个概述。
- 周桐枫周远成刘小琬徐志文朱玲
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒多样性基因变异
